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《食品科学》:中国农业科学院王珊珊副研究员等:基于精准识别的农兽药残留快速检测技术研究进展

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农兽药能够有效控制、调节、预防影响动植物生长的不利因素,提高农作物和畜牧产品产量和质量,在农业生产中发挥着不可替代的作用。然而农兽药在带来良好经济效益的同时,其过度使用或滥用导致的农产品和环境中农兽药残留污染问题日益严重。过量残留在农产品和环境中的农兽药及其代谢物可通过食物链等途径蓄积在人体内,产生一系列威胁人体健康安全的巨大隐患。

近年来,随着纳米技术、材料科学、生物技术、传感技术的发展,农兽药快速检测技术得到了蓬勃发展和规模化应用。

中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所的李方束、王珊珊*,国家市场监督管理总局重点实验室(热带果蔬质量与安全)的康蕊等重点对国内外近5 年来农兽药残留检测技术的研究进展进行归纳总结,详述抗体、适配体(Apt)、受体、酶、全细胞、分子印迹聚合物(MIP)、金属有机框架(MOFs)材料等常见不同农兽药识别元件的特点、制备方式和识别效果,光学检测技术、电化学传感技术、压电传感技术在农兽药残留快速检测中的检测原理和应用效果(图1),最后对农兽药快速残留检测技术的发展趋势进行展望,以期为农兽药残留快速检测技术的发展提供参考。山西老陈醋大曲为研究对象,系统分析春夏秋3 个季节大曲发酵过程菌系、物系和酶系的变化规律,解析微生物与酶活力和其风味物质的相关性,旨在为科学指导传统制曲工艺、优化不同季节大曲搭配使用的配比提供强有力的理论支撑。



01

农兽药识别元件

识别元件是指对靶标分子具有高亲和力和特异性识别能力的物质,在实现农兽药残留精准快速检测中发挥着举足轻重的作用。农药和兽药识别元件通常包括酶、抗体、Apt、受体等生物识别物质以及MIP、纳米材料等化学识别物质。

1.1 基于抗体的识别检测

抗体是对抗原具有特异性识别能力和高亲和力的免疫球蛋白(Ig)。抗体对抗原的识别过程可通过多种机制转化为比色、荧光、化学发光、电化学等多种信号输出。近年来,基于抗原-抗体特异性识别作用的免疫分析方法在农兽药快速检测中取得了广泛应用。抗体根据制备方法的不同可以分为多克隆抗体、单克隆抗体、重组抗体和纳米抗体等。

多克隆抗体是刺激多个B细胞克隆产生的针对多种抗原表位的混合抗体。黎东等通过3-巯基丙酸衍生反应合成氯吡脲半抗原,利用活泼酯法原理偶联合成氯吡脲完全抗原,成功制备灵敏度较高的鼠源氯吡脲多克隆抗体,该多克隆抗体半抑制浓度(IC50)为2.35 ng/mL。进一步,将抗体与过氧化物纳米酶标记的抗原组装构建了可视化免疫亲和凝胶检测柱,用于植物源食品中氯吡脲的测定,检出限为20 μg/kg。Hu Yangmeiqing等以牛血清白蛋白和卵清蛋白为载体蛋白,对杀虫脒进行偶联,将杀虫脒-牛血清白蛋白偶联物作为免疫原,杀虫脒-卵清蛋白作为包被抗原,对家兔进行杀虫脒-牛血清白蛋白抗原免疫,制备出兔源性多克隆抗体,其与杀虫脒类似物的交叉反应率小于15%。利用该抗体建立了间接竞争酶联免疫吸附法检测水产养殖产品中杀虫脒的方法,该方法检出限为0.637 ng/mL,IC50为3.126 ng/mL。多克隆抗体已广泛应用于农兽药残留检测,但其制备对抗原纯度要求较高,免疫原、免疫佐剂种类、免疫动物种类和批次等因素均会对免疫结果造成一定影响,易产生批间差异和交叉反应,使其大量标准化生产和商业化应用受到挑战。

单克隆抗体是采用杂交瘤技术制备,由单一B细胞克隆产生,仅针对某一特定抗原表位的抗体。邢广旭等采用碳二亚胺法合成泰乐菌素半抗原,筛选得到IC 50 为4.609 1 ng/mL的抗泰乐菌素单克隆抗体,并在此基础上开发出侧流胶体金免疫层析试纸条用于牛奶中泰乐菌素残留的测定,该试纸条与其他兽药无交叉反应,且检测结果与液相色谱方法结果一致性高,方法检出限为1.563 4 ng/mL。Zhang Binbin等制备对吡虫啉具有高亲和力和特异性识别能力的单克隆抗体,效价为5.12×10 5 ,亲和力常数为2.24×10 8 ,与吡虫啉结构类似物交叉反应率小于6.5%。进而采用链霉亲和素修饰的量子点建立了荧光免疫分析方法,实现了糙米、番茄和梨中吡虫啉的高灵敏准确测定,20%抑制浓度(IC 20 )为0.5 ng/mL。单克隆抗体虽然具有理化性质均一、对抗原纯度要求低、特异性好等优点,但也面临着制备周期较长、保存过程中基因突变和细胞株阳性丢失、长期保存容易灭活以及制备过程对动物不友好等问题,限制了其应用发展。

近年来,随着基因工程的发展,重组抗体和纳米抗体作为新一代基因工程抗体,受到了人们的广泛关注。重组抗体是通过重组DNA技术将改造过的抗体基因克隆到表达质粒后,再将其转染到合适的宿主细胞系中进行抗体表达,从而获得的单克隆抗体,具有高重复性、易于改造、可大规模生产等优点。Lei Xingmei等采用化学计算辅助的理性半抗原设计策略,制备得到乙嘧酚单克隆抗体。对该单克隆抗体可变区基因进行解码和重组,而后通过哺乳动物表达系统实现全长抗体的高效表达,发现得到的重组全长抗体性能与亲本单克隆抗体呈现高度一致性,平衡解离常数高达5.71×10 -10 mol/L,并基于该抗体成功建立灌溉水和草莓果实中乙嘧酚的免疫检测方法,检出限分别为0.006 6 mg/kg和0.036 mg/kg。纳米抗体是采用噬菌体展示技术获得的一种仅由重链可变区构成的单域抗体,是已知最小的活性抗原结合蛋白,具有特异性和灵敏度高、稳定性强、易表达、水溶性好等优势。Zhang Yongyi等设计半抗原并合成6 种抗原,选择特异性免疫原对羊驼免疫后从羊驼血清中获得IgG2和IgG3重抗体。通过外周血淋巴细胞分离、总RNA提取、纳米抗体基因扩增、构建噬菌体文库4 步反应来筛选得到对百草枯亲和力高、环境耐受性强、性能稳定的纳米抗体Nb2-12,IC 50 为0.058 8 ng/mL。分子对接方法表明该纳米抗体的酪氨酸口袋结构对百草枯具有较高的特异性识别能力。利用该纳米抗体开发的百草枯时间分辨荧光免疫试纸条,能够肉眼半定量分析或结合条带读取器定量分析食品样品及生物样品中的百草枯残留。尽管纳米抗体可以弥补传统抗体的不足,但目前纳米抗体用于农兽药残留检测的报道还相对较少,进一步开发库容量大、多样性高的噬菌体文库,提升抗体筛选效率,将有利于筛选得到更多性能优异的农兽药分子纳米抗体。

