CY5-纤维蛋白原(CY5-labeled Fibrinogen,也叫CY5标记纤维蛋白原)是将近红外荧光染料CY5共价偶联到纤维蛋白原(常为牛源)上得到的荧光标记蛋白探针,同时保留了纤维蛋白原的天然生物学活性和CY5近红外成像优势,是凝血机制、血栓成像研究的核心科研工具。
基础信息
- 英文全称:CY5-labeled Fibrinogen (Bovine),简称CY5-Fibrinogen
- 中文名称:CY5-纤维蛋白原,也称为花菁染料CY5标记纤维蛋白原、CY5标记牛纤维蛋白原
- 荧光参数:最大激发波长≈650nm,最大发射波长≈670nm,属于远红光/近红外荧光范围
- 纯度:95%
- 外观形态:深蓝色至黑色冻干粉/溶液
- 溶解性:易溶于pH 7.2-7.4的PBS缓冲液、生理盐水,可溶于DMSO、DMF等有机溶剂
- 储存条件:-20℃干燥避光密封保存,分装冻存避免反复冻融,远离强还原剂、强氧化剂、重金属化合物,保质期12个月,仅用于科研,不可用于人体或临床应用
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CY5-纤维蛋白原
制备与纯化方法
- 原料预处理:从牛血浆提取纯化天然纤维蛋白原,溶解于不含游离氨基(如Tris、甘氨酸)的弱碱性缓冲液(pH 8.0-8.5)中,调整蛋白浓度至2-10mg/mL,保证标记效率;
- 染料准备:使用CY5-NHS酯(活性酯形式的CY5),用无水DMSO溶解配制成10mM储备液,分装冻存避免反复冻融;
- 共价偶联:按CY5与纤维蛋白原摩尔比3-10:1的比例,逐滴将染料加入蛋白溶液中,4℃避光搅拌反应2-12小时,维持反应pH稳定,避免蛋白变性;
- 终止纯化:加入甘氨酸终止未反应的染料,通过凝胶过滤层析或透析去除未结合的游离CY5,收集蛋白峰得到纯化产物;
- 质量验证:通过紫外分光光度法计算标记度,SDS-PAGE验证蛋白纯度,凝血实验验证纤维蛋白原聚合活性,合格产物冻干后保存。
注意事项
- 储存时必须避光分装冻存,反复冻融会导致纤维蛋白原聚集变性,降低凝血活性和荧光均一性;
- 实验时现配现用,溶解后避免长时间室温放置,剩余未使用的标记蛋白建议弃用,不建议再次冻存;
- 本产品仅可用于体外科学研究和动物实验,不可用于临床诊断或人体应用。
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