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LifeAct-GFP标记的裂殖酵母,左:宽场图像,中:应用传统NanoJ-SRRF算法后的图像,右:应用开发中的新型NanoJ-SRRF算法(针对CMOS设备优化,拟命名为SRRF4CMOS)处理后的图像。所有图像均使用Prime 95B科学级CMOS相机拍摄,曝光时间为10毫秒(每秒生成1帧超分辨率图像)。
背景
Henriques团队利用多种超分辨率显微镜技术研究细胞信号传导和宿主-病原体相互作用,并为细胞生物学研究创造和开发技术。
超分辨率显微镜面临的一个重大挑战是需要强光照射,但这通常具有光毒性,且与活细胞成像不兼容。为了解决这一问题,该团队开发了一种新方法——超分辨率径向涨落(SRRF),该方法允许使用任何荧光团进行超分辨率成像,且所需光照强度远低于传统的超分辨率技术。
挑战
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Henriques团队最近开始使用Prime 95B科学CMOS(sCMOS)相机进行部分工作。Henriques博士告诉我们:“我们一直在UCL积极使用Prime 95B作为我们的主要相机之一,用于低信号和超分辨率成像。Prime 95B科学CMOS是一款出色的相机,特别是由于其低噪声、高灵敏度和大视场。”
该团队还在使用Prime 95B,因为他们正在将SRRF算法适配用于CMOS相机。Henriques博士解释说:“使用我们SRRF方法的超分辨率显微镜最初是为EMCCD相机设计的,但我们目前正在更新SRRF算法,以提高使用现代CMOS设备数据时的质量和性能,从而充分利用其大视场和更高速度的优势。”
SRRF的准确性与采集速度直接相关,因此速度更快的相机将更具优势。
Prime 95B科学级互补金属氧化物半导体(sCMOS)是一款出色的相机,尤其以其低噪声、高灵敏度和大视场著称。——里卡多·恩里克斯博士
解决方案
更新后的算法预计很快就会发布。以下是使用Prime 95B 相机获取的图像,展示了 SRRF 如何演进以适配科学级 CMOS 传感器
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