要想二氧化氯“四消”效果好，不能少了“活化”这一步！否则就是往水里丢钱 ▏陈昌福专栏

文/华中农业大学陈昌福，武汉科研时代生物技术有限公司 周鑫军

正文/6088字

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陈昌福有话说

为了采用二氧化氯（ClO2）作为水产养殖用消毒剂，能获得更好的效果，本文在简要地介绍不同剂型ClO2制剂特点的基础上，采用不同水质水作为活化ClO2制剂用水，利用杀菌实验方法，评价了活化ClO2制剂溶液对嗜水气单胞菌和养殖池水中可培养细菌的杀菌功效。

结果初步证实了采用蒸馏水作为ClO2制剂活化水，可以避免采用养殖池水中有机物对ClO2的消耗，确保ClO2制剂消毒杀菌功效。但是，在水产养殖过程中使用ClO2制剂消毒时，要采用蒸馏水作为ClO2制剂的活化用水，是存在现实困难的。而就近取养殖池水活化ClO2制剂，对活化ClO2制剂的杀菌消毒功效并不存在显著的影响。

不同水质水活化二氧化氯

制剂对杀菌功效的影响

摘要：本文报告了采用蒸馏水、自来水和养殖池塘水等三种不同水质的水活化二氧化氯（ClO2）制剂后，利用杀菌实验方法比较了活化后ClO2制剂溶液，对嗜水气单胞菌（

Aeromonas hydrophila

关键词：二氧化氯（ClO2）制剂；消毒剂；功效性实验；可培养细菌；杀菌作用

二氧化氯（chlorine dioxide，ClO2）作为一种优质消毒剂，已经通过了世界卫生组织（world health organization，WHO）和联合国粮食农业机构（food and agriculture organization，FAO），以及由这两家机构组成的食品添加物专家委员会（the Joint FAO/WHO expert committee on food additives，JECFA）对其安全性进行的评估。利用实验动物每日允许摄入量（acceptable daily intake，ADI）判定ClO2安全等级为AⅠ级消毒剂，是现有消毒剂中唯一获此认证者。WHO、美国环境保护署（Environmental Protection Agency，EPA）和中国卫生部等，公认ClO2为新时代绿色消毒剂，具有无三致（无致癌、无致畸、无致突变性），有三效（多效、高效、速效）和除臭、保鲜、除藻、漂白的多种奇特功能，ClO2现已编入多国的卫生法规在进行推广使用。

将ClO2制剂用作我国水产养殖业消毒剂的研究与应用，至今已经有了几十年的历史。在2004年在农业农村部对我国水产用兽药地方标准，进行清理后上升为国家标准的过程中，一度将ClO2制剂纳入水产用兽药管理范畴。但是，因为ClO2制剂的制售企业始终不能提交能够准确检测ClO2的化学反应（chemical reactions）过程中，能稳定地检测ClO2生发量的方法，不能满足农业农村部对兽药提出的“质量可控，安全有效”的基本要求。根据中华人民共和国农业部于2012年4月17日发布的第1759号公告，将ClO2制剂作为水产用兽药的检测标准废止。农业农村部在当时发布的公告中给出的废止该质量标准的理由是：“鉴于不同企业该类产品的处方和剂型、活化所需酸的比例、反应时间等均不一致，试行质量标准中一步碘量法也无法控制产品中二氧化氯的含量，废止二氧化氯制剂的相关兽药试行标准。”

因为将ClO2制剂作为水产养殖用消毒剂，的确是具有其他种类的消毒剂难以比拟的众多优点之缘故，虽然ClO2制剂作为水产用兽药质量标准被农业农村部废止，但十多年来，ClO2制剂仍然以“非药品”、“水质调节用品”等各种“角色”，一直在我国的水产养殖业被大量地使用着。

在我国水产养殖业使用的ClO2制剂有三种剂型：一是水剂、二是粉剂，三是片剂。在水产养殖业中使用ClO2水剂，虽然具有使用方便的优点，但是因为水剂中ClO2含量比较低，运输费用高，还存在比较严重的安全性问题。现在我国水产用投入品市场上，已经很少见到ClO2水剂产品。

