试剂是一步稀释还是多步稀释？

问题：

药液浓度为2.5mg/mL，需要要稀释到80ug/mL，想分三步稀释，不知可不可以？

5mL到25mL，再取10mL到25mL，再取10mL到25mL，这样会不会误差很大？

个人建议稀释次数越多，造成的误差越大：如果浓度不要求特别严格的话，直接取3mL→100mL配制；如果要求严格，可使用移液枪或3mL和0.2mL的大肚移液管配合使用一次性稀释：3.2mL→100mL。

大多数偏向稀释两次:5mL-25mL,4mL-25mL

最好中间步骤越少越好。

稀释100倍：三种方式

1）1mL稀释至100mL:

比如用1mL单标线吸量管，允许差A级是±0.007mL，B级是±0.015mL，用刻度吸量管，A级是±0.008mL，B级是±0.015mL。

若不考虑读数、温度引起的液体膨胀、体积校正值修约误差带来的影响，仅考虑量器校准引起的不确定度分量，按均匀分布，其相对标准不确定度分别为0.404%、0.866%、0.462%、0.866%。

100mLA级 容量瓶定容产生的不确定度分量仅考虑校准体积带来的影响，允许差为±0.10mL，按均匀分布，其相对标准不确定度为0.0577%

合成以上两项，合成相对标准不确定度分别为0.408%、0.868%、0.465%、0.868%。

2）10毫升稀释至1000mL:

用10mL单标线吸量管，允许差A级是±0.020mL，B级是±0.040mL，用刻度吸量管，A级是±0.050mL，B级是±0.10mL。若不考虑读数、温度引起的液体膨胀、体积校正值修约误差带来的影响，仅考虑量器校准引起的不确定度分量，按均匀分布，其相对标准不确定度分别为0.115%、0.231%、0.289%、0.577%。

1000mLA级 容量瓶定容产生的不确定度分量仅考虑校准体积带来的影响，允许差为±0.40mL，按均匀分布，其相对标准不确定度为0.0231%合成以上两项，合成相对标准不确定度分别为0.117%、0.232%、0.290%、0.577%

3）10毫升稀释至100毫升，再取10毫升稀释至100毫升：

用10mL单标线吸量管，允许差A级是±0.020mL，B级是±0.040mL，用刻度吸量管，A级是±0.050mL，B级是±0.10mL。其相对标准不确定度分别为0.115%、0.231%、0.289%、0.577%100mLA级 容量瓶定容产生的其相对标准不确定度为0.0577%合成以上两项分别为：0.129%、0.238%、0.295%、0.580%第二次稀释同第一次，因此逐级稀释产生的合成相对标准不确定度为：0.182%、0.337%、0.417%、0.820%。

稀释操作建议

建议稀释时全部使用A级量器。用1mLA级刻度吸量管稀释至100毫升 和10mLA级刻度吸量管稀释至100毫升两次稀释 合成相对不确定度分别为0.465%和0.417% ，相差不大。

比较以上数据即可发现：

用10mL A级单标线吸量管稀释至1000mL 产生的相对不确定度分量最小。

其次是10mL A级单标线吸量管稀释至100mL A级容量瓶两次逐级稀释。

再次是10mL B级单标线吸量管稀释至1000mL A级容量瓶。

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