机械敏感dSTORM成像

　　图1：结合了用Kinetix CMOS拍摄的GUV膜图像，分别以超分辨率(橙色)和绕射极限(白色，从全部6000帧电影的投影重建)进行对比。Kinetix 的高分辨率和低噪声能力使得超分辨率应用实现了高画质。

　　背景

　　亚历山大·弗尔斯滕伯格博士的实验室专注于光学光谱和显微工具的开发与应用，重点是利用智能荧光探针实现单分子成像。

　　Fürstenberg博士告诉我们他实验室最近的研究：“我们有兴趣开发荧光探针......我们使用对生物膜侧向压力敏感的探针，它们可以告诉你膜的成分、脂质的堆积情况，这些是机敏的荧光团，称为鳍状体......有一种新型的鳍状物会闪烁，这正是我们实现超高分辨率显微镜所需要的。”

　　“利用这些荧光鳍片，我们想观察巨型单层囊泡(GUV)的膜，并用dSTORM演示超分辨率成像。”

　　挑战

　　以超分辨率成像GUV膜是科学相机的一项要求极高的应用，因为单个GUV截面(膜内填充有鳍探针)信号较低，需要长时间拍摄大量图像才能构建dSTORM图像。此外，需要较大的视野以容纳更大的GUV，以避免铺砖和缝合，并且需要高灵敏度以检测膜内的荧光团。

　　Fürstenberg博士谈到了之前的相机解决方案：“我之前已经有一台EMCCD相机，但它已经用了10年，速度太慢......我们的视野非常有限，无法看到那些巨大的GUV......我们还需要对GUV膜上的单个探针进行敏感度观察，这些探针信号非常微弱，在某些脂质环境中我们之前无法真正分辨出来。

　　我对Kinetix的不同模式以及它能突破1000帧的能力印象深刻。------亚历山大·菲尔斯滕贝格博士

　　解决方案

　　Kinetix CMOS满足该应用的所有需求，拥有大视野、95%峰值量子和极低的读取噪声高灵敏度，以及高分辨率，得益于一颗1000万像素的传感器，像素尺寸平衡为6.5微米。

　　Fürstenberg博士谈及他使用Kinetix的经历：“我需要一台新相机，所以选择了最好的，我看到许多优点，比如非常宽广的视野。在速度方面，我们比之前的相机快了10倍，这将有助于我们规划未来的实验。

　　“多亏了光度测量团队的帮助，安装Kinetix非常容易，摄像头在MicroManager上运行也非常流畅，这一切都是很大的卖点......而且不用担心要把感兴趣的区域置中也很棒，以前我们必须把样本精确放在场中央，现在有了Kinetix，这个问题已经解决了。”