生物素修饰3-(2-吡啶二硫)丙酰胺(Biotin-HPDP)是一种重要的生物化学试剂,结合了生物素与3-(2-吡啶二硫)丙酰胺的化学特性,在生物医学和生物技术领域具有广泛应用。
一、基本信息
- CAS号:129179-83-5
- 分子式:C₂₄H₃₇N₅O₃S₃
- 分子量:539.78
- 外观:白色至淡黄色固体
- 溶解性:溶于大部分有机溶剂(如DMSO、DMF),在水中的溶解性较差,需先溶于有机溶剂后再稀释于水性缓冲液中
- 储存条件:需在-20℃下避光、避湿保存,避免反复冻融,以确保其稳定性和活性
结构式:
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cas129179-83-5,Biotin-HPDP,生物素修饰3-(2-吡啶二硫)丙酰胺
二、化学结构
Biotin-HPDP由三部分组成:
- 生物素基团:具有与亲和素(avidin)或链霉亲和素(streptavidin)高亲和力结合的特性,是生物分子的富集、分离和检测的关键。
- 六碳链间隔臂(hexyl linker):提供空间柔性,降低空间位阻,提高标记效率。
- 巯基反应性基团(pyridyldithio):能与蛋白质或其他分子上的游离巯基(-SH)发生特异性反应,形成稳定的二硫键。
三、反应特性
- 巯基选择性反应:Biotin-HPDP通过其2-吡啶基二硫桥与蛋白质或小分子中的游离巯基形成可逆二硫键。该反应温和、快速且高度选择性,适合在温和缓冲液中进行,通常在pH 7-8的缓冲体系中效果最佳。
- 可逆性偶联:偶联后,二硫键可以通过还原剂(如DTT或TCEP)断裂,从而释放标记的蛋白或小分子,适用于可逆标记或后续分析。
- 可监测性:反应过程中释放的2-吡啶硫醇具有343 nm紫外吸收峰,可用于定量监测反应进度。
四、注意事项
- 溶解方法:Biotin-HPDP是水不溶性的试剂,在加入反应性水溶液之前需要在合适的溶剂中溶解,如DMSO或DMF。
- 反应条件:通常在pH 6.5-7.5的缓冲体系中进行,如PBS。
- 纯化与检测:标记后的蛋白质可通过链霉亲和素磁珠进行纯化,然后利用SDS-PAGE以及特定的抗体来分析感兴趣的蛋白。
- 安全防护:在操作过程中需穿实验服并戴一次性手套,以确保个人安全。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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