常见的ClO2粉剂又分为一元和二元包装的两种剂型。无论的一元还是二元包装的ClO2粉剂，在使用之前均需要在使用现场生发出ClO2后，再用于水产养殖业中“四消（池塘消毒、苗种消毒、饵料消毒和养殖工具消毒）”过程。ClO2粉剂在活化生发ClO2气体时，会对操作者的呼吸系统造成的不同程度刺激，导致操作者感受到身体的不适。

也许是为了避免ClO2粉剂在生发ClO2的过程中，所产生ClO2气体对操作者呼吸系统产生的刺激，一些ClO2制剂的生产企业将其制备成ClO2泡腾片，旨在便于水产养殖业者将ClO2泡腾片直接抛撒在水产养殖池塘中。直接抛撒ClO2泡腾片不仅可以避免在活化过程中，产生的ClO2气体对操作者呼吸系统造成的刺激，而且还可以降低使用者的劳动强度。

然而，水产养殖业者购买ClO2制剂的唯一目的，就是为了将其作为消毒剂，能完成在水产养殖管理过程中的“四消”功效。因此，如何使用ClO2制剂才能获得在水产养殖过程中得到“四消”的最佳功效？我们的实验结果已经证明，采用直接向水产养殖池塘中抛撒ClO2泡腾片，是不可能实现“四消”的目的的（有兴趣的读者可参阅2025年05月03日，农财宝典大国渔业微信公众号上题为“"一文）。

水产养殖业者在使用ClO2粉剂或者泡腾片作为消毒剂时，均需要首先用少量水活化ClO2制剂生发除足量ClO2气体，再将含有ClO2气体的水溶液泼洒到养殖水体中实施消毒。作为活化ClO2制剂水体的水质状况对活化效果是否存在影响？至今尚无明确的结论。

本实验是分别采用蒸馏水、自来水和养殖池塘水，在可以封闭的塑料瓶中将某公司生产的ClO2制剂活化后，检测了对水产养殖动物致病性细菌的杀菌效果。先将实验结果报告如下。

1.材料与方法

1.1供试ClO2制剂

用于本实验的ClO2制剂，从武汉市新洲区水产养殖投入品市场上随机采购，由某企业生产的ClO2制剂。生产批号为20250208（从生产到使用时间间隔为3个月內）。

1.2供试水生动物致病菌与池水中可培养细菌的来源与培养

嗜水气单胞菌（

Aeromonas hydrophila

1.3活化ClO2制剂的用水

本实验中采用蒸馏水、自来水和由武汉市新洲区某养殖场的黄颡鱼养殖池中采集的池水，分别作为ClO2制剂活化用水。

1.4盛装池水容器及ClO2制剂活化

采用容量500.0mL的塑料瓶作为活化的ClO2制剂容器。分别在每个洁净的塑料瓶中盛装400.0mL的蒸馏水、自来水和养殖池水。在室温23℃的条件下，向每个塑料瓶中放入精准称量的ClO2制剂20.0g后，拧紧塑料瓶盖并轻摇塑料瓶，使ClO2制剂均匀地溶解在水体中，静置15min。

1.5 ClO2制剂的杀菌效果检测

在超净工作台内无菌条件下，向每个玻璃烧杯中添加1.0mL浓度为108cfu/mL的嗜水气单胞菌活菌液后，轻摇玻璃烧杯使菌体在水体中分布均匀。将盛装ClO2制剂水溶液的塑料瓶移置于超净工作台內，从其中量取一定剂量分别添加在盛有经过高压消毒后的添加有嗜水气单胞菌活菌养殖池水的玻璃烧杯中，以及未经过高压灭菌养殖池水的玻璃烧杯中，使不同烧杯中的ClO2制剂溶液浓度分别达到0.0mg/L（对照组）、1.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L和20.0mg/L。

放置40分钟后。从每个玻璃烧杯的水体中定量吸取50.0µL，均匀地涂布在盛有BHIA的培养皿中，最后将接种后的培养皿置于28℃恒温培养箱中，连续培养24h后，取出经肉眼观察证实培养皿中无细菌生长的最低药物浓度，即为ClO2制剂溶液对水生动物致病菌和养殖水体中可培养细菌的最小杀菌浓度（minimum bactericidal concentration，MBC）。

