作者 | 王晓慧、黄紫玲
指导专家 | 彭道波（副主任技师）
单位 | 南方医科大学南方医院增城分院
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前 言
新生儿溶血病(hemolytic disease of newborns，HDN)是指母婴血型不合而引起的胎儿或新生儿的免疫性溶血性疾病。
胎儿的红细胞进入母体循环中，致使母体产生相应的IgG抗体，该类抗体通过胎盘作用于胎儿的红细胞，使其产生不同程度的溶血现象。
临床表现为胎儿水肿、贫血、早产或死胎，新生儿黄疸、贫血、肝脾肿大、水肿、核黄疸后遗症等。HDN常见于ABO血型系统和Rh血型系统的血型不合，因ABO血型不合导致的HDN最为常见，Rh血型系统抗体致HDN相较于ABO溶血少见但程度严重。
因此，准确的围产期HDN监测可为早期防治提供依据，对优生优育、提高婴儿生存质量具有重要的现实意义。
对HDN的早期诊断与防治，溶血三项试验（直接抗人球蛋白试验、游离试验、放散试验）对HDN的临床诊断具有重要价值。下面分享一例Rh新生儿溶血病的案例检测经过。
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案例经过
某天上午，我院输血科接到一例新生儿溶血病检测的脐血标本。检测前已知母亲血型为：O型，RhD阴性。常规使用微柱凝胶法进行溶血三项试验，试验结果如下：
血型
抗体筛选试验
直接抗人球蛋白试验
A+
阴性
2+，阳性
根据初步的试验结果，患儿ABO血型为A型,加上母亲ABO血型为O型，首先考虑ABO血型不合，患儿可能会发生ABOHDN，于是进行ABO HDN游离放散试验，采用热放散的方法进行放散试验。
（抗筛细胞均为O型红细胞，一般选取其中任一细胞做为阴性对照，本次试验选取Ⅱ号抗筛细胞作为阴性对照）
游离试验
放散试验
+Ac
+Ac
+Bc
+OⅡ
-；阴性
-；阴性
-；阴性
3+，阳性
结果比较意外，与预期结果不一样。游离Ac、放散Ac试验结果均为阴性，放散试验的阴性对照却是阳性。结合上一步的抗筛试验阴性结果与直抗试验阳性结果，我们初步排除ABO HDN。
那么放散试验检出的不规则抗体是什么呢？我们带着疑惑进行下一步试验。
抗筛Ⅰ
抗筛Ⅱ
抗筛Ⅲ
2+
2+
阳性
首先我们查阅患儿、母亲的相关病例，并联系临床抽取母亲的标本，进行抗体筛选试验。
母亲抗筛Ⅰ、Ⅱ阳性，为了进一步明确抗体类型，我们用了三个不同批号的抗筛细胞进行检测。从三个不同批号的的细胞格局图来看，母亲体内的不规则抗体可能是抗D。
通过病例记录得知，孕妇在28周时注射了抗D免疫球蛋白。推测母亲抗筛阳性可能是注射的抗D所致。那患儿放散出来的不规则抗体是否来源于母亲体内的抗D？
为了验证这一猜想，进行了下一步的试验：用新生儿余下的放散液加入Ⅲ号抗筛细胞（RhD阴性）进行间接抗人球蛋白试验。试验结果为阴性。
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案例分析
从以上试验分析，患儿的红细胞被母亲体内的IgG类抗体致敏，而放散试验阳性可能是母亲曾注射过抗D免疫蛋白所致。因实验室条件限制，没有进行抗体鉴定，未能明确母亲血清中的抗体就是抗D，但从进一步的试验分析怀疑是抗D，而患儿的放散试验检出的不规则抗体可能是抗D。
直抗试验阳性，游离试验阴性（患儿抗筛阴性），放散试验阳性，提示该患儿有RhHDN。明确这一结论后，输血科人员立即电话告知临床本次试验结果。医院多学科团队紧密配合，提前预案，精心防护，患儿最后顺利出院。
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总 结
本次试验较容易漏检RhHDN,患儿的血型与母亲的不同，一般情况下更多考虑的是ABOHDN。若不是放散试验加了O型细胞做阴性对照，我们可能较难发现放散检出不规则抗体。
溶血三项试验中，游离试验阴性（即抗体筛选试验阴性）的原因可能是母体IgG抗体进入胎儿体内的量较少，少量的抗体吸附到胎儿的红细胞上，则胎儿血浆中无游离的抗体，或是血清中抗体的效价较低，与本次试验结果相对应。综上所述，做好阴阳对照试验是本次诊断RhHDN的关键因素。
【参考文献】
[1]郭莹莹,霍姿含,王震,刘冰.1350例新生儿溶血三项试验的血清学检测分析[J].中国免疫学杂志,2016,32(09):1357-1359+1363.
[2]马筱洁,王儒彬,李强,林姗,文军.147例Rh血型系统意外抗体致新生儿溶血病回顾性分析[J].临床血液学杂志,2021,34(02):102-104.
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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼
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