北京
图1用膜上的受体蛋白拍摄的电影片段。单个分子被定位，并用高斯函数拟合，以亚衍射极限精度确定其位置。
背景
Ganzinger博士的研究小组致力于探索免疫信号传导的基本物理原理。该小组利用合成生物学技术重建信号通路，并采用单分子成像技术，以深入理解受体与配体如何协同作用，从而在细胞内传递信号。
特别是，该团队对配体与受体结合的时间长度如何为受体区分多种配体提供手段感兴趣。通过标记受体亚基，可以在配体结合事件发生前观察到它们的个体扩散。一旦加入配体，就可以观察到亚基的共定位并推断受体相互作用，以及不同配体结合的动力学。
挑战
该团队使用特定位点的有机荧光团标记目标受体的不同亚基，以确保拥有足够的的光子预算，从而以足够的信号追踪这些分子。由于他们需要同时监测多种受体和配体，实验涉及三色成像，可能还包括远红外光，因此，一台在宽光谱范围内具有高量子效率的相机对他们的研究至关重要。
这些亚基也能快速扩散，这意味着需要一台高帧率的相机才能实现精确追踪。同样，为了同时追踪这些分子，传感器必须被分成三个。因此，一台具有大视场的相机也是必不可少的。
过去人们会因为高量子效率而选择EMCCD相机。然而，背照式sCMOS相机现在能提供相同的量子效率，同时拥有更大的视野，这对于我们的多色成像至关重要。——Kristina Ganzinger 博士，Christian Niederauer，Marko Kamp
解决方案
该团队目前正在其自定义的自建TIRF系统上使用Teledyne Photometrics Prime BSI，以实现多达三种颜色的同时成像，并保持高帧率。
克里斯蒂安告诉我们：“我们选择Teledyne Photometrics Prime BSI相机，部分原因是其大视野，这对于我们分割传感器以实现同时拍摄两/三种颜色的图像至关重要;同时，其宽广的量子效率也适合在多个波长下进行成像。此外，由于受体亚基扩散速度较快，我们还需要一台能够提供高帧率的相机。”他接着说：“Prime BSI还提供了理想的像素尺寸，能够与我们的60倍物镜匹配奈奎斯特采样定理，从而为我们提供最佳的分辨率。”
克里斯蒂安总结道：“过去人们会选择EMCCD，因为它们具有极高的量子效率。然而，现在的背照式sCMOS相机不仅能提供相同的量子效率，还拥有更大的视野，这对于我们的多色成像至关重要。”
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