1.2 基于Apt的识别检测

核酸Apt是对靶标分子具有特异性识别能力和高亲和力的寡核苷酸序列,通常由指数富集配体系统进化(SELEX)技术在体外筛选得到。其可通过碱基堆积、静电作用、疏水作用、氢键和范德华力等作用方式与靶标分子特异性亲和结合,并伴随着构象变化,自适应折叠形成发夹、凸环、假结、G-四链体等特定的三维结构。Apt具有特异性强、亲和力高、易于修饰、成本低、可与多种信号转换器结合等优势,近年来,在农兽药残留检测中受到了广泛关注。

胡超琼等利用6-羧基荧光素标记适配体(FAMAPts4-29)对有机磷农药的广谱性识别特性,结合磁分离,建立了甲拌磷、氧乐果、丙溴磷3 种有机磷农药的荧光分析方法。当体系中加入待测靶标后,Apt与靶标分子的结合抑制了磁性纳米离子表面包覆的聚吡咯对Apt的吸附,导致磁分离后溶液中FAM-AptS4-29的荧光强度得到恢复,从而对3 种有机磷类农药实现检测,检出限分别为4.17×10-4、2.77×10-4、4.67×10-4μg/kg。Kong Qianqian等借助氧化石墨烯(GO)对ssDNA的吸附特性构建了非固定化GO-SELEX技术,实现了噻虫嗪适配体的高效筛选,并建立了基于金纳米粒子(AuNPs)的比色适配体传感器用于蔬菜中噻虫嗪的检测。研究表明,噻虫嗪可诱导Apt形成发夹结构,与原始Apt相比(检出限为3.33 nmol/L),截短Apt构建的AuNPs比色传感器具有更高的灵敏度(检出限为1.67 nmol/L)。Yang Ling等将磺胺甲基嘧啶(SMR)和磺胺二甲嘧啶(SMZ)与磁珠(MBs)偶联,并以SMR-MBs作为反筛工具,建立了MBs-SELEX用于SMZ核酸Apt的筛选。以生物素标记的Apt作为识别元件,辣根过氧化物酶(HRP)标记的SMZ作为竞争分子,利用生物素-链霉亲和素系统建立了牛奶中SMZ的竞争型化学发光分析方法,检出限为0.92 ng/mL。目前,仅有部分农/兽药核酸Apt被筛选得到,如乐果、马拉硫磷、毒死蜱、二嗪磷、草甘膦、水胺硫磷等有机磷类农药,甲萘威、克百威、多菌灵等氨基甲酸酯类农药,噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒等新烟碱类农药,氨苄青霉素、氯霉素、土霉素、四环素、卡那霉素、妥布霉素、青霉素、链霉素、氟氧沙星、阿洛西林、磺胺地索辛等抗生素。随着技术的发展,提高核酸Apt筛选效率,扩展核酸Apt种类,以实现不同目标物的分析是未来的主要研究方向。

1.3 基于受体的识别检测

受体是一类广泛存在于生物体内、能够特异性识别和选择性结合信号分子并引起细胞功能改变的生物大分子,可与受体结合的物质叫做配体。许多抗生素都有各自的靶标蛋白即受体蛋白,通过与其受体特异性结合发挥抗菌作用。由于受体蛋白通常仅与有活性的抗生素小分子结合,因此基于受体的分析方法可提高抗生素残留检测的准确度。

受体的获取方式主要包括直接利用细菌细胞作为受体、提取细胞特定受体蛋白获得受体、异源重组表达获得受体蛋白等,其中异源重组表达应用最为广泛。研究者已建立了放射受体分析法、酶标记受体分析法、金标受体分析法等用于

-内酰胺类抗生素,磺胺类、氨基糖苷类、四环素类药物的测定。刘艳容等将肺炎链球菌R6中编码PBP1α蛋白的基因
pbp1α
进行体外原核系统的克隆表达,以PBP2x蛋白为对照,纯化后的重组蛋白PBP2x和PBP1α用于青霉素G、头孢噻呋、喷沙西林、氨苄青霉素、阿莫西林检测的IC 50 均低于7.02 ng/mL,说明PBP1α和PBP2x均具有β-内酰胺类抗生素结合能力。Xia Wanqiu等通过连接大肠杆菌的核糖体S12蛋白(
PRSL12
)基因和海肾荧光素酶(renilla luciferase,
Rluc
)基因,表达得到PRSL12-Rluc融合受体,PRSL12与氨基糖苷类药物分子对接结果表明,二者结合主要依靠疏水作用力和氢键。进一步以其为识别元件,建立了猪肉中7 种氨基糖苷类药物的间接竞争生物发光法,IC 50 和10%抑制浓度(IC 10 )分别为43.6~75.5 ng/mL和0.51~1.1 ng/mL。Li Yue等选择地衣芽孢杆菌突变型受体,以N端带组氨酸形式进行融合表达,获得受体蛋白BlaR-CTD-M。利用金纳米粒子标记的BlaR-CTD-M,采用竞争反应模式建立了胶体金层析检测法。该法可用于牛奶中18 种
-内酰胺类抗生素和鸡肉中21 种
-内酰胺类抗生素残留的快速测定,裸眼消线值均符合欧盟和中国的最大残留限量要求。

1.4 基于属水平大曲微生物丰富度分析

天然酶在分析传感领域发挥着重要作用。其中,基于农兽药分子对乙酰胆碱酯酶(AChE)、碱性磷酸酶(ALP)、酪氨酸酶(TYR)、尿素酶等天然酶抑制作用构建的酶抑制法,具有操作简单、价格低廉、耗时短等优点,是当前应用最为广泛的农兽药快速检测技术之一。

