【无菌附录第七十八条】建立有效的洁净区静态与动态环境监测体系

无菌附录条款：

第七十八条洁净区级别确认是洁净区确认的一部分。洁净区的级别确认时应当分别测量≥0.5μm和≥5μm的颗粒的总数。测试需要在“静态”和“动态”操作环境中进行。级别确认活动应当避免对工艺或产品质量造成任何影响。初始级别确认建议在模拟操作期间进行，重新级别确认建议在模拟操作期间或无菌工艺模拟试验期间进行。

洁净区确认的核心：动静结合，双粒径监控。 遵循GMP第七十八条，洁净区级别确认需在静态（设施空载）与动态（模拟/实际生产）状态下，同步测量≥0.5μm（系统性能指标）和≥5μm（污染风险指标）悬浮粒子浓度。此要求是评估环境控制有效性和建立科学监测标准的基础。下面北京中邦兴业小编，跟大家详细分享一下相关条款的解读。

核心概念：动态 vs 静态

1. 静态：

定义：设备已安装完毕并按用户和供应商同意的方式运行，但现场没有操作人员。

目的：评估洁净室本身在“空载”状态下达到设计洁净级别的能力（HVAC系统性能、建筑密封性等）。是级别确认的基础。

要求：所有洁净级别（A, B, C, D）都必须进行静态测试以满足相应级别的标准。

2. 动态：

定义：设施/设备以规定的操作模式运行，并且有规定数量的人员在场并以规定的方式进行操作的状态。模拟或实际生产正在进行。

目的：评估在实际生产条件下（人员活动、设备运行、物料流动等干扰因素存在时）环境维持可接受状态的能力。反映实际运行风险。

要求：

A级 & B级：必须进行动态监测以满足其严格标准。

C级：通常也建议进行动态监测（虽然法规可能未像AB级那样强制要求所有点位，但基于风险通常需要）。

D级：法规不规定统一的动态粒子限度标准（“不作统一规定”）。但这绝不等于不需要做动态监测（“不作规定≠不用做”）。企业必须根据风险评估和日常监测数据自行确定其动态可接受标准。

关键要求解读与操作要点：

1. 级别确认（Qualification）：

颗粒物要求：必须测量 ≥0.5μm 和 ≥5μm 的悬浮粒子总数。

状态要求：必须在 静态 和 动态 两种状态下进行测试。

避免影响：确认活动本身不能对产品或工艺造成污染风险。

时机：

初始确认：推荐在模拟操作期间进行（如培养基灌装前/期间）。

再确认：推荐在模拟操作期间或无菌工艺模拟试验（培养基灌装）期间进行。这能更真实反映生产状态下的环境表现。

2. ≥5μm 颗粒物的作用：

如果有充分的CCS（污染控制策略）依据或历史趋势数据支持，可以将 ≥5μm 颗粒物水平作为洁净区分级的参考标准之一。它通常与微生物污染风险关联性更强。

3. D级动态限度的制定（核心难点）：

法规现状：无全国/全球统一强制标准（“不作统一规定”）。

企业责任：必须自行制定科学合理的动态标准。依据是：

风险评估：基于生产工艺、产品特性、暴露风险等进行。

历史数据：持续日常监测积累的数据是制定和修订标准的基础。

不作规定≠不用做”：必须进行D级动态监测！目的是收集数据、评估风险、建立标准、持续监控。

制定D级动态标准的策略：

监测点位评估：基于工艺风险评估确定哪些D级区域/点位需要监测以及监测频率。高风险区域优先且标准更严。例如：

高风险：产品直接暴露、粒子可能进入产品且后续工序无法去除的区域（如配料、敞口容器转运）。标准应从保护产品的需求反推。

中/低风险：非产品暴露区、有后续去除步骤的区域。标准可相对宽松。

首次确认：对于A/B级，在没有历史数据和明确CCS要求的情况下，首次确认主要是**测试并记录数据（≥0.5μm & ≥5μm），无需立即设定严格的动态“通过/失败”评价标准（但需满足GMP附录1静态标准）。这些数据作为后续分析的基线。

日常环境监测：

持续收集数据：制定详细的监测计划（日期、房间、点位、项目 - 粒子、微生物、压差、温湿度等）。

计划性：“当天无动态生产就不要安排（动态监测）计划” - 动态监测只在有生产活动时进行。

CCS分析：

将环境监测数据（特别是粒子、微生物）与CCS的其他要素（如：微生物限度检测结果/OOS/OOT、产品外观检查结果/OOS/OOT、无菌检查结果、清洁验证数据、人员监测数据、设备故障记录等）关联分析。

