AbMole丨LDC7559：GSDMD抑制剂在炎症中的应用

LDC7559（AbMole，M13554）是一种泛凋亡（PANoptosis）相关分子消皮素 D (GSDMD) 的抑制剂，最初通过从化合物库中筛选抑制佛波酯（Phorbol 12-myristate 13-acetate，PMA）诱导的中性粒细胞胞外杀菌网络（NETosis）而被发现，它在PMA诱导的NETosis中IC50约为5.6 μM，在胆固醇晶体诱导的NETosis中IC50约为300 nM[1]。早期研究认为LDC7559（CAS No.：16561-29-8）通过直接结合消皮素D（GSDMD）并抑制其N端结构域的细胞膜孔洞形成活性，从而阻断NET释放和IL-1β分泌。近期研究发现LDC7559还能通过作为糖酵解酶磷酸果糖激酶-1肝型（PFKL）的强效激动剂发挥作用，其激活PFKL的EC50为66.04 ± 18.93 nM，进而抑制NOX2依赖的氧化爆发和NETosis[1]。

在THP-1细胞和原代神经元－小胶质细胞共培养体系中，5 μM、25 μM和50 μM的LDC7559可剂量依赖性地改善细胞活力并抑制IL-1β、IL-6和IL-18等促炎因子的释放[2]。在动物模型中，成年雄性Sprague-Dawley大鼠（体重230-280 g）建立蛛网膜下腔出血（SAH）模型后，于造模后2小时开始腹腔注射LDC7559（10 mg/kg、20 mg/kg或30 mg/kg），每日一次，其中20 mg/kg被确定为该实验的最佳剂量，可显著改善神经功能缺损评分、减轻脑水肿、抑制小胶质细胞激活及GSDMD介导的神经元发生泛凋亡，且该保护作用可被NLRP3激活剂-尼日利亚菌素（Nigericin）所逆转[2]。

研究显示LDC7559（AbMole，M13554）还具有神经保护活性，可以在创伤性脑损伤小鼠模型中抑制GSDMD依赖性小胶质细胞的焦亡，其最佳剂量为10 mg/kg[3]。类似地，LDC7559以10 mg/kg的剂量可以有效抑制GSDMD介导的小鼠肺损伤[4]。

参考文献及鸣谢

[1] Dai, Z.; Liu, W. C.; Chen, X. Y.; et al. Gasdermin D-mediated pyroptosis: mechanisms, diseases, and inhibitors. Frontiers in immunology 2023, 14, 1178662.

[2] Cai, W.; Wu, Z.; Lai, J.; et al. LDC7559 inhibits microglial activation and GSDMD-dependent pyroptosis after subarachnoid hemorrhage. Frontiers in immunology 2023, 14, 1117310.

[3] Yu, E.; Zhang, E.; Lv, X.; et al. LDC7559 exerts neuroprotective effects by inhibiting GSDMD-dependent pyroptosis of microglia in mice with traumatic brain injury. 2023, 40 (7-8), 742-757.

[4] Vats, R. PageCirculating Neutrophil Extracellular Traps Promote Gasdermin-D Dependent Lung Injury in Sickle Cell Disease. University of Pittsburgh, 2021.

细胞实验参考

细胞系：Neutrophils

方法： Cells were pretreated with DMSO vehicle, 0.5 μM NA-11, 100 μM apocynin, 0.5 μM and 5 μM PALP, or 0.5 μM and 5 μM LDC7559 for 30 min, and then stimulated with 50 nM PMA, 1 μM f-MLP, 5 μg/mL cholesterol crystals, 10 μg/mL LPS, 25 μM nigericin, or 25 μM calcymicin for 3 h

浓度：5 μM

处理时间：30 min

参考文献：Cell. 2021 Aug 19;184(17):4480-4494.e15.

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考

动物模型：Humanized mice with sickle cell disease

配制：Saline

剂量：10 mg/kg

给药处理：Vaso-occlusion

参考文献：Blood. 2022 Sep 1;140(9):1020-1037.

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。
切勿一次性将产品全部溶解。

建议制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。