酶的特异性、稳定性和催化性能直接关系着检测结果的可靠性。有机磷和氨基甲酸酯类农药可通过与AChE的不可逆结合抑制AChE对底物的催化能力,进而转变为荧光、比色、电化学等信号输出。Chang Qingchao等成功合成了具有类过氧化物酶活性的铈单原子纳米酶,并将其与AChE-胆碱氧化酶(ChOx)生物级联催化反应相结合,构建三酶介导的生物传感器用于有机磷农药的检测。其检测原理为乙酰胆碱被乙酰胆碱水解生成胆碱,胆碱被ChOx氧化生成甜菜碱,同时生成H2O2,H2O2进一步在铈单原子纳米酶的催化下氧化四甲基联苯胺(TMB)显色;当体系中存在有机磷类农药时,AChE活性被抑制,显色程度减弱。该传感器对敌敌畏和毒死蜱的检出限分别为0.56 ng/mL和0.67 ng/mL,灵敏度高,可应用于自来水、梨、苹果和大米中有机磷农药的测定。目前AChE主要来源于动物体提取纯化,制备过程较为复杂,价格昂贵,催化性能易受温度、pH值等环境因素影响且批次重复性有待提高,结合基因工程构造新酶源是解决上述问题、进一步提高酶抑制法灵敏度和重复性的有效途径。Cao Jing等从红芸豆中分离酯酶PvCarE1,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,采用基因克隆,与硫氧还蛋白TrxA融合构建重组新酶源TrxA-PvCarE1。获得的酯酶TrxA-PvCarE1能够催化醋酸吲哚酯水解,生成荧光吲哚基产物;同时对10 种有机磷农药展现了高敏感性,利用有机磷类农药对PvCarE1活性的抑制作用实现了豇豆和胡萝卜中10 种有机磷农药的高灵敏荧光测定,检出限为2.4×10-4~0.032 mg/L。Gianvittorio等以ALP为识别元件,利用2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对ALP活性抑制以及电化学还原氧化石墨烯(ERGO)和多壁碳纳米管(MWCNTs)间的协同增敏作用构建了无标记电化学传感器,实现了2,4-D的超灵敏检测,检出限低至16 pmol/L。由于天然酶活性通常可以被多种农药抑制,因此,基于酶抑制法开发的传感器很难区分这些农药,挖掘高特异性的新型人工拟酶是未来的研究热点。在兽药检测方面,刘凤银等利用酶抑制原理建立一种

-内酰胺酶抑制剂的多残留检测方法。
-内酰胺酶能够催化头孢硝噻吩水解生成红棕色化合物,
-内酰胺酶抑制剂与
-内酰胺酶稳定结合并导致酶活丧失,从而抑制显色反应。为满足牛奶样品检测的灵敏度需求,研究通过优化pH值、温度、孵育时间等条件确定了
-内酰胺酶的最佳工作条件。在缓冲体系pH 7.0、反应温度37 ℃条件下,4 种牛奶中常见的
-内酰胺酶抑制剂,舒巴坦、克拉维酸钾、他唑巴坦和阿维巴坦钠的检出限分别为42.88、10.20、1.68、3.48 μg/kg。

1.5 基于全细胞的识别检测

全细胞生物传感器(WCBs)是采用活细胞作为敏感元件识别目标分析物,结合特定换能器实现信号输出的生物传感器,具有响应快、成本低、可实现原位监测等特点。常用的敏感元件包括真菌、细菌、藻类等微生物细胞以及鱼类、大鼠等动物细胞。随着合成生物学的发展,全细胞微生物传感器在环境污染物监测、药物筛选、食品安全等领域表现出巨大潜力。

Attaallah等开发了一种可以用于检测水中的光合抑制型除草剂的新型安培藻类生物传感器。将绿色光合藻类莱茵衣藻固定在炭黑纳米颗粒修饰的丝网印刷电极上,当样品中存在光合抑制型除草剂时,莱茵衣藻的光系统II的电子链传递受到抑制,析氧量减少,导致电流信号减弱。通过监测电流信号的变化,实现水中阿特拉津的测定。该传感器检出限为3 nmol/L,抗干扰能力好,能够连续工作10 h并且稳定储存3 周。Ma Zhao等通过改进有机磷农药水解酶基因mpd和转录激活因子pobR,首次设计构建了

Escherichia coli
BL21/pNP-LacZ菌株,进一步使用生物凝胶海藻酸盐和敏化剂多黏菌素B,将
E. coli
BL21/pNP-LacZ固定在滤纸上,构筑了
E. coli
BL21/pNP-LacZ纸基生物传感器。该传感器可水解甲基对硫磷生成对硝基苯酚,从而实现土壤样品中甲基对硫磷及其代谢物对硝基苯酚的比色测定,甲基对硫磷和对硝基苯酚的检出限分别为5.41 μg/kg和9.57 μg/kg。Ma Zhao等设计了两种携带荧光蛋白基因的菌株
E. coli
DH5α/pMTGFP、
E. coli
DH5α/pMTmCherry,这些菌株能感受四环素浓度变化,并产生荧光蛋白。利用菌株对四环素的敏感性,构建了可用于水、土壤中四环素类抗生素快速、高通量测定的荧光传感器。
E. coli
DH5α/pMTGFP和
E. coli
DH5α/pMTmcherry方法检出限分别为7.58 ng/mL和5.32 ng/mL。

1.6 基于基于MIP的识别检测

MIP是采用分子印迹技术合成的“人造抗体”,具有与模板分子大小、形状及功能基团匹配的三维孔穴,可特异性识别和选择性吸附模板分子及模板分子类似物。此外,MIPs作为人造抗体,还具有稳定性高、耐极端环境、重复使用性好、易于与信号转换器结合等优点,在污染物分离分析领域取得了广泛应用。

MIPs制备方法多样,包括本体聚合法、原位聚合法、沉淀聚合物法、表面印迹法等。采用本体聚合法制备MIPs往往存在模板洗脱不完全、传质慢、重现性差等问题。为了提高其商业化应用程度,可通过纳米材料为载体,制备核壳型MIPs或合成纳米尺寸MIPs,提高MIPs性能。Yang Lidong等借用溶胶-凝胶法和表面印迹,以

