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GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是细胞糖酵解途径中的一个关键酶。长期以来,它因其在大多数细胞和组织中相对恒定且高水平的表达而被广泛用作内参基因/蛋白。
GAPDH经典应用:作为内参基因/蛋白
在基因表达研究(如RT-qPCR, Northern blot)和蛋白质水平研究(如Western blot, 免疫组化)中,需要将目标基因/蛋白的信号标准化,以消除上样量、实验操作等因素造成的差异。GAPDH因其普遍且相对稳定的表达,常被选作内参。它使得不同样本间的比较成为可能,是分子生物学实验设计的关键环节。
注意:尽管常用,但GAPDH的表达在某些特定条件下(如某些疾病状态、细胞应激、特定细胞类型或处理)也可能发生变化。因此,实验设计中需要验证其在特定模型下的稳定性,有时需结合其他内参使用。
GAPDH新兴研究热点:参与细胞过程调控
近日,福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心徐景升教授课题组在《Industrial Crops and Products》在线发表了题为“Molecular identification of sugarcane glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenases and their involvement in SCMV infection in sugarcane”的研究论文,揭示了甘蔗GAPDH调控自噬与活性氧爆发应答SCMV侵染的分子机制。
甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV)侵染导致甘蔗不同类型的GAPDH的差异表达和活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 爆发,GAPDH与ATG3相互作用抑制自噬,而ROS爆发则抑制GAPDH与ATG3的相互作用促进自噬,进而达到某种动态平衡而建立侵染。
GAPDH的应用已从经典的内参标准,扩展到作为理解多种基础细胞过程(凋亡、DNA修复、自噬、铁死亡、转录、运输等)的关键分子,并最终成为多种重大疾病(神经退行性疾病、癌症、感染、代谢病、心血管病) 治疗干预的潜在靶点。
其多功能性(“兼职”蛋白)既是研究的挑战,也蕴含着巨大的机遇。针对GAPDH不同功能的特异性调控策略的开发,是当前生物医学研究的前沿领域之一。
GAPDH产品展示
参考文献:
1.https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S092666902500771X?via%3Dihub
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