又是文库筛选，又是受体发现！NM背靠背论文揭示EB病毒入侵上皮细胞的关键受体！

EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）是一种疱疹家族病毒，与咽喉癌、鼻咽癌、淋巴瘤等多种癌症发生密切相关。因其可通过唾液传播，又被称为亲吻病毒。3～5岁幼儿90%以上曾感染EB病毒，90%以上成人有病毒抗体。EBV主要感染 B 细胞和口腔上皮细胞，并建立终身潜伏感染。现有疫苗策略主要针对 B 细胞感染，但对上皮细胞感染的防护效果有限。

2025年9月，哈佛医学院Bo Zhao团队领衔在Nature Microbiology杂志发表题为Epstein–Barr virus exploits desmocollin 2 as the principal epithelial cell entry receptor的研究，揭示EBV感染上皮细胞的新机制：EB病毒利用desmocollin 2（DSC2）作为主要进入受体。该发现为开发更有效的EBV疫苗和治疗手段提供新靶点。

EBV感染B细胞的机制已相对清晰：病毒表面糖蛋白gp350结合CD21，gp42结合HLA II类分子，随后gH/gL和gB触发膜融合，实现内吞。但上皮细胞感染则不同，其细胞间接触感染比游离病毒感染效率高出约1万倍。因此，接触感染可能是上皮细胞的主要感染途径，也是病毒从免疫细胞向上皮传播的关键。过去，EphA2被视为上皮感染的重要受体，但其作用并不全面。

研究团队建立高效的细胞接触感染模型，用正常口腔角质细胞（NOK）与携带eGFP标记EBV的Akata B 细胞共培养，发现感染效率可达95%以上。而用0.4μm的Transwell滤膜阻断物理接触后，感染几乎完全消失。为了找出上皮细胞接触感染的必需因子，研究人员开展了全基因组CRISPR筛选。

首先在NOK细胞中稳定表达Cas9，然后转导Brunello sgRNA文库。经嘌呤霉素筛选后，与诱导EBV裂解复制的Akata细胞共培养2天；用FACS分选eGFP高低表达细胞后做测序。结果发现，24个基因在eGFP低表达组富集，包括已知的EphA2和Furin，以及新发现的DSC2。DSC2是一种桥粒蛋白，在上皮细胞中高表达，含有五个钙粘蛋白样重复序列，是细胞接触的关键蛋白之一。

Loss-of-function验证实验中，单敲除DSC2或DSC3仅部分阻断感染，但双敲除几乎完全消除细胞接触和游离病毒感染。但在DSC2/3双敲除的NOK细胞中，过表达DSC2或DSC3可部分恢复感染效率。这些结果提示，DSC2在上皮感染中处于核心地位。

扩展到多种细胞系和原代细胞，确认DSC2功能的普遍性。阐明DSC2是EBV感染上皮细胞的必需受体，DSC3辅助其功能。机制层面，该研究揭示DSC2与EBV糖蛋白gHgL可直接相互作用。

该发现颠覆EBV上皮感染的传统认知，将DSC2确立为主要入侵受体，为EB病毒的防控治提供新武器。而早在2025年7月，中山大学曾木圣教授在Nature Microbiology杂志发表题为Desmocollin 2 is a dominant entry receptor for Epstein–Barr virus infection of epithelial cells的研究论文，揭示了DSC2在EBV感染上皮细胞中的关键作用，虽然有两个月的时间差，但也算是背靠背论文。

两个团队的策略都是全基因组CRISPR文库筛选，关键实验都涉及敲除实验，直接相互作用验证，回补实验等。因此，文库筛选的流程越来越成熟。当然，这个赛道也越来越拥挤，唯有找到好的切入点，才能有重大发现。果友们共勉！