-氨丙基三乙氧基硅烷为功能单体、四乙氧基硅烷为交联剂,采用铕金属有机骨架(Eu-MOF)为载体,利用N掺杂碳点(N-CDs)作为荧光源产生荧光信号,制备了比率型荧光传感器N-CDs@Eu-MOF@MIP,用于生菜、水和土壤中马拉硫磷的检测。当体系中存在马拉硫磷时,吸附在MIP中的马拉硫磷使N-CDs的蓝色荧光猝灭,而Eu-MOF的红色荧光保持稳定,从而实现马拉硫磷的比率荧光分析,检出限为0.05 μmol/L。Chuiprasert等以苯胺和4-硝基邻苯二胺为单体、环丙沙星为模板分子,采用原位电化学聚合法在氧化石墨烯修饰的玻碳电极(rGO/GCE)上表面合成MIP薄膜,构建了能特异性和选择性识别环丙沙星的分子印迹电化学传感器。最优条件下,该传感器检出限低至5.28×10 -11 nmol/L,具有良好的再现性和重复使用性,但其选择性因子
环丙氟哌酸/恩诺沙星、
环丙氟哌酸/氧氟沙星、
环丙氟哌酸/磺胺甲噁唑和
环丙氟哌酸/哌拉西林钠分别为1.6、1.6、1.6和1.4,在实际检测应用中可能会出现一定的交叉反应,且该方法在池塘水中回收率偏高(118.4%~124.8%),准确度仍需进一步提高。Atef Abdel Fatah等采用自组装本体聚合的方法,以衣康酸和多壁碳纳米管为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,制备了能特异性识别嗪草酮的MIP,并将MIP复合材料修饰在电极表面用于番茄和土豆中嗪草酮的测定。通过差分脉冲伏安法优化了模板分子、功能单体与交联剂的比例、循环时间、多壁碳纳米管用量、pH值和扫描速率等变量,传感器的检出限和定量限分别低至0.1 pg/mL和0.3 pg/mL。

1.7 基于基于MOFs的识别检测

MOFs是一类由金属离子或离子簇与有机配体自组装形成的新型多孔材料,具有比表面积大、结构可调、功能多样等优势,在分离分析、催化、能源、纳米医学等领域均备受瞩目。利用MOFs高比表面积、高孔隙率以及结构和功能可设计的特点,可基于主客体作用实现对农兽药分子的特异性识别、高效捕集和高灵敏传感分析。

目前基于MOFs的识别检测以荧光传感为主,其主要识别机理包括MOFs通过氢键、π-π共轭、配位作用等相互作用选择性识别目标分析物,以及目标分析物与MOFs之间因为光谱重叠或者能级匹配发生荧光共振能量转移、内滤效应、光致电子转移等现象引起MOF基荧光材料荧光信号的改变。Gan Ziyu等以硝酸铕为金属盐、均苯三甲酸为有机配体,采用溶剂热法在室温条件下合成了红光发射Eu-MOF荧光材料并构建了四环素Eu-MOF荧光传感器。当样品中存在四环素时,Eu-MOF选择性识别和吸附四环素,其荧光强度由于Eu-MOF与四环素之间的荧光内滤效应和光诱导电子转移效应急剧下降,根据荧光强度的变化实现了牛奶和牛肉中四环素的荧光测定(检出限为39.8 nmol/L)。Guan Jianping等使用9-蒽甲醛和2-氨基对苯二甲酸合成了新型有机配体H 2 L,通过H 2 L与Zn 2+ 自组装构建了一种多功能纳米花IRMOF-3-L。 H 2 L 不但赋予了IRMOF-3-L独特的荧光特性,还通过N原子为具有猝灭IRMOF-3-L荧光能力的Cu 2+ 提供结合位点;同时Cu 2+ 与IRMOF-3-L结合形成的IRMOF-3-L/Cu 2+ 表现出较强的类过氧化物酶活性,可催化H 2 O 2 -TMB体系生成氧化TMB,使反应体系兼具比色信号和表面增强拉曼光谱(SERS)信号。草甘膦与Cu 2+ 的强配位作用能够恢复IRMOF-3-L/Cu 2+ 荧光,并抑制其类过氧化物酶活性,因此,IRMOF-3-L可实现食品和水中草甘膦的荧光-比色-SERS三模检测。该方法由于采用多模式检测,准确度和可靠性更高,荧光、比色、SERS 3 种模式检出限分别为0.738、2.26 nmol/L和0.186 nmol/L。Liu Qiao等制备了金属有机框架In-sbdc荧光材料,发现四环素、金霉素、土霉素、呋喃唑酮、甲硝唑、二甲硝咪唑均可猝灭In-sbdc荧光。为了避免硝基化合物呋喃唑酮、甲硝唑、二甲硝咪唑对四环素、金霉素、土霉素检测的干扰,采用Na 2 S 2 O 4 作为掩蔽剂,实现了牛奶、猪肉和鱼肉样品中四环素、金霉素和土霉素检测,检出限为0.28~0.30 μmol/L。尽管基于MOFs识别的农兽药残留检测工作已取得一些进展,但整体而言,靶标覆盖种类还相对有限,特异性识别能力有待进一步提高;此外所设计的MOFs也存在合成步骤繁琐或合成时间较长等问题。未来仍需在材料设计合成和识别机理方面进一步深入研究,通过高度定制化的设计和多维传感策略的构建,提升灵敏度、特异性、稳定性和靶标覆盖度,助力农兽药残留快速检测技术发展。

02

基于不同输出信号的农兽药残留快速检测技术

近年来,纳米技术、生物技术、材料技术、信息技术的蓬勃发展和交叉融合,极大地促进了农兽药快速检测技术的发展。除识别元件外,信号产生和输出模式对快速检测技术的灵敏度、准确度、特异性、稳定性等也至关重要。根据目标物响应信号的不同,农兽药残留快速检测技术主要包括光学快速检测技术、电化学快速检测技术、压电传感快速检测技术等。

2.1 光学快速检测方法

光学快速检测技术是目前应用最为广泛的快速检测技术之一,具有操作简单、快速、高效、价格低廉、可实时在线等优点。研究者利用识别元件与农兽药分子的相互作用或者农兽药分子自身的光谱特性,开发了比色法、荧光分析法、化学发光法、SERS法和SPR法等,用于农兽药残留的快速检测。

2.1.1 比色法

比色法通常借助酶催化底物显色或者纳米颗粒存在状态的改变,引起反应体系吸光度变化,进而通过溶液颜色变化实现农兽药的定性定量分析。比色法既可与紫外分光光度计联用,也可借助智能手机构建便携式即时传感器,与其他方法相比,具有肉眼实时观测、读取方便、操作简单、成本低等优势,因而受到了研究者们极大地青睐。

