水质污染对实验室检测的常见影响及处理 | 案例解析

作者 王冬莲恩泽医院检验科

来源 妙毕生化

1、问题描述

2021年2月1日，自动审核突然提示我们许多病人UA 、CREA检测结果出现了超过审核范围、与历史结果比较差异大预警。人工审核发现许多CREA与历史结果比较升高50%左右，UA与历史结果比较升高接近100%。

出现了什么问题？

半小时前两台生化仪质控结果是都在控的。于是我们重测相同质控品，两台生化分析仪UA与CREA质控结果均出现13S失控。CREA两水平质控结果较早上第一次结果增加了50%左右，UA两水平质控结果较早上第一次结果增加了100%左右。

早上质控结果均在控，为什么半小时后两台生化分析仪UA与CREA质控结果均失控了？

2、初步分析

试剂、质控品、校准、人员均未变，难道仪器出现问题了？两台仪器也不大可能同时出现检测部件故障，难道检测系统出现了污染？水质、反应杯、搅拌棒污染等？

我们检测了水质电导率，发现电导率真的发生了变化，平时电导率为0.1μs/cm左右，而目前电导率为0.51 μs/cm。我们医院的纯水设备由设备科集中管理，我们询问水质管理员，回答说机房水质正常。实验室水质电导率为0.51μs/cm，按照国际二级水电导率标准（≤0.5μs/cm），基本符合要求，按照也符合仪器冲洗要求（≤2μs/cm），那UA、CREA质控结果为什么失控呢？

3、探索分析

7:55 为了验证检测系统是否发生污染？

我们对UA、CREA项目进行了试剂空白定标.发现UA试剂空白吸光度与1月31日比较发生了巨大变化，0点试剂空白吸光度P0增加了8倍左右，由0.0010升高到0.0091，27点试剂空白吸光度Py增加了4倍左右，由0.0022升高到0.0105。

3、查找真因

7:55 为了验证检测系统是否发生污染？

我们对UA、CREA项目进行了试剂空白定标.发现UA试剂空白吸光度与1月31日比较发生了巨大变化，0点试剂空白吸光度P0增加了8倍左右，由0.0010升高到0.0091，27点试剂空白吸光度Py增加了4倍左右，由0.0022升高到0.0105。

CREA试剂空白吸光度与1月31日比较也发生了明显变化， 0点试剂空白吸光度PO与第10点试剂空白吸光度PX增加了26%，27点试剂空白吸光度PY增加了2.5倍左右，由0.0081升高到0.0240。

尿酸是浓缩试剂，反应过程中R1浓缩试剂需加52μl的稀释水，R2浓缩试剂需加10μl的稀释水，稀释水占总反应体积一半以上。尿酸试剂空白吸光度不仅与浓缩试剂有关，也与稀释水有很大关系,UA试剂没有改变，而UA试剂空白吸光度发生巨大变化，难道稀释水出现污染？CREA为非浓缩试剂，反应过程不加稀释水，试剂没有改变，为什么CREA试剂空白吸光度也发生明显变化呢？

8:38 为了验证检测系统污染是否持续存在，我们又对UA项目进行试剂空白定标，结果发现与之前UA定标比较,0点试剂空白吸光度PO下降了，而27点试剂空白吸光度PY又增加了20多倍。

那我们的质控结果又会怎么变化呢？

我们又重测了质控，发现CREA两水平质控结果较第二次又增加了40%，尿酸两水平质控结果较第二次又增加了1倍左右。同时发现，3次质控中TP、ALP、γ-GT、LDH质控结果出现缓慢下降的趋势 ,而3次质控中GLU、TG、TC、HDL-C、LDL-C的质控结果出现升高的趋势。

相同仪器，质控品、校准品、试剂、人员未变，机房水质没有变化，实验室的水质电导率虽然升高了，但基本符合要求。为什么有些质控结果发生巨大变化，有些质控结果发生缓慢升高，有些质控结果发生缓慢下降，有些质控结果几乎无变化呢？

4、查找真因

我们来到纯水机房，查找质控结果变化的真因。在我们再三询问下，纯水管理员告诉我们，昨天晚上对纯水净化管路及储存水箱进行了过氧乙酸消毒处理，消毒后也用纯水对整个净化管路清洗1小时，目前机房的水质监测符合要求。

