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轻便型集菌仪的操作流程是怎样的

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  轻便型集菌仪的操作流程需严格遵循无菌操作原则,核心围绕 “仪器准备→样品处理→过滤截留→培养观察” 展开,具体步骤适配无菌检查或微生物限度检查需求,细节如下:

  一、操作前准备

  环境与器具准备

  操作需在洁净区(如百级超净台)或无菌环境中进行,提前 30 分钟开启超净台及紫外消毒灯,对操作台面、器具消毒;

  准备配套的一次性集菌培养器(含滤膜,孔径 0.45μm 或 0.22μm,根据检测需求选择)、无菌注射器 / 移液管、稀释液(无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液)、培养基(硫乙醇酸盐流体培养基用于需氧 / 厌氧菌,改良马丁培养基用于真菌)。

  仪器检查与调试

  检查轻便型集菌仪外观,确认电源、蠕动泵头无破损,锂电池电量充足(或接通电源);

  开启仪器,设置参数:转速(一般调节为 80~120rpm,根据样品黏度调整)、运行模式(定时或连续运行),空载试运行 1~2 分钟,确认泵头转动平稳、无异常噪音。

  集菌培养器安装

  拆开一次性集菌培养器包装,无菌操作下将培养器进样口与样品管路连接,出液口连接排液管(排液管末端置于无菌废液桶);

  将培养器卡入集菌仪的蠕动泵头卡槽,确保管路贴合泵头滚轮(避免管路扭曲或漏气),轻轻压紧泵头压盖。



  二、样品过滤与截留

  样品处理

  液体样品(如注射剂、纯化水):若样品为无菌制剂,直接取规定体积(如 100mL)通过无菌注射器注入集菌培养器进样口;若样品含抑菌成分,需加入适量中和剂(如 β- 内酰胺酶中和青霉素类),或采用薄膜过滤法反复冲洗滤膜(用 300~500mL 稀释液冲洗)。

  固体样品(如食品、中药材):取样品适量,加入无菌稀释液制成匀浆,经无菌滤膜(粗滤)去除大颗粒杂质后,取滤液注入集菌培养器。

  启动过滤

  按下仪器 “启动” 键,蠕动泵运转带动样品通过滤膜,微生物被截留于滤膜表面;

  过滤过程中观察流速,若流速过慢(如样品黏度高),可适当提高转速(不超过 150rpm),避免滤膜堵塞;若出现漏液,立即停机,检查管路连接是否紧密。

  滤膜冲洗(按需)

  对于含抑菌成分的样品,过滤完成后,用无菌稀释液分 3~5 次冲洗滤膜(每次 50~100mL),充分洗脱抑菌物质,避免影响后续微生物生长。

  三、培养基添加与培养

  培养基注入

  过滤及冲洗完成后,关闭集菌仪,无菌操作下向集菌培养器中注入融化并冷却至 45~50℃的培养基(硫乙醇酸盐流体培养基约 100mL,或改良马丁培养基约 80mL);

  轻轻摇晃培养器,使培养基均匀覆盖滤膜,确保无气泡残留(气泡会遮挡微生物生长)。

  培养观察

  将集菌培养器从仪器上取下,密封培养器端口,置于对应温度的培养箱中:需氧 / 厌氧菌培养温度 30~35℃,培养时间 5 天;真菌培养温度 20~25℃,培养时间 7 天;

  培养期间每日观察培养基是否浑浊(或有无菌落生长),若出现浑浊,取培养液涂片镜检,或转种至固体培养基鉴定微生物种类。

  四、操作后清理

  仪器清洁

  关闭仪器电源,拆卸集菌培养器(按医疗废物处理),用 75% 酒精擦拭蠕动泵头、卡槽及仪器表面,去除残留液体或污染物;

  若管路有残留样品,用无菌水冲洗泵头内部,晾干后盖上防尘罩。

  记录与结果判定

  详细记录样品信息、仪器参数、过滤体积、培养条件及观察结果;

  若培养基澄清无浑浊,判定为 “无菌检查合格”;若出现浑浊或菌落生长,需进一步确认是否为样品污染(排除操作污染后,判定为不合格)。

  五、关键注意事项

  全程严格无菌操作,避免环境、器具引入杂菌导致假阳性;

  集菌培养器需一次性使用,禁止重复利用;

  不同样品(如油性制剂、高盐样品)需选择适配的滤膜材质(如疏水性滤膜适配油性样品),避免滤膜溶解或堵塞。

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