利用农兽药分子对酶催化体系的调控作用引起颜色变化是构建比色法最常用的策略之一。Wang Dongwei等发现酪氨酸酶能够促进邻苯二酚紫、邻苯三酚红和溴邻苯三酚红等儿茶酚染料氧化,改变颜色和吸光度。利用二硫代氨基甲酸酯类农药对酪氨酸酶的抑制作用,以酪氨酸酶为识别元件,建立了含有邻苯二酚紫-酪氨酸酶、邻苯三酚红-酪氨酸酶和溴邻苯三酚红-酪氨酸酶的比色阵列。由于不同二硫代氨基甲酸酯农药对络氨酸酶活性抑制的能力不同,3 种儿茶酚染料-酪氨酸酶混合物对不同二硫代氨基甲酸酯农药的比色响应是特异性的,因此每个二硫代氨基甲酸酯在不同波长下都有其特征响应模式。基于邻苯二酚染料-酪氨酸酶比色传感阵列所获得的指纹图谱,结合主成分分析法,可在5.0 μmol/L条件下区分福美铵、福美锌、代森联、福美双、福美铁、代森锰锌6 种二硫代氨基甲酸酯农药,在邻苯二酚紫-酪氨酸酶体系中实现苹果、大米和河水中福美锌的测定,检出限为4.5 μg/mL。与生物酶相比,纳米酶具有稳定性高、成本低、功能可设计和裁剪、易于制备纯化等优势,近年来在比色法中得到了广泛应用。Cheng Cong等设计了一种具有类过氧化物酶活性的双金属纳米酶(Fe-Cu NZs),用于诺氟沙星的测定。带负电荷的诺氟沙星吸附在带正电荷的Fe-Cu NZs上,通过调节Fe-Cu NZs表面电荷,提高Fe-Cu NZs催化活性,使H 2 O 2 -TMB显色反应加剧。该方法以Fe-Cu NZs为识别元件,可在1 min内实现蜂蜜、水和鸡肉样品中诺氟沙星的比色测定,检出限为0.386 μmol/L,氯霉素、氨苄青霉素、阿霉素、阿奇霉素、土霉素和林可霉素无明显干扰,但对其他喹诺酮类抗生素的响应特性仍需进一步研究。

此外,金纳米颗粒、银纳米颗粒等纳米粒子具有尺寸依赖的光学性能,通过目标物对其尺寸调控(聚集/分散程度或者刻蚀效应)引起的吸光度变化,可实现目标物的测定。Zhang Hongwei等利用一锅法合成了巯基乙酸(TGA)修饰的带负电金纳米粒子(TGA@AuNPs)。结果表明,TGA@AuNPs在溶液中稳定分散,呈酒红色;加入毒死蜱后,毒死蜱通过Au-S键与TGA@AuNPs结合,导致TGA@AuNPs纳米颗粒间的排斥力减弱,发生聚集现象,溶液颜色变为灰色,A 690 /A 530 吸光度比值增加,通过监测A 690 /A 530 比值的变化即可实现环境水样和茶叶中毒死蜱的检测。该方法检出限为20 ng/mL,选择性好,可在2 min内完成检测,且无需标记。Deng Gaoqiong等利用甲萘威对纳米化金属卟啉——四甲基锌卟啉-十二烷基三甲基溴化铵(ZnTPyP-DTAB)类过氧化物酶活性的抑制作用,构建了基于色变材料双锥形纳米金(Au NBPs)的多色比色传感器,成功用于苹果、白菜、百合中甲萘威的特异性快速检测,检出限为0.26 mg/kg。甲萘威可与ZnTPyP-DTAB特异性结合,通过空间位阻影响ZnTPyP-DTAB中Zn和N原子的配位,导致ZnTPyP-DTAB催化活性下降,进而减弱H 2 O 2 分解产生羟自由基刻蚀双锥形纳米金的程度。随着Au NBPs的形貌变化,由于局域表面等离子体共振(LSPR)峰出峰位置的不断变化,溶液颜色呈现橙-粉-紫-蓝-绿的变化。该方法具有肉眼可见、丰富的颜色变化以及数字图像差异大区分明显的特点,为实现农药半定量可视化检测提供了良好的思路。

2.1.2 荧光法

荧光分析法具有灵敏度高、响应快、抗干扰能力强、操作简单和重现性好等特点,在农兽药残留检测中展现了广阔的应用前景。其主要是利用目标物与特异性识别元件结合引起的荧光基团信号的改变,实现目标物的测定。根据目标物与特异性识别元件结合前后荧光信号变化的不同,检测模式主要可分为荧光猝灭型、荧光增强型和荧光比率型。

