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产品名称:ATTO 633 NHS ester,ATTO 633 活性酯的优势与对比
1. 核心应用场景
生物标记:
蛋白质/抗体标记:用于流式细胞术(FACS)、免疫荧光、Western Blot、ELISA等,追踪蛋白质定位与相互作用。
核酸标记:标记氨基修饰的寡核苷酸,应用于荧光原位杂交(FISH)、PCR产物检测及基因组研究。
细胞成像:与鬼笔环肽结合标记微丝(如ATTO 633 Phalloidin),观察细胞形态、迁移及动态变化;适配共聚焦/超分辨显微镜(如STED、PALM、dSTORM)。
活体成像:近红外波长穿透力强,减少组织自发荧光干扰,适用于小动物体内药物分布追踪、肿瘤微环境研究及深层组织成像。
多色荧光分析:与ATTO 647、Cy5等染料联用,实现多通道检测,区分不同生物分子。
2. 优势与对比
性能优势:
高灵敏度:远红/近红外发射减少背景干扰,提升信噪比,适合低丰度目标检测。
稳定性:热稳定性与光稳定性优于传统染料(如Cy5),支持长时间成像或多帧采集。
兼容性:与多种生物分子兼容,反应条件温和,标记效率高。
对比ATTO 680:
波长差异:ATTO 633发射波长(651-657 nm)短于ATTO 680(694 nm),更适合需要较短波长或特定光谱分离的场景。
应用侧重:ATTO 680在近红外区域更深,更适合深层组织成像;ATTO 633则更灵活,适用于细胞水平及中等深度成像。
3. 操作与储存
反应条件:推荐10:1摩尔比(染料:蛋白质),室温反应30-60分钟,需在碱性环境中进行以避免NHS酯水解。
纯化方法:使用Sephadex G-25柱纯化或透析,去除未反应染料。
储存条件:-20°C避光干燥保存,避免反复冻融;长期保存可添加甘油(终浓度50%)至-80°C冻存。
安全注意:仅供科研使用,不可用于人体或药用;操作时需避光,防止光降解。
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