摘要
D-Squame D100胶带由美国Cuderm研究生产,其表面涂覆黏性材料,通过粘贴于皮肤表面可均匀采集角质层细胞。该技术利用黏附性差异高效提取目标分子,进而观察角质层的生理和病理学变化。该技术被用于药物、化妆品的动力学研究和观察活性物质的渗透深度的研究。
1,胶带剥离法介绍
角质层作为表皮的最表层,由高度特化的无核角质细胞和填充在细胞间的脂类组成,主要功能是防止表皮水分丢失和外源性物质的入侵。这种细胞在 HE染色切片上呈均匀伊红色,细胞轮廓不清,最表面的细胞连接松散,趋向脱落,形成鳞屑。胶带剥离法作为物理刺激模型具有评价周期短、可客观定量评价等优点,适用于体内和体外皮肤模型以及人类和动物皮肤的研究。
2,胶带剥离法操作步骤
首先,将D-SquameD100胶带贴在皮肤上,避免折叠。当同一部位重复采样时,需使用笔或模板标记胶带的位置。
再次,使用D-SquameD500压力仪垂直施压5-15秒后,用镊子快速撕下胶带。使用压力仪是为了增加表皮细胞与胶带的粘附性并均匀采集。如需同一皮肤部位反复黏贴,为了提高角质层剥离的均匀性,应连续交替撕下D-Squame D100胶带。
最后,将剥离后的胶带黏性面朝内置于无菌小瓶或D-Squame D120专用存储卡中。
3,D-Squame D100胶带剥离物的后处理及分析
第一,形态学或生物物理标志物(例如角质细胞硬度或拓扑结构)可以直接在胶带上测量。
第二,分子标志物必须在分析测定前从胶带中提取出来。提取溶剂的类型、提取技术(振荡、涡旋或超声波)以及获取足够大样本所需的胶带数量均取决于具体的生物标志物。免疫标志物和抗菌肽,可使用各种添加蛋白酶抑制剂或表面活性剂的裂解提取液。高亲脂性标志物(例如神经酰胺或游离脂肪酸)通常需要使用不同极性的有机溶剂进行多级提取。基因表达谱分析,通常使用RNA分离裂解缓冲液。
4,应用
第一,测定各种皮肤病理中的生物标志物;生物标志物的研究主要集中在监测治疗效果和分型,以及分子领域RNA定量分析。
第二,评估药物的皮肤吸收情况。
第三,诱导标准化皮肤屏障损伤。
综上,D-Squame D100胶带不但可以均匀高效的采集角质层样品,并且采集后过敏反应低。同时D-Squame D100胶带可以兼容蛋白质测量设备-D-Squame D501,也可兼容D-Squame D500压力仪,使样品采集过程更加标准化,采集结果更稳定和准确。
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