荧光猝灭法主要基于目标物对荧光物质的直接猝灭作用或目标物-识别元件-荧光体系的相互作用构建。常用的荧光物质包括有机染料、量子点、碳点、荧光MOFs、上转换纳米颗粒(UCNPs)等。Wang Gangding等采用溶剂热法合成了具有强烈荧光且在水和有机溶液中稳定性良好的三维MOF材料,利用所制备的三维MOF材料[Eu 2 (dtztp)(OH) 2 (DMF)(H 2 O) 2 .5 ]·2H 2 O对抗生素和农药分子的特异性识别作用以及抗生素和农药分子对其荧光的猝灭作用,构建了用于水中甲硝唑、地美硝唑抗生素以及2,6-二氯-4-硝基苯胺农药快速测定的荧光传感器,检出限分别为18.3、9.3、5.28 μg/mL。该传感器抗干扰能力强、环境耐受性好,在酸性、碱性溶液和沸水中可稳定保存15 d,至少重复使用5 次。Wu Xiaoli等利用具有聚集诱导发光特性的双边修饰磺酸盐的四苯基乙烯(BSPOTPE),构建了BSPOTPE-SiO 2 -MnO 2 三明治纳米复合材料,进一步结合酶抑制法,建立了基于荧光猝灭模式的对氧磷荧光传感器,检出限为1 ng/mL。其检测原理为AChE水解硫代乙酰胆碱(ATCh)产生可分解MnO 2 纳米片的硫代胆碱(TCh),阻碍MnO 2 纳米片对BSPOTPE-SiO 2 荧光的猝灭;当体系中存在对氧磷时,AChE活性被抑制,MnO 2 纳米片分解程度减弱,荧光被猝灭。该传感器可进一步与荧光试纸条联用,实现对氧磷的半定量快速实时检测,为构建基于聚集诱导发光效应的荧光传感器提供了借鉴。荧光增强法是在目标物存在环境中,观测体系发光强度的增强或新出现的发光峰,与荧光猝灭法相比,通常具有更低的背景信号和更高的选择性。Tao Xuanzuo等利用嘌呤-肼衍生物合成了一种铜离子特异性荧光探针(ZDA),由于草甘膦和草甘膦铵具有较强的铜离子螯合能力,在ZDA-Cu 2+ 配合物中加入草甘膦和草甘膦铵盐后,荧光迅速增强,从而基于荧光增强原理快速测定了细胞中的草甘膦和草甘膦铵农药,检出限分别为11.26 nmol/L和11.5 nmol/L。除常用的有机染料、量子点等下转换材料,UCNPs由于长波(近红外光)激发、短波发射、反斯托克斯位移大、无光漂白和闪烁的性质,可有效避免样本自发荧光和散射光的干扰、降低背景信号并提高检测灵敏度和稳定性,近年来受到了广泛关注。Yin Litao等制备了UCNPs标记的氟虫腈单克隆抗体和氟虫腈半抗原标记的AuNPs,利用氟虫腈半抗原标记的AuNPs和氟虫腈对抗体的竞争结合,建立了菠菜、芹菜、小白菜中氟虫腈的荧光增强免疫分析方法,检出限为0.01 ng/mL。比率荧光法通过测量两种或者多种不同荧光信号间的比率实现目标物测定。由于其通过自校准方式解决了单发射荧光法易受环境影响的局限性,与传统荧光方法相比,具有更高的灵敏度、准确度和稳定性。Wei Zhongyu等研究发现TiO 2 /C量子点可触发客体堆积诱导发射效应促使四环素、土霉素、金霉素、强力霉素在519 nm处的荧光增强,其中以四环素荧光强度增幅最大,同时,由于内滤效应,四环素、土霉素、金霉素、强力霉素导致TiO 2 /C量子点在442 nm处的荧光减弱,据此构建了比率型荧光传感器。该传感器响应速度快(30 s),对四环素的检出限为32 nmol/L,呋喃西林、环丙沙星、替硝唑、磺胺嘧啶、氯霉素、抗坏血酸等干扰物无明显干扰,可成功应用于水、蜂蜜、牛奶等多种复杂基质;此外,TiO 2 /C量子点与纸芯片技术结合,可实现四环素的可视化定性定量分析。

2.1.3 SERS

SERS技术源于1974年Fleischmann等的发现,吸附在粗糙的银电极表面的吡啶分子产生的拉曼散射信号被极大地增强。SERS作为一种可提供分子指纹精细信息并在单分子层面实现超灵敏和快速无损检测的分析手段,已迅速成为食品安全、公共卫生、生物医学等领域便携式快速检测应用中颇具发展潜力的技术之一。

SERS增强机制主要包括源于贵金属纳米间隔结构形成的等离激元共振电磁增强机制和基于基底材料与分子间电荷转移的化学增强机制。SERS基底的选择直接关系到SERS效应的强弱。研究人员开发纳米海胆、纳米星、纳米花等具有不同结构的纳米材料,并结合微纳加工技术,设计构筑具有丰富热点的SERS基底,以实现超低浓度分子的可靠检测。纳米金、纳米银是最常见的SERS基底,可通过与含硫化合物的结合实现目标物无标记分析。马立鑫等根据目标农药分子在不同金银物质的量比合成的金银合金纳米颗粒(Au-Ag ANPs)基底上拉曼信号的增强效果,选择金银物质的量比为2∶4的Au-Ag ANPs作为拉曼增强基底材料,结合便携式拉曼光谱仪对苹果汁中的啶虫脒和福美双的混合农药残留进行同时检测,检出限分别为0.42 mg/L和0.036 mg/L。由于农兽药残留检测通常面对着较为复杂的检测环境,提高SERS基底的稳定性以应对不同场景从而提升SERS实用性是本领域面临的一大挑战。Atta等利用最外层的GO涂层有效保护了银-金纳米星(SGNS)的尖刺,使其免于聚集。实验结果表明,涂有氧化石墨烯的等离子活性SGNS具有胶体稳定性,有效提高了SERS检测重现性和灵敏度。基于此复合材料构建的SERS平台能够直接测定苹果等真实样品表面的农药,对福美锌、甲拌磷、三唑磷和谷硫磷的检出限分别低至10、50、100 pmol/L和100 pmol/L。

拉曼报告分子是指具有很强拉曼信号或有独特且明显的拉曼位移的分子。除无标记SERS检测技术外,研究者们将拉曼报告分子与增强基底、特异性识别元件相结合构建SERS标签,开发SERS标记检测技术,进一步提高灵敏度和抗干扰能力。其中“SERS基底-拉曼报告分子-识别元件/目标分子竞争物”的三明治SERS标签应用最为广泛。Sun Yue等以吡虫啉半抗原-AuNR@Ag-4-巯基苯甲腈为SERS标签,吡虫啉抗体功能化的Fe 3 O 4 NPs作为信号放大剂,建立了河水和苹果汁中吡虫啉的SERS标记竞争型免疫分析方法。该方法具有良好的重复性和准确度,与毒死蜱、敌敌畏、马拉硫磷、噻苯咪唑等农药相比,对吡虫啉具有较好的特异性和选择性,检出限为9.58 nmol/L。

2.1.4 SPR

SPR技术基于金属薄膜光学耦合产生的物理光学现象发展而来,在传感分析、分子间相互作用研究、药物筛选等领域均备受瞩目。SPR现象的发生与表面介质折射率、金属膜介电常数以及入射角大小等因素密切相关。当分析物与SPR传感器表面结合时,引起金属表面介电常数改变,继而通过监测反射光共振角度或者共振波长的变化对目标物进行定性定量分析。SPR技术具有样品用量少、待分析物无需标记、响应速度快、可实现实时分析等优点,已被广泛应用于农兽药快速检测。

识别元件的选择对SPR传感器的精准度具有重要影响。Miyake等以抗体作为识别元件,开发了基于微阵列芯片的SPR竞争型免疫传感器,用于6 种农药的同时测定,该方法与液相色谱检测结果一致性高,嘧菌酯、啶酰菌胺、溴虫腈、抑霉唑、恶唑磷、烯啶虫胺在西红柿中的检出限分别为3.5、4.5、2.5、5.5、3.5、8.5 ng/mL。Oğuz等在SPR芯片表面采用光聚合原位生成分子印迹纳米膜,利用MIPs对农药分子的识别作用,实现了环境水样品中乐果和呋喃丹的测定,检出限分别为8.37 ng/L和7.11 ng/L。该传感器与液相色谱-质谱方法相比,具有更高的灵敏度,且对硫磷、久效磷、西维因、恶虫威等其他有机磷类和氨基甲酸酯类农药无干扰。

