细菌生化鉴定试验大全：肠杆菌科与常见致病菌鉴别要点

一、糖类代谢

（1）糖类发酵试验：鉴定细菌最主要、最基本试验（尤其对肠杆菌属）；

（2）氧化-发酵试验（O/F 试验）：氧化型（需分子氧参与）、发酵型（进行无氧降解，发酵型细菌在无氧状态下也能分解葡萄糖）、产碱型（不分解葡萄糖的细菌）；用于区别细菌的代谢类型；

（3）β-半乳糖苷酶试验（ONPG 试验）：有些细菌只有半乳糖苷酶，因而只能迟缓发酵乳糖，所有乳糖快速发酵和迟缓发酵的细菌均可快速水解邻一硝基酸-β-D-半乳糖苷而生成黄色的邻-硝基酚，主要用于枸橡酸菌属、亚利桑那菌属与沙门菌属的鉴别；

（4）七叶苷水解试验：七叶苷与二价铁反应使培养基变黑；主要用于鉴别D群链球菌与其他链球菌，以及肠杆菌科的某些种及某些厌氧菌（如脆弱拟杆菌等）的初步鉴别；

（5）甲基红试验：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解为甲酸、乙酸和琥珀酸等，使培养基pH值下降至4.5以下时，加入甲基红试剂呈红色，常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别，如大肠埃希氏菌和产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性；

（6）V-P试验：红色者为阳性，黄色或类似铜色为阴性，主要用于大肠埃希氏菌和产气肠杆菌的鉴别。

二、蛋白质与氨基酸代谢

（1）明胶液化试验：培养基液化为阳性；常用于肠杆菌科的鉴别；

（2）吲哚（靛基质）试验：分解色氨酸生成红色吲哚为阳性；常用于肠杆菌科细菌的鉴定，如大肠埃希菌、变形杆菌阳性，志贺菌、沙门菌阴性；

（3）硫化氢试验：分解含硫氨基酸产生黑褐色沉淀为阳性；用于肠杆菌科中属及种的鉴别（沙门菌、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属细菌为阳性，少数沙门菌属为阴性）；

（4）尿素分解试验：产生大量氨使酚红变红；常用于肠杆菌中变形杆菌属鉴定；

（5）苯丙氨酸脱氨酶试验：变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属细菌为阳性；

（6）氨基酸脱羧酶试验：生成胺和二氧化碳，使溴甲酚紫变紫色；主要用于肠杆菌科鉴别

三、碳源和氮源利用试验

（1）枸橡酸盐利用试验：用于肠杆菌科中菌属间的鉴定（沙门菌、克雷伯菌属常为阳性）（2）丙二酸盐利用试验：用于肠杆菌科属及种的鉴别（克雷伯菌属为阳性）

四、各种酶类试验

（1）氧化酶试验：主要用于肠杆菌科与假单胞菌鉴别；

（2）过氧化氢酶试验（触酶试验）：G+球菌初步分群（葡萄球菌和微球菌阳性，链球菌阴性）；

（3）硝酸盐还原试验：出现红色为阳性（肠杆菌科细菌均能还原亚硝酸盐为阳性）；

（4）脂酶试验：蓝色为阳性，用于厌氧菌鉴别；

（5）卵磷脂酶试验：出现乳白色混浊环为阳性；主要用于厌氧菌鉴別（产气荚膜梭菌、诺维梭菌阳性，其余梭菌阴性）

（6）DNA酶试验：出现透明环为阳性；肠杆菌中沙雷菌与变形杆菌阳性，其余阴性；G+球菌中只有金黄色葡萄球菌阳性，其余阴性；

（7）凝固酶试验：鉴定葡萄球菌致病性重要指标（金黄色葡萄球菌为阳性）。