Y-27632 dihydrochloride 别名：Y27632； Y-27632 2HCl

Y-27632 dihydrochloride 是一种在生物医学研究中被广泛使用的小分子抑制剂，尤其以其在类器官培养和干细胞研究中的关键作用而闻名。

一、化学性质

• 化学名：(R)-(+)-trans-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺二盐酸盐
• 别名：Y27632; Y-27632 2HCl; Y-27632 dihydrochloride
• CAS号：129830-38-2
• 分子式：C₁₄H₂₁N₃O·2HCl
• 分子量：320.26 g/mol
• 纯度：99%
• 厂家：AbMole
• 外观：通常为白色固体
• 溶解性：在水中的溶解度约为 14 mg/mL，在DMSO中约为 64 mg/mL（需要温热助溶），在乙醇中溶解度较低（<1 mg/mL）。
• 纯度：通常要求不低于98%。
• 储存条件：建议在-20°C、干燥避光条件下保存。

二、原理与机制

Y-27632 dihydrochloride 是一种高效、可穿透细胞、选择性的ATP竞争性ROCK抑制剂。它的主要作用机制是通过与ATP竞争催化结合位点，选择性抑制Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK），包括 ROCK1（也称 p160ROCK）和 ROCK2 亚型。其对ROCK1的抑制常数（Ki）约为140-220 nM，对ROCK2的Ki约为300 nM，并且比对其他激酶（如PKC、cAMP依赖性蛋白激酶等）的抑制强度高出200倍以上，展现了良好的选择性。

在细胞功能层面，ROCK是Rho GTPase信号通路的关键下游效应器，主要参与调节肌动蛋白细胞骨架的重组。当Y-27632 dihydrochloride抑制ROCK后，能够阻断Rho介导的应力纤维形成，影响细胞的收缩、形态、迁移以及胞质分裂等过程。此外，它还能抑制G1-S期细胞周期进程。对于干细胞，尤其是在细胞传代或单细胞悬液制备过程中，Y-27632 dihydrochloride通过抑制ROCK信号，能够有效防止分离诱导的细胞凋亡，显著提高细胞的存活率和克隆形成效率，这对于类器官培养和干细胞维持至关重要。

三、实验应用

类器官与干细胞培养：这是Y-27632 dihydrochloride最为人所知的应用领域。在类器官的初始培养阶段以及干细胞（包括人类胚胎干细胞hESCs和诱导多能干细胞iPSCs）的传代和单细胞克隆过程中，添加Y-27632 dihydrochloride可以大幅减少细胞凋亡，提高细胞贴壁存活率和克隆形成效率，有时甚至能将克隆效率从约1%提升至27%，因此被誉为"类器官培养神器"。它也常用于干细胞的低温保存和解冻复苏过程，以保护细胞活力。

细胞生物学研究：利用其抑制ROCK的能力，Y-27632 dihydrochloride被广泛用于探究Rho/ROCK信号通路在多种细胞过程中的作用，例如：细胞迁移、侵袭、细胞骨架动力学、细胞收缩调控以及细胞周期进程等。例如，研究表明Y-27632可以阻断溶血磷脂酸（LPA）刺激的细胞侵袭活性。

疾病模型与研究：

癌症研究：Y-27632 dihydrochloride被用于研究ROCK在肿瘤细胞迁移、侵袭和转移中的作用。在一些癌症类器官模型的构建中，它也作为培养基的补充成分.

心血管研究：有动物实验表明，Y-27632 dihydrochloride在自发性高血压大鼠模型中口服给药能显著降低血压。此外，它在肺循环中，通过抑制ROCK，能降低缺氧诱导的血管收缩和血管重构.

神经科学研究：Y-27632 dihydrochloride被用于促进人类胚胎干细胞向特定神经祖细胞（如Bf1+皮质和基底端脑祖细胞）的分化。在研究诸如癫痫等神经系统疾病方面也有应用潜力.

四、注意事项

安全性：该产品可能对人体有毒害，操作时请穿戴适当的防护装备（如实验服和一次性手套），避免直接接触或吸入。

用途限定：仅限于科学研究用途，不可用于临床诊断、治疗，或作为食品、药品使用。

溶液配制与储存：建议使用DMSO配制储备液。溶于非DMSO溶剂的溶液建议分装后于-80°C保存，预计可在6个月内保持稳定。避免反复冻融。