CMP-N-乙酰神经氨酸(CMP-Neu5Ac)是一种由胞嘧啶单磷酸(CMP)和N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)组成的糖核苷酸化合物,作为唾液酸化修饰的活性供体,在细胞表面的糖基化过程中发挥关键作用。
一、核心性质与结构
化学组成
- 分子式:C₁₆H₂₄N₄O₁₆
- 分子量:约562-576 g/mol。
- 结构特征:由CMP(含核糖核苷酸和磷酸基团)与N-乙酰神经氨酸(一种九碳糖)通过化学键连接而成。
物理性质
- 外观:白色或类白色粉末,具有吸湿性。
- 溶解性:易溶于水,水溶液呈碱性;在有机溶剂中溶解性较差,但在极性较强的溶剂(如二甲基亚砜)中可能溶解。
- 稳定性:极不稳定,即使以干燥铵盐形态在-18℃下保存,也会逐渐分解为CMP和N-乙酰神经氨酸。
结构式:
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cas:3063-71-6,CMP-N-乙酰神经氨酸,CMP-Neu5Ac
二、生物合成途径
CMP-N-乙酰神经氨酸的合成主要通过以下步骤完成:
N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)的生成:
- 由N-乙酰甘露糖胺(ManNAc)和磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)在Neu5Ac合成酶的催化下反应生成。
CMP-N-乙酰神经氨酸的活化:
- Neu5Ac在CMP-Neu5Ac合成酶的作用下,与胞苷三磷酸(CTP)反应,生成CMP-Neu5Ac。
- 该过程需特异性的焦磷酸化酶催化,确保反应的高效性。
三、制备方法与工艺
酶催化合成
- 两步酶法:在含N-乙酰葡糖胺、丙酮酸和CMP的体系中,通过N-乙酰葡糖胺-6-磷酸-2-表异构酶等三种酶实现合成。
- 单步酶法:利用脆弱拟杆菌来源的N-乙酰葡糖胺-2-表异构酶完成单步酶促反应,简化工艺流程。
微生物代谢工程
- 大肠杆菌改造:大肠杆菌BL21(DE3),敲除竞争代谢途径基因(如manA、wecB),强化关键酶表达,并优化发酵工艺,实现CMP-Neu5Ac前体N-乙酰神经氨酸的高效合成(产量达23.46 g/L)。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体!
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