生物实验室里一直流传着一些规则怪谈:
如果超净工作台的紫色灯亮起,一定要等 30 min 后才能使用,不然会有不好的事情发生;
混匀细胞时必须按照规定仪式:上下晃 10 下,左右晃 10 下……
这些规则怪谈虽然看起来诡异,但放在生物实验室倒也正常,细究下去,每一条规则背后可能都是血的教训。
但是其中有一条,最近引起了一些争议
——移液器使用完毕后,到底要不要调回最大量程?
* 想直接看结果可拉到文末看省流版
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图源:网络
竟是只有中国人遵守的规定?
这个问题的答案,对于国产科研人来说,早已刻进 DNA 里,毕竟师兄师姐耳提面命那么多次——
移液器调回最大量程使弹簧不受力,保护移液器。
事实真的如此吗?
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图源:小红书
最近中外科研人在小红书一对账发现,这个要求怎么好像是中国科研人特供版???
这还了得??
你跟生物科研人说移液器不用调回最大量程,不亚于告诉大家,1+1,其实可以不等于 2。
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学霸君搜索发现,其实这个话题在近 10 年间其实一直不断被提及,但大家一直也没有吵出个头绪。
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不过这条规定倒也确实不是「国人特供版」,因为在国外的论坛上也讨论得火热,一些实验室当作不可违背的金科玉律,有些则完全不在意:
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图源:reddit
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图源:Research Gate
两边观点
支持的人分为 3 派:
有人认为,尽管移液器量程的精确度不直接由弹簧控制,但是如果不调回最大量程,弹簧就会一直处于压缩状态,长期的应力会使弹簧发生蠕变,回弹不到原始长度。
这时按压时就会出现无法回弹或者回弹不够丝滑的情况,就会影响移液的精度。
还有人认为,移液器使用时如果有操作不当吸入大量液体,使用后将移液器垂直放置,并将量程调至最大,这时弹簧放松,腔体内压力较小,液体容易流出。
这两种支持的观点有一个共同的前提——
在移液器处于最大量程时,弹簧处于不受应力松弛状态。
还有人这样认为,如果大家都保持移液器调至最大量程的规范,可以一定程度上避免下一个使用的人直接使用出现失误。
而反对的观点则认为:
并没有研究表明不调回最大量程会影响移液器的精准度,真正能保证移液器精准度的操作应该是定期校准移液器,比如半年一次。
过于频繁地调整移液器的量程,反而才是减少移液器的使用寿命。
真相如何?
为了解答这个疑惑,学霸君查阅了各大移液器品牌手册,并咨询了技术人员。
结论是:因「枪」而异!
比如发明了「可调移液器」的经典老牌 Gilson,它家的移液器使用后是需要调回最大量程的。
因为 Gilson 的移液器就是上文提到的情况,它的弹簧在最大量程时是处于非压缩状态,时常调回可以延长弹簧的使用寿命。
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这一点 Gilson 的官方人员也给出确认:
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但相反,以电动移液器见长的德国公司 Sartorius,它家的手动移液器是无需调回最大量程的。
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因为不同于目前市面上的大部分移液器使用的压缩弹簧,Sartorius 的移液器使用的是张力弹簧设计。
这样的设计使得移液器在调节量程时始终处于不受力的状态,只有当操作时,按下活塞,弹簧才拉伸,松开活塞,弹簧便复原,因此不用通过调回最大量程来保护弹簧。
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图源:Sartorius 官网
还有造出世界上第一支移液器的知名移液器品牌 eppendorf,其说明书中并没有写在不用时需要将量程调至最大。
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图源:eppendorf官网
为此学霸君联系了 eppendof 官方技术人员,对方表示 eppendof 现在的移液器不需要在不使用时调回最大。
之前之所以会有这样的规定,是因为 20 年前的弹簧材料工艺就是比较容易疲劳,需要调节至最大量程释放压力。
但现在使用的弹簧材料已经大大进步,于是去除了这一项提示,并且 eppendof 移液器中的弹簧在调回最大量程时也并不是处于完全松弛状态的,所以如果是出于保护弹簧考虑,无需将移液器调整至最大量程。
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图源:eppendorf 官网
同样不用调回最大量程的还有知名移液器品牌普兰德(Brand),官方技术人员告诉学霸君,他们的弹簧已经迭代,使用后无需调回。
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图源:自己截的
也有网友分享了康宁(Corning)移液器的使用经验,同样是不需要调回最大量程的。
技术人员表示,移液器的弹簧只是在按压的时候才处在受压状态,负责精准度的是校准螺丝。简而言之,就是对于康宁移液器来说,不用时调节到最大量程并不是必要步骤。
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图源:小红书
还有一个移液器大厂 Thermo Scientific,它们的移液器用户手册中也没有要求调回最大量程。
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不过学霸君也同时咨询了 Thermo Scientific 的技术人员,这次 Thermo Scientific 的技术人员告诉学霸君,还是建议用户在不使用时,最好将移液器调至最大量程。
还有咱们熟悉的移液器品牌瑞宁(Rainin),它家的技术人员同样是建议调回最大量程,因为里面的弹簧在一直被压缩的状态,是会影响准确性的。
除此之外,还有一个必须要调回最大量程的,是我们熟悉的国产扛把子——大龙,这条规定是直接写进说明书的。
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图源:大龙官网
省流版:
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如果是出于实验室标准化操作(避免更多失误),那使用完毕调回最大量程无可厚非,如果是出于延长移液器使用寿命,则根据不同移液器有不同的要求。
比纠结「调回最大量程」更重要的事!
不过在学霸君对各品牌移液器进行一番狠狠科研后发现,所有品牌的说明书都不约而同地强调了一条至关重要的规则:
——不使用时一定要垂直放置!!!
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垂直放置一来是使误吸的液体可以在重力作用下流出,避免腐蚀枪体内部,而且如果不垂直放置,移液器的活塞可能会松动甚至脱离,影响精度。
同时,对移液器精准度影响更大的因素是,定期校准,建议至少每半年安排一次。
总之善待移液器,它好,我们才能好。
参考资料:
1.https://www.gilsoncn.com/guide-to-pipeting
2.https://www.hawachlab.com/news/pipette-adjust-to-maximum/#:~:text=Because%20the%20spring%20in%20the,lose%20its%20ability%20to%20rebound.
3.https://www.reddit.com/r/labrats/comments/1izi5lf/how_to_fix_overtwisted_eppendorf_research_plus/
4.https://www.researchgate.net/post/Is_it_necessary_to_reset_micropipettes_to_their_maximum_volume
5.https://www.eppendorf.com/product-media/doc/en/327080/Eppendorf_Liquid-Handling_Adjustment_Research-plus_Factory-Adjustment_Eppendorf-Research-plus-Factory-Adjustment
6.https://www.dlabsci.cn/index.htm
题图来源:图虫创意
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