判断环境监测数据是否预示或关联了实际的污染风险（如：粒子数升高时微生物是否超标？特定点位微生物超标是否与产品染菌相关？）。

分析是否发现了潜在的上市后风险。

制定标准：

基于积累的历史监测数据。

重点分析粒子监测数据与CCS识别的实际风险（如微生物污染、产品不合格）之间是否存在相关性。

如果发现显著相关性：

例如：当 ≥5μm 粒子数超过某个水平时，微生物超标风险显著增加，或产品不合格率上升。

则应根据这些历史数据和风险关联性，科学地（如使用统计方法）制定该点位的动态粒子限度标准（警戒限、行动限、法定限）。这个标准应能有效控制识别的风险。

标准是动态的：随着数据积累、工艺变更、CCS优化，标准应定期回顾和修订。

动态与静态监测的意义

• 静态（At Rest）：
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• 验证“硬件”能力：主要验证洁净室基础设施（建筑密封性）、空调净化系统（HVAC）在安装完毕、设备运行但无人员操作状态下，是否能达到设计的洁净度级别（如ISO 5/A级）。这是洁净区基础性能的证明。
• ≥0.5μm 是重点：静态下≥5μm颗粒通常很少，重点在于确认HVAC系统对基础粒径（≥0.5μm）颗粒的控制能力是否达标。
• 动态（Operational/In Operation）：
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• 验证“软件”控制：模拟或实际生产过程中，评估在人员活动、设备运行、物料流动等干扰因素存在时，环境维持可接受状态的能力。这反映了实际运行控制水平污染控制策略（CCS）的有效性。
• ≥5μm 更具风险指示性：动态下≥5μm颗粒的数量更能敏感地反映人员操作、设备运行、物料处理等引入的污染风险，是评估动态环境微生物污染潜在风险工艺控制稳健性的关键指标。这也是为什么在制定动态标准（尤其是D级）时，风险评估要重点考虑≥5μm颗粒与工艺/产品风险的关系。

采样点选择与采样量

• 基于风险评估：采样点的位置和数量应基于房间布局、气流模式、关键操作位置、人员活动频率、设备复杂性、产品暴露程度等进行风险评估后确定。关键区域（如A级送风下方、灌装点、物料暴露点）和高风险区域是重点。
• 采样量要求：为了获得具有统计学意义的结果，特别是对于≥5μm颗粒（因其在洁净空气中浓度可能很低），每个采样点的单次采样空气量必须足够大。ISO 14644-1规定了根据洁净度级别所需的最小采样量（Vs）。例如：
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• 确认A级（ISO 5）：≥5μm粒子采样量要求非常大（通常需要长时间采样或大流量采样器），以确保即使浓度很低也能检测到（或确认低于限值）。
• 关键点：采样量不足可能导致≥5μm颗粒“假阴性”（未测到不代表不存在），无法真实反映环境状况。这是执行第七十八条时容易被忽视的技术细节。

设备与方法

• 离散粒子计数器（DPC）：必须使用校准合格的、能同时或分别计数≥0.5μm和≥5.0μm颗粒的光散射离散粒子计数器。
• 校准与合规：粒子计数器需定期（通常每年）由有资质的机构按照相关标准（如ISO 21501-4, JIS B 9921）进行校准，确保其测量精度和准确性。日常使用前可能需要进行自检（如使用标称粒径的粒子挑战）。
• 等动力采样头：在单向流（A级）区域采样时，应使用等动力采样头，确保采样气流速度与主气流速度匹配，避免采样误差。
• 洁净室悬浮颗粒物监测：各类型激光尘埃粒子计数器的功能与选择

数据记录与报告

• 详尽记录：必须详细记录采样日期、时间、地点（房间、具体点位坐标）、采样状态（静态/动态）、采样设备型号及编号、采样流量、采样时长、采样量、各粒径（≥0.5μm, ≥5.0μm）的粒子浓度（个/m³）、环境条件（温湿度、压差）等。
• 结果计算与判定：根据ISO 14644-1规定的方法计算每个采样点的平均浓度，并与相应洁净级别的限值进行比较。需要明确记录每个点是否合格。
• 分级报告：级别确认报告应清晰说明洁净区（或房间内不同区域）最终被确认达到的级别（A/B/C/D），该结论基于所有采样点≥0.5μm和≥5.0μm颗粒的静态和动态测试结果（均需满足限值要求）。

与污染控制策略（CCS）的关联

• 颗粒数据是CCS基石：≥0.5μm和≥5μm颗粒的监测数据是CCS的核心要素之一，为评估环境受控状态提供客观证据。
• 风险信号：≥5μm颗粒的动态数据异常升高（即使未超标），应视为潜在的风险信号，触发调查，并可能需要评估其对微生物监测结果、产品无菌/微粒污染风险的影响。这也是第七十八条强调“根据风险评估和日常监测的数据确定动态限度”以及将≥5μm颗粒作为CCS或历史数据依据进行分级参考的原因。
• 持续改进：长期监测这两个粒径的颗粒数据（尤其是动态数据），结合微生物监测、人员监测、压差、温湿度等数据，是评估CCS有效性持续改进环境控制措施的重要依据。

总结：

动静皆需：级别确认和有效监控必须包含静态和动态。

粒子双测：≥0.5μm 和 ≥5μm 粒子是基本要求。

D级动态是重点难点：法规不统一规定，但企业必须做、必须管、必须定标。

风险是核心：D级动态监测的点位选择、频率设定、标准制定完全基于工艺风险评估。

数据是基础：首次确认收集基线数据，日常监测持续积累数据。

CCS是纽带：环境监测数据必须与CCS的其他风险控制措施和结果（微生物、产品检验OOS/OOT等）关联分析，才能证明其价值并制定有意义的动态标准。

标准源于关联：D级动态粒子标准（尤其是≥5μm）的制定，应基于历史数据与CCS中识别的实际污染风险之间的相关性分析。

遵循“基于风险、数据驱动、关联CCS”的原则，企业就能有效地建立和执行符合法规要求且能真正保障产品质量的洁净区动态环境监测体系。