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图1: 这是一张使用Kinetix22拍摄的果蝇幼虫NMJ在第六和第七肌囊泡融合事件的图像。图像显示两个运动神经元支配NMJ,突触后谷氨酸受体反应由囊泡自发融合事件触发。
背景
Jan Pielage教授的研究重点是识别控制突触形成、功能和稳定性的分子机制。Pielage教授进一步告诉我们:“我们利用果蝇模型识别维持神经肌肉连接处(NMJ)稳定性或功能的新型基因。我们已经鉴定出若干基因,这些基因是保守的,可能导致小鼠或人类模型中的残疾。”
“我们希望观察整个果蝇NMJ的神经退行性,观察信号模式的变化,以进一步了解潜在的代偿机制和疾病进展。”
挑战
Pielage教授描述了该应用面临的一些挑战:“我们希望在NMJ单一活性区分辨率下监测突触传输中的潜在缺陷,为此我们需要极高的灵敏度,因为信号非常低。”
“我们还需要高速成像以实时识别这些事件,频率范围在10-100赫兹之间,但我们也想成像电压敏感染料,为此需要达到1000赫兹。所以,我们需要真正发挥相机的潜力。”
“我们还希望对整个NMJ进行成像,了解哪些释放点处于活跃状态至关重要。之前我们依赖电生理学,能检测释放事件,但不知道它们发生在哪里。为此,我们需要光学方法。”
该应用需要高速和高灵敏度在大视场内结合,以亚细胞分辨率观测整个果蝇NMJ的所有事件。
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这套系统是为Kinetix22设计的,和竞争对手比较时,Kinetix22确实是我们应用中最合适的,是完美的相机!------扬·皮耶拉格教授
解决方案
Kinetix22是该应用的理想解决方案,Pielage教授分享了他对Kinetix22的体验:“该系统是为Kinetix22设计的,时间分辨率和灵敏度的提升至关重要。之前我们刚好在探测极限,但现在看起来很不错,我们很惊讶能看到信号。我们还可以看到这些活动的动力学,这真的是一个很棒的工具,我们与竞争对手进行了比较,Kinetix确实是我们应用中最合适的,是完美的相机。”
“这些实验之前是不可能的,现在我们可以看到NMJ内微型释放事件,这是电生理学无法实现的。这些光学记录极大地提升了我们的研究规模,如果我们能直接与电生理学和免疫化学结合,就能真正获得对这些过程的新见解。”
“它在MicroManager里运行良好,设置也很简单,从一开始就有效。”
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