湖北
在IP/Co-IP实验中，获得一条清晰的条带并不直接等同于实验成功。结果的可靠性，高度依赖于是否设置了严谨、正确的实验对照。缺乏对照的IP结果，其结论往往是站不住脚的。本文将深入解析IP实验中两个至关重要的对照：阴性对照（IgG对照）和阳性对照（Input对照）。
1. 阴性对照（IgG对照）：排除非特异性结合的“金标准”
- 核心意义：理论上，这种非免疫的IgG不应与样本中的任何蛋白发生特异性结合。因此，在最终的WB检测中，IgG对照泳道不应出现除抗体轻重链以外的任何条带
- 如果出现了其他条带，则表明样本中存在与IgG或磁珠发生非特异性结合的蛋白，这些信号会干扰对真实互作结果的判断。设置IgG对照，就是为了识别并排除这些背景干扰，确保实验组出现的条带是真正由特异性抗体捕获产生的。
2. 阳性对照（Input对照）：验证实验系统有效性的“内部标尺”Input对照，又称裂解液对照。其操作非常简单：在开始IP实验前，取出一小部分用于IP的细胞或组织总蛋白裂解液，直接进行WB检测，使用与检测IP产物相同的抗体。
- 核心意义：Input对照用于证明两件事：第一，你的样本中确实存在你想要研究的目标蛋白；第二，你后续用于检测IP产物的WB抗体是有效的。如果Input对照结果为阴性，那么无论IP结果如何，整个实验都无法成立，因为要么样本有问题，要么检测抗体失效。
将实验组（IP）、阴性对照（IgG）和阳性对照（Input）的结果放在一起解读，才能得出科学结论：只有当Input阳性，IgG阴性，而IP组出现目标条带时，结果才是可信的。
亚科因生物（ABBKINE）深知严谨的对照是科学实验的灵魂。在我们的通用型IP/Co-IP工具箱中，不仅提供了经过优化的裂解液、磁珠和洗脱缓冲液，更标配了即用型的同型IgG阴性对照。
我们致力于通过提供这样系统化、标准化的解决方案，帮助研究者从一开始就构建起可靠的实验体系，让每一个阳性信号的背后，都有坚实的逻辑支撑，助力科研数据的真实与严谨。
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