中药1区: 北京中医药大学揭示黄连解毒汤通过血脑屏障抑制MCAO大鼠CD4+T细胞浸润中枢神经系统

疾病现状与治疗挑战
缺血性卒中是全球第二大死因和第三大致残病因，每年导致约550万人死亡和1370万人残疾。其核心机制为脑部血管内血栓形成引发的血流中断。尽管溶栓治疗和机械取栓术是当前主流疗法，但仍受限于出血风险和缺血-再灌注损伤，患者预后改善面临重大挑战。因此，开发新型治疗策略以调节神经炎症反应成为关键方向。

免疫炎症级联的中枢作用
中风后，血脑屏障（BBB）完整性被破坏，外周免疫细胞得以浸润脑组织并触发级联式神经炎症反应。CD4+ T细胞作为适应性免疫的核心介质，在此过程中呈现双重功能：Th1和Th17亚型通过分泌促炎因子（如IFN-γ、IL-17）加重脑损伤，而Th2亚型则通过抗炎因子（如IL-4、IL-10）发挥保护作用。研究显示，调控Th细胞亚型的平衡可成为改善预后的潜在靶点。

T细胞浸润血脑屏障的分子机制
急性缺血性卒中发生后，T细胞于24小时内穿透BBB，3天达峰值并持续至一个月。这一过程依赖内皮细胞介导的多步骤跨膜迁移：首先通过整合素（如LFA-1/ICAM-1）实现黏附，随后以旁细胞或跨细胞途径穿越BBB。值得注意的是，Wnt/β-catenin信号通路通过维持内皮细胞间紧密连接发挥屏障保护作用，其失活与BBB破坏及神经炎症加剧密切相关。恢复该通路功能可减少免疫细胞浸润。

黄连解毒汤的神经保护机制
传统中药黄连解毒汤源自唐代《外台秘要》，由黄连、黄芩、黄柏、栀子四味药组方（比例3:2:2:3），具有清热解毒的功效。现代研究表明，黄连解毒汤及其活性成分（如黄芩苷、栀子苷）可通过多靶点通路发挥抗炎和神经保护作用。实验显示，黄连解毒汤能显著减少脑梗死体积，并抑制BBB破坏介导的炎症因子释放。此外，网络药理学分析揭示其通过调节PI3K/AKT、MAPK等通路干预缺血损伤。然而，黄连解毒汤如何通过调控外周免疫-中枢交互作用抑制T细胞浸润仍需深入探索。

近日，北京中医药大学终身教授王庆国团队在Phytomedicine期刊上发表文章《Huang-Lian-Jie-Du Decoction inhibits CD4+ T cell infiltration into CNS in MCAO rats by regulating BBB》，阐明黄连解毒汤通过修复BBB完整性、阻断T细胞跨膜迁移及平衡Th细胞亚型反应的治疗机制。

采用局灶性MCAO再灌注模型，通过以下指标评价黄连解毒汤的作用：

神经功能评估：Zea Longa评分和Garcia评分；

梗死体积测定：2,3,5-三苯基四氮唑（TTC）染色；

病理学分析：苏木精-伊红（HE）染色和尼氏体（Nissl）染色。

通过以下技术评估免疫炎症反应：

细胞因子水平：酶联免疫吸附试验（ELISA）；

T淋巴细胞分布：流式细胞术；

CD4+ T细胞浸润：免疫荧光染色。

通过以下方法研究T细胞黏附机制：

LFA-1/ICAM-1相互作用：ELISA和免疫荧光；

BBB完整性：伊文思蓝染色和透射电镜；

T细胞跨膜迁移机制：透射电镜和蛋白质印迹法（WB）。

此外，通过WB检测HLJDT对Wnt/β-连环蛋白通路的影响。

研究结果显示，黄连解毒汤显著改善神经功能评分，减少梗死体积，并减轻病理损伤；

黄连解毒汤通过抑制促炎因子（如IFN-γ、IL-17）和增强抗炎因子（如IL-4、IL-10），平衡CD4+ T细胞亚型反应，减少其中枢神经系统浸润；HLJDT通过抑制LFA-1/ICAM-1介导的细胞黏附，阻断T细胞跨BBB迁移；黄连解毒汤通过修复BBB的旁细胞和跨细胞结构（透射电镜证实），其作用依赖于Wnt/β-连环蛋白信号通路的激活（WB验证）。

总之，本研究首次创新性地证明黄连解毒汤可通过双重机制发挥神经保护作用：免疫调节：抑制LFA-1/ICAM-1介导的外周免疫细胞黏附；BBB修复：通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路，增强BBB的旁细胞和跨细胞屏障功能，从而减少CD4+ T细胞浸润；综合保护：结合抗炎、修复血脑屏障和调节免疫平衡的多靶点效应，为MCAO大鼠提供全面保护。

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0944711325002478#fig0010

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