2.结果

2.1对嗜水气单胞菌的杀菌功效

将某企业生产的ClO2制剂，采用蒸馏水、自来水和养殖池塘水等不同水质的水活化后，对嗜水气单胞菌的杀菌活性见图1。由图1所示结果可以看出，当ClO2制剂浓度达到1.0mg/L时，与未用ClO2制剂的对照组相比，已经显示出一定的杀菌效果。随着ClO2制剂浓度的逐渐升高，杀菌效果越来越明显，当ClO2制剂浓度达到20.0mg/L时，培养皿中已经未见菌落出现，说明该浓度ClO2制剂已经将供试嗜水气单胞菌彻底杀灭了。但是，用三种水质水活化的ClO2制剂，则未显示出显著的差异。

图1 不同水质水活化ClO2制剂对嗜水气单胞菌杀菌功效实验比较

2.2对养殖池水中可培养细菌的杀菌功效

将ClO2制剂采用不同水质的水活化后，对养殖池水中可培养细菌的杀菌活性见图2。由图2所示结果可以看出，当ClO2制剂浓度为1.0mg/L范围内，ClO2制剂未显示出对养殖池水中可培养细菌的杀菌功效，当ClO2制剂浓度达到5.0mg/L时，用蒸馏水活化的实验组已经显示出一定的杀菌效果，用自来水和池塘水活化的实验组尚未显示出杀菌效果。随着ClO2制剂浓度的逐渐升高，杀菌功效越来越明显，当ClO2制剂浓度达到20.0mg/L时，培养皿中只出现少量可培养细菌的菌落了。

图2 不同水质水活化ClO2制剂对养殖池水中可培养细菌的杀菌功效实验比较

2.3对供试培养皿中菌落数量计数

将各个培养皿拍照后，采用计数APP将培养皿中嗜水气单胞菌菌落数量统计出来，对菌落数量统计结果见表1。由表1所示对嗜水气单胞菌经ClO2制剂杀灭后培养出来的细菌数据表明，随着ClO2制剂浓度增加，培养皿中的菌落数量出现明显减少的趋势。但是，不同水质的水对活化ClO2制剂溶液杀菌功效的影响并不显著。

表1 不同水质水活化ClO2制剂对嗜水气单胞菌杀灭后活菌菌落统计（个）

由表2所示不同活化水对ClO2制剂对养殖池水中可培养细菌杀灭效果影响实验结果证明，培养养殖池水中可培养细菌经不同浓度ClO2制剂溶液，完成杀灭处理后能培养出来的细菌菌落数量表明，随着ClO2制剂浓度的增加，培养皿中的菌落数量出现了减少的趋势。对未经高压灭菌的池塘水消毒时，用三种水质水活化的ClO2制剂，在5.0mg/L都未显示出显著的杀菌功效差异，在10.0mg/L和20.0mg/L浓度时，使用蒸馏水活化的实验组显示出更好的杀菌效果。

表2 不同水质水活化ClO2制剂对养殖池水中可培养细菌杀灭后活菌菌落统计（个）

注：“*”标示菌落数量过多，无法计数。

3.讨论

众所周知，在市场上购买的无论是ClO2粉剂或ClO2泡腾片，实际上都只是ClO2生发剂，都需要在一定条件下经过化学反应的活化过程，才能生发出具有消毒杀菌功效的ClO2气体。

本实验中采用不同水质的水作为活化ClO2制剂的用水，对活化ClO2制剂后生发出含有ClO2溶液，采用杀菌实验的方法，比较了不同水质水作为活化ClO2制剂的用水，对活化后ClO2制剂溶液杀菌功效的影响。

利用活化后ClO2制剂溶液，对养殖池水中可培养细菌的杀菌效果，在活化ClO2制剂溶液的浓度达到20.0mg/L时，杀菌功效显示出了一定差异。这种差异是否意味着采用蒸馏水活化ClO2制剂时，因为避免了养殖水体中存在的不同程度的有机物，消耗了ClO2制剂溶液存在的ClO2的缘故？尚值得进一步实验验证。

不过，水产养殖业者在利用ClO2制剂实施水产养殖过程中的“四消”措施时，要采用蒸馏水活化ClO2制剂后，再实施在养殖水体中的“四消”措施，的确是存在现实困难的，也就是难以做到的，而直接采取少量研制池水完成ClO2制剂活化过程，不仅方便，而且对活化后ClO2制剂溶液的杀菌消毒功效，没有显著的影响。

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作者：华中农业大学陈昌福；武汉科研时代生物技术有限公司周鑫军。

编辑：郑燕云

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