分析物与SPR传感器表面结合后引起的折射率变化程度决定了SPR分析的灵敏度。然而在实际检测过程中,痕量水平的农兽药分子引起的介电性质的变化往往难以被监测。随着纳米科技的发展,二维材料(MXenes、GO、MoS 2 )、AuNPs、AgNPs等纳米材料被发现具有SPR信号增强能力。Tan Jisui等提出了一种在Au SPR芯片表面修饰MoS 2 ,通过间接竞争免疫法检测磺胺甲唑的方法。与不经MoS 2 修饰的Au SPR传感体系相比,该法可实现磺胺甲唑的超高灵敏测定,检出限(0.05 ng/mL)大幅降低,对构建高灵敏SPR传感器具有较好的借鉴意义。

2.2 基于电化学传感器的快速检测方法

电化学传感器通过将目标物在电极表面发生的物理或者化学变化转化为电信号(电位、电流、电阻等)来实现目标物的快速测定,具有微型化、成本低、选择性好、响应速度快、分析范围广、灵敏度高等优点,被广泛应用于环境监测、食品安全、临床诊断等领域。电化学传感器的识别元件和信号转化元件决定了其选择性和灵敏度。根据识别元件,可分为基于酶、抗体、Apt等生物识别元件的电化学生物传感器和基于分子印迹、超分子化合物、纳米识别材料等化学识别材料的电化学非生物传感器。

随着先进功能纳米材料的发展,研究者借助纳米材料比表面积大、导电性能优异、电催化活性好的独特性能,为电极表面提供更多的活性位点,增强传感界面的电子传输性能和对目标物的催化活性,进而提高电化学反应的速率和效率,实现电化学检测方法的性能突破。常用的纳米材料主要包括石墨烯(GR)、碳纳米管、石墨氮化碳(GCN)等碳基纳米材料,金属、金属氧化物等金属基纳米材料,MOFs、共价有机框架材料(COFs)等。Yuan Chenghu等设计制备了新型纳米复合材料CoS 2 -GCN,并以其为玻碳电极修饰材料,利用百草枯在电极表面氧化还原所产生的电流,成功实现了西瓜汁、苹果汁、柠檬汁和橙子汁中百草枯的电化学测定。该传感器由于CoS 2 和GCN的协同作用,具有灵敏度高(检出限为4.3 nmol/L)、重现性好、稳定性好、抗干扰能力强等优势,为农产品中百草枯的痕量检测提供了新路径。Wen Long等采用层层自组装法制备了GR/Au/AChE修饰的丝网印刷电极,基于GR和AuNPs的协同增敏以及水胺硫磷对AChE催化ATCh产生电活性物质TCh反应的抑制,构建了高灵敏电化学传感器,成功用于黄瓜和水中水胺硫磷的无标记检测,检出限(0.012 ng/mL)远低于GB 2763—2021《食品中农药最大残留限量》规定的黄瓜中最大残留限量(0.05 mg/kg)。Huang Yan等以4-氨基苯硼酸和烟酰胺为功能单体,在修饰有MWCNT-ZIF-8的玻碳电极上电化学原位聚合生成MIP,开发了一种测定水中加替沙星的电化学分子印迹传感器。MWCNTs增强了电极电导率,ZIF-8提高了比表面积进而增加了分子印迹结合位点,双功能单体显著提高了选择性,三者协同作用赋予了该传感器的超高灵敏度和抗干扰能力,加替沙星检出限为2.61×10 -15 mol/L,环丙沙星、诺氟沙星、培氟沙星、左氧氟沙星无干扰。Fu Yuchun等采用Cu 2+ 掺杂的COF(Cu-COF)作为玻碳电极和分子印迹薄层的联结桥梁,设计了MIP/Cu-COF/GCE电化学传感器用于牛奶中诺氟沙星的测定,检出限为1.90 μg/kg,远低于欧盟规定的牛奶中诺氟沙星的限量75 μg/kg。Cu-COF在增加导电性的同时使MIP更好地固定在电极表面,二者协同使构建的检测方法具有灵敏度高、抗干扰能力强、稳定性和重复性好等优点,在动物源性食品中痕量污染物的日常监测中展现了较大的潜力。

此外,纳米材料的引入不仅有助于提升电化学传感器性能,还有助于发展双模式检测,避免复杂样品基质干扰造成的假阳性。Wen Shaohua等设计了多功能COF/MB@MnO 2 纳米复合物,结果表明,COF/MB@MnO 2 同时具有高信号分子负载量、目标特异性识别单元和类氧化酶活性。纳米复合物表面MnO 2 被AChE水解ATCh产生的TCh还原而分解,导致大量封装的电信号分子亚甲基蓝被释放,电流明显增强;同时未被分解MnO 2 催化TMB生成对近红外光具有强吸收的oxTMB,并在808 nm激光照射下转换为温度响应信号。当体系中存在有机磷农药时,AChE催化ATCh反应被抑制,MnO 2 分解程度减弱,导致电流信号减弱,光热信号增强。依据该原理,构建了电化学和光热互补双模式毒死蜱传感器,检出限分别为0.063 2 ng/mL和0.108 ng/mL。该方法对有机磷类农药表现出良好的选择性,可有效避免食品和环境中的共存物质的干扰,准确测定水、卷心菜、韭菜、苹果等真实样品中毒死蜱的含量,为复杂样品中痕量物质的现场检测提供了新思路。

2.3 基于压电传感器的快速检测方法

压电传感器是利用压电材料的压电效应,将敏感元件表面质量变化转化为电信号进行检测的一种新型传感器,具有响应速度快、操作简单、无需标记、灵敏度高和可实时动态监测的优点。常见的压电材料包括石英晶体、压电陶瓷和氧化锌等无机压电材料,聚偏二氟乙烯等有机压电材料,DNA膜和肽等生物压电材料,其中石英晶体微天平(QCM)发展最为迅速,在快速检测痕量物质和表征反应变化过程中得到了广泛应用。QCM检测原理为:当样品中的待测物质与修饰在晶体表面上的识别材料结合时,晶体表面质量发生变化,引起晶片的谐振频率产生相应变化,振荡频率的变化值与晶体表面质量的变化值有相关性,以此实现对目标物的灵敏检测,其主要检测模式包括直接法、夹心法和竞争法等。

