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产品名称:AF 700 NHS Ester,AF700 琥珀酰亚胺酯的生物相容性与选择性
一、生物相容性
低细胞毒性
AF700 NHS Ester在生理pH(4-10)范围内稳定,对细胞增殖、膜完整性及线粒体功能影响小,适合活细胞/活体实验。其代谢产物无毒,可通过肾脏快速清除,符合临床前研究安全标准。
示例:在流式细胞术、共聚焦显微镜成像中,标记后的细胞或组织样本可维持高活性,支持长时间(12小时以上)成像。
水溶性与pH稳定性
染料本身水溶性良好,pH 4-10范围内荧光性能稳定,避免因pH波动导致的信号漂移。磺化结构减少非特异性吸附,提升成像灵敏度。
储存条件:需避光、-20℃干燥保存,溶液现配现用(如DMSO溶解后稀释至缓冲液),防止NHS酯水解。
体内应用潜力
近红外荧光(激发702nm/发射723nm)穿透深度达厘米级,背景干扰低,适用于活体成像、肿瘤边界识别及药物递送追踪。代谢产物可经肾脏排泄,减少体内蓄积风险。
二、选择性
特异性反应机制
NHS酯基团:与生物分子中的伯胺(-NH₂,如蛋白质赖氨酸残基、抗体N端氨基)发生共价偶联,形成稳定酰胺键。反应在弱碱性条件(pH 7.5-8.5)下进行,避免酸性环境导致的NHS酯水解。
高特异性:对伯胺的选择性远高于仲胺或巯基,减少非特异性结合。例如,在抗体标记中,可优先标记末端胺基(如轻链),降低赖氨酸侧链的交叉反应。
荧光特性优化
近红外波长(700-720nm)减少生物样本自发荧光干扰,提升信噪比。量子产率高(约0.2-0.3),光稳定性良好,支持多色成像(如与AF488、AF647联用)及长时间曝光实验。
示例:在多色流式细胞术中,AF700可与APC、PE等染料组合,实现高维免疫表型分析。
应用场景适配性
蛋白质/抗体标记:用于免疫荧光、Western blot、ELISA等,标记后分子活性保留,不影响功能。
核酸/纳米材料修饰:偶联胺修饰的寡核苷酸或纳米颗粒(如脂质体、量子点),实现靶向递送或生物传感。
活体成像:结合肿瘤靶向分子(如抗体、多肽),实现肿瘤边界识别、转移监测及手术导航。
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