Sci Adv | 揭示难治性类风湿关节炎全新治疗靶点-滑膜成纤维细胞P2X7R

类风湿关节炎（RA）是一种以持续性滑膜炎为核心特征的慢性自身免疫病，可导致关节进行性破坏、畸形与残疾，全球约1%人群受累，构成重大疾病负担。尽管靶向TNF、IL-6、CD20、JAK等通路的疗法不断问世，但仍有近40%患者对现有药物应答不佳，5%–20%最终发展为对多种靶向治疗均耐药的难治性类风湿关节炎。滑膜成纤维细胞是炎症滑膜中最主要的细胞组分，在耐药RA患者中呈现显著富集，驱动侵袭性血管翳形成、软骨与骨破坏。然而，可用于临床转化的、靶向滑膜成纤维细胞的关键分子仍亟待发现。P2X7受体（P2X7R）是ATP激活的配体门控阳离子通道，在自身免疫病中被广泛关注，但其在RA滑膜成纤维细胞中的精准表达、功能贡献及治疗价值尚未明确。

近日，北京大学人民医院栗占国教授、孙晓麟教授联合北京大学深圳医院王庆文教授、北京大学基础医学院初明教授及浙江康恩贝制药金庆平研究员团队在期刊ScienceAdvances上发表题为P2X7R of synovial fibroblasts is a potential therapeutic target candidate associated with refractory rheumatoid arthritis的研究性论文，系统阐明P2X7R在难治性RA滑膜成纤维细胞中特异性高表达，并驱动侵袭、炎症、增殖等致病表型。研究团队利用临床样本、单细胞测序、原代细胞功能实验及非人灵长类关节炎模型证实：高选择性人源P2X7R抑制剂EVT-401可显著抑制滑膜成纤维细胞异常活化、减轻关节炎症与骨软骨破坏。机制上，P2X7R通过Notch与细胞周期通路维持滑膜成纤维细胞致病状态，且特异性富集于多药耐药CTAP-F亚型。该研究证实P2X7R是难治性RA的关键治疗靶点，为突破多药耐药困境提供全新方向。

P2X7R在RA滑膜与滑膜成纤维细胞中显著高表达

研究团队收集RA与OA患者滑膜组织，通过免疫组化、Western blot、流式等方法证实：P2X7R在RA滑膜组织中表达显著升高，并与滑膜炎分级、CRP水平正相关。并且RA滑膜成纤维细胞的P2X7R表达显著高于OA成纤维细胞，而高滑膜炎样本中P2X7R表达显著高于低/无滑膜炎组。

单细胞测序证实：P2X7R富集于致病性lining亚群与难治性CTAP-F亚型

基于大样本RA滑膜单细胞转录组数据，团队发现：P2RX7主要富集于PRG4+ lining成纤维细胞（F-0、F-1），该亚群直接介导关节侵袭与破坏。P2RX7在CTAP-F（成纤维细胞主导型）中表达最高，而CTAP-F是公认的多药耐药亚型。

进一步通过临床样本验证：治疗应答差、高DAS28活动度患者的滑膜P2X7R显著更高。

EVT-401：高选择性人源P2X7R拮抗剂，强效抑制RA滑膜成纤维细胞的致病表型

EVT-401是一种高选择性人源P2X7R小分子拮抗剂，可特异性结合并抑制人源P2X7R通道功能，对其他P2X家族受体无明显交叉作用，保证了靶点作用的专一性。体外实验结果系统证明，EVT-401能够通过抑制P2X7R信号通路，对RA 滑膜成纤维细胞发挥多重调控作用：不仅可诱导细胞凋亡并引发G1期周期阻滞，从而有效抑制其异常增殖；还能显著下调 IL-6、MMP-3、DKK-1 等关键炎症因子与软骨破坏介质的释放；同时显著抑制细胞的迁移与侵袭能力，从根源上阻断血管翳形成、关节侵蚀与破坏的关键病理进程。

转录组机制：EVT-401抑制细胞周期、Notch与ECM重塑通路

RNA测序显示：EVT-401显著下调细胞周期、炎症反应、ECM受体互作、Notch信号等与耐药RA相关的核心通路，从转录水平逆转滑膜成纤维细胞的致病表型。

非人灵长类模型验证：EVT-401显著缓解关节炎、保护关节结构

鉴于啮齿类P2X7R与人差异大，团队使用食蟹猴胶原诱导关节炎模型进行进一步研究发现：EVT-401显著降低临床关节炎评分、PIP关节肿胀率；影像学与组织学显示骨侵蚀、软骨破坏、滑膜增生、炎细胞浸润均显著减轻。而EVT-401对心、肝、脾、肺、肾无明显病理损伤，安全性良好。

人源化模型验证：EVT-401直接抑制人RA SF侵袭软骨

团队进一步构建人软骨-RA SF共植入SCID小鼠模型，发现EVT-401显著抑制人RA滑膜成纤维细胞向软骨侵袭，并降低hP2X7R阳性细胞面积，直接证明药物对人细胞的靶向疗效。

本研究系统证实：P2X7R是难治性类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的潜在驱动靶点；高选择性抑制剂EVT-401可阻断增殖、侵袭、炎症，并在非人灵长类中显示强效疗效与良好安全性；P2X7R可作为生物标志物筛选最可能获益的多药耐药患者。该研究完成从靶点发现→机制阐明→药物验证→临床转化的全链条，为难治性类风湿关节炎的治疗提供全新策略。

文章第一作者为饶佩诗（北京大学人民医院&复旦大学附属中山医院厦门医院），金善钊（北京大学人民医院），肖诗白（北京大学深圳医院），马银超（北京大学基础医学院），李静（北京大学人民医院）。

原文链接：https://doi.org/10.1126/sciadv.adw9543

制版人：十一

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