过氧乙酸、尿酸、氧化反应…

问题还是在水！经过仔细排查，发现消毒前没有将实验室纯水出口管路阀门关紧，导致消毒液进入实验室纯水供应管路。

过氧乙酸消毒剂是由A液和B液按比例配成，A液由过氧乙酸、过氧化氢、乙酸、稳定剂和去离子水组成，B液含有金属抗腐蚀剂、稳定剂、去离子水等。尿酸酶-过氧化物酶法测定尿酸，UA含量与H2O2含量成正相关，UA为浓缩试剂，反应过程中加入了大量污染H2O2的稀释水。仪器清洗过程中，自动将浓缩洗液与一定比例的污染了H2O2的纯水配成清洗液，导致反应杯、搅拌棒清洗过程中，残留的H2O2也参与反应，由于样本本身UA含量低，为μmol级别，H2O2污染影响大，导致UA结果异常升高。肌氨酸氧化酶法测定CREA，CREA含量与H2O2含量成正比，CREA为非浓缩试剂，反应过程中虽然不加稀释水，但是反应杯、搅拌棒等残留的H2O2成分参与反应，而样本本身CREA含量低，为μmol级别，所以污染影响大，导致CREA结果异常升高。GLU、TG、TC、HDL-C、LDL-C与CREA一样，均为非浓缩试剂，反应原理也是Trinder反应，结果与H2O2的含量均成正相关，但是标本本身含量高，为mmol/L级别，受H2O2污染影响小，结果升高不明显。血清ALP、γ-GT、LDH、TP在碱性条件下反应最适宜，污染过氧乙酸消毒剂，PH降低，影响反应，导致结果降低。由于样本本身含量高，受H2O2污染影响小，结果下降不明显。

5、问题处理

用纯水对实验室的进水管路反复冲洗1小时, 更换生化分析仪储存的纯水及清洗液，反复冲洗1小时后用。对样本针、试剂针进行灌注清洁，两次W2保养，清洁污染的反应杯、冲洗站，光路校准通过。重新定标，定标吸光度恢复正常，重测质控，质控均在控。重测病人结果，检测结果符合临床诊断。

6、总结

大家都知道水质质量与检验结果密切相关。水是实验室溶解稀释试剂、校准品、质控品必不可缺的材料，也是仪器清洗保养的必需品，纯水的应用覆盖了整个实验过程包括试剂配制、项目校准、样品检测、仪器清洗等等。据统计，目前临床检验中结果出现问题，而又找不到原因时，有一半的可能性是来源于纯水的质量。因此大家在日常工作中需要对水质保持关注。

分析用水中污染物对实验室检测的常见影响

#离子成分影响：如纯水中含Na、CL、Ca等离子会影响电解质、血凝等结果检测。如纯水中含有重金属离子，因为重金属离子具有细胞毒性，可致细胞死亡，会影响细胞培养。

#PH影响：如纯水暴露在空气中，空气中的CO2会与水反应生成碳酸，使PH下降，影响反应。所以纯水供应管路应密封，通气口取水处应安装空气过滤器，避免受空气中的CO2、细菌及其他杂质污染。

#细菌污染影响：纯水不含有氯化物，较自来水更容易长菌，并形成菌膜，细菌及菌膜在生长过程中分泌各种离子、酶、内毒素等污染水质，除引起部分试剂失去活性外，在光度分析中，引起高背景吸收，影响常规检测，包括特殊检测如DNA测序、电泳分析、高效液相色谱分析。

#有机物污染影响：机物能与Ca2+、Mg2+等发生螯合反应并遮蔽离子成分的导电性能，使得电导率不能准确测定，并且有机物能影响电解质测定，因此检测纯水的有机物水平与测定电导率同样重要。

规范实验室水质管理

1将自动化纯水系统设备及其生产的纯水与实验室的设备、试剂及耗材管理一样，建立自动化纯水系统设备档案及水质监测档案;并且纯水系统设备需要专人专职管理，管理员需要经过培训、考核、授权。

2做好纯水设备定期与不定期维护保养，包括定期更换活性炭、滤芯耗材，每季度对净化管路及储存水箱清洁消毒1次，为了避免再次发生消毒液污染实验室纯水，影响检验报告，每次消毒保养时，需有检验人员参与监督；

3纯水设备及水质监测仪每年由第三方权威计量检定机构定期校准，保证纯水设备及水质监测仪性能可靠。

4一级水在需要时制备，避免保存容器的金属、有机物溶出，及空气中CO2等污染。

5复溶质控品、校准品、试剂稀释水直接关系到检测结果，必须达到试剂用纯化水标准,也就是达到一级水标准。

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编辑：笪文武 审校：陈雪礼