一、噬菌体污染的判断依据
发酵过程异常表现
初期阶段:发酵周期略有延长(正常为2-3小时,污染后需5小时以上),酸度变化不显著,但镜检可见保加利亚乳杆菌形态变细、首尾相连呈线条状(正常为粗短棒状)。
中期阶段:酸度停滞(如酸度仅达70°T后不再上升)、产酸能力下降,酸奶质地稀薄、风味变差(甜味明显且缺乏酸乳特有香味),发酵液黏稠度增加并伴随泡沫。
严重阶段:菌体裂解导致发酵液变清,OD值骤降,pH显著上升,糖耗停滞,甚至完全无法凝固。
2.检测方法
快速镜检:通过美蓝染色观察菌体形态变化(如杆菌断裂或消失)。
噬菌斑法:双层琼脂平板培养后观察透明噬菌斑。
分子检测:PCR技术或荧光定量RT-PCR检测噬菌体核酸。
环境监控:定期对车间空气、设备表面等取样检测噬菌体含量。
二、噬菌体污染的防治措施
1.预防措施
菌种管理:
避免使用溶源性菌株,定期轮换不同遗传特性的菌种以减少噬菌体适应性。
使用直投式发酵剂后需严格处理菌种包装,防止残留活菌成为噬菌体宿主。
环境控制:
车间每日用漂白水、二氧化氯等交替消毒,地沟保持清洁无积水,空调系统定期使用过氧化氢气体全面消杀。
设备与管道彻底清洁(如清除生物膜),物料管道采用干雾过氧化氢熏蒸。
操作规范:
发酵尾气需处理并排放至远离车间的下风口,取样时使用碱液容器承接废液防止活菌扩散。
2.污染后处理
发酵液处理:
若感染时间<20小时,可加热至70℃维持10分钟灭活噬菌体后补种;若>20小时,直接高温灭菌(120℃/30分钟)后废弃。
设备消杀:
发酵罐及配套系统需经碱水(4%浓度、100℃/4小时)、消毒剂(如含氯2000 mg/L)多步骤处理,空气过滤器需高温蒸汽灭菌。
高效消毒剂:
含氯消毒剂(2000 mg/L)可有效清除噬菌体核酸,但需注意腐蚀性及人员防护。
过氧化氢气体消毒技术(如润联方案)可无死角覆盖车间,穿透空调系统杀灭隐匿噬菌体。
三、综合建议
噬菌体污染需以预防为主,结合实时监控与多维度消杀。企业可参考以下优先级:
1.建立菌种轮换与环境消毒的标准化流程。
2.采用分子检测技术实现早期预警。
3.引入专业消杀服务(如润联生命科学的全车间过氧化氢消毒方案)应对顽固污染。
润联常温发酵灭菌技术能在常温条件下对发酵液灭菌,有效杀灭噬菌体和其他微生物,同时保持发酵液的营养成分和生物活性,降低噬菌体污染风险,提高酸奶生产效率和经济效益。
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