研究人员已基于抗体、Apt、MIP等识别材料开发出压电免疫传感器和压电分子印迹传感器用于农兽药残留的检测。Cervera-Chiner等以功能化的高频石英晶体为传感器、单克隆抗体作为生物识别元件,构建了压电免疫传感器,利用传感器的高灵敏度与抗体的高选择性,实现了蜂蜜中西维因和滴滴涕的成功测定,在蜂蜜样品中的检出限分别为8 μg/kg和24 μg/kg,能够满足欧盟规定的蜂蜜中西维因和滴滴涕最高残留限量要求(50 μg/kg)。MIP具有稳定性高、成本低等优势,可弥补天然抗体化学稳定性相对较低、价格昂贵带来的应用限制。Shikha等采用溶胶-凝胶法合成MIP,并将其涂覆在QCM传感器的石英晶体表面构筑压电分子印迹传感器。该传感器由于分子印迹薄层的高吸附特性和良好的选择性,对甲拌磷和马拉硫磷展现了良好的特异性,且检测结果与高效液相色谱法检测结果一致性高。为进一步提高检测灵敏度和稳定性,Özdemir等将钼酸铒(EM)和硫掺杂的类石墨相氮化碳(S-g-C 3 N 4 )共混研磨制备了EM/S-g-C 3 N 4 纳米复合材料,将EM/S-g-C 3 N 4 和MIPs依次修饰在QCM电极表面,实现了乐果的高灵敏测定,检出限为3.3×10 -10 mol/L。此外,该传感器抗干扰能力强、稳定性和重现性好、可至少重复使用5 次、保存6 周,对苹果汁中乐果的监测展现了较好的应用前景。Yang Yukun等将AuNPs/HKUST-1修饰QCM电极上,进一步通过Au-S键将四环素的Apt固定在AuNPs/HKUST-1上。研究结果表明,AuNPs/HKUST-1的引入提高了Apt-QCM传感器的灵敏度,有利于牛奶样品中痕量四环素的检测(检出限低至0.008 ng/mL)。对国 内外近5 年以 来农兽药残留检测技术的研究进展进行总结,如表1所示。




03

结语

本文对农兽药残留检测技术的研究进展进行了归纳总结,详述了常见不同农兽药识别元件的特点、制备方式和识别效果,并分析了多种技术在农兽药残留快速检测中的检测原理和应用效果。与传统大型仪器检测方法相比,农兽药精准快速检测技术具备耗时短、成本低、可实现快速现场实时检测的巨大优势,近年来,受到了研究者们的广泛关注并取得迅速发展,但在实际应用中也在选择性、灵敏度、稳定性等方面面临着诸多挑战。识别元件是影响快速检测技术性能最重要的因素。基于天然酶识别作用的速测技术依赖于酶的催化性能,易受环境影响,重现性有待提高;同时,该法往往适用于某一类农兽药,难以区分具体农/兽药品种。此外,该法目前多应用于有机磷类和氨基甲酸类农药以及

-内酰胺酶类兽药的测定,应用范围相对较窄。基于抗体和Apt的速测技术特异性较好,但制备过程较为繁琐,目标物种类覆盖度和商业化程度还有提升空间。基于MIP、MOFs材料等非生物识别的快速检测技术具有稳定性好、成本相对较低的优势,但存在一定的交叉反应且材料的商业化程度较低,限制了其发展。在检测手段方面,应用最为广泛的比色法在复杂样品基质中易受干扰且灵敏度不高,传感器检测方法商业化应用程度低,多残留高通量快速检测技术发展相对不足。

鉴于此,农兽药残留快速检测技术的未来发展趋势主要有:1)基于生物工程技术和理论计算,对酶、抗体等生物识别元件持续改进并建立规模化制备关键技术,突破筛选难、稳定性不足、成本高等瓶颈,推动其商业化进程。2)纳米材料作为重要的识别和信号转导增敏元件,对检测性能至关重要。需进一步开发具有优异的光学、导电性、类酶活性、识别能力的智能多功能纳米材料并实现批量稳定生产,提高农兽药快速检测技术的分析性能和商业化应用程度。3)通过巧妙的设计,发展多模检测技术,有效提升抗基质干扰能力和检测精准度。4)针对不同的快速检测技术,开发适用于不同基质的样品前处理配套装置,如利用微流控技术实现样品前处理和检测的一体化,有效解决假阳性和假阴性的同时,提升便捷性和检测效率。5)发展多通道策略,结合微纳加工和人工智能技术,实现农兽药多残留快速精准检测,有效提升检测通量以更好地满足市场和监管需求。

作者简介

通信作者:

王珊珊,中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所副研究员,研究方向为农产品质量安全与控制,主要从事新型多功能纳米材料的设计及其在化学污染物精准分析和活性成分可控递送中的应用。近年来主持了国家自然科学基金项目、国家重点研发专项子课题、农业行业标准制修订等国家/省部级项目20余项;第一作者/通信作者在

Nano Today、Analytical Chemistry、Journal of Hazardous Materials、Food chemistry
等期刊发表SCI论文;获北京市科学技术奖一等奖等省部级奖励6 项。

第一作者:

李方束,中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所硕士研究生,研究方向为食品安全控制技术

引文格式:

李方束, 张瑞婷, 程赞, 等. 基于精准识别的农兽药残留快速检测技术研究进展[J]. 食品科学, 2025, 46(6): 330-343.DOI:10.7506/spkx1002-6630-20240904-039.

LI Fangshu, ZHANG Ruiting, CHENG Zan, et al. Recent advances in rapid detection technologies based on precise recognition for pesticide and veterinary drug residues[J]. Food Science, 2025, 46(6): 330-343. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-20240904-039.

实习编辑:杨倩;责任编辑:张睿梅。点击下方阅读原文即可查看全文。图片来源于文章原文及摄图网


为汇聚全球智慧共探产业变革方向,搭建跨学科、跨国界的协同创新平台,由北京食品科学研究院、中国肉类食品综合研究中心、国家市场监督管理总局技术创新中心(动物替代蛋白)、中国食品杂志社《食品科学》杂志(EI收录)、中国食品杂志社《Food Science and Human Wellness》杂志(SCI收录)、中国食品杂志社《Journal of Future Foods》杂志(ESCI收录)主办,西南大学、 重庆市农业科学院、 重庆市农产品加工业技术创新联盟、重庆工商大学、重庆三峡学院、西华大学、成都大学、四川旅游学院、西昌学院、北京联合大学协办的“ 第三届大食物观·未来食品科技创新国际研讨会 ”, 将于2026年4月25-26日 (4月24日全天报到) 在中国 重庆召开。

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