动物模型构建与评估丨大鼠坐骨神经慢性压迫损伤模型

《动物模型构建与行为学评估》电子版pdf，网盘发货

《动物模型构建与行为学评估》V1.0共计约540页， 主要围绕生物医学领域中动物实验的核心方法，详细介绍了如何通过构建动物模型来研究疾病机理，并且使用行为学评估手段验证这些模型的有效性。书中的内容适用于研究人员在进行神经科学、药理学、生物医学等领域的实验时，理解和运用动物模型这一重要工具。

大鼠坐骨神经慢性压迫损伤（chronic constriction injury，CCI）模型是一种在神经病理性疼痛研究中广泛应用的动物模型。它主要是通过对大鼠坐骨神经进行一定程度的慢性压迫，模拟人类因神经受压而产生的神经病理性疼痛状态。用于研究神经病理性疼痛的发病机制。该模型的大鼠会出现机械痛觉过敏、热痛觉过敏和自发痛等多种疼痛行为表现。机械痛觉过敏使得大鼠对正常情况下不会引起疼痛的轻微机械刺激（如轻轻触碰）产生疼痛反应；热痛觉过敏表现为对热刺激的反应增强，即更快速地躲避热刺激；自发痛行为则是大鼠在没有外界刺激时，会出现如舔舐、抬起受伤后肢等行为，这和人类神经病理性疼痛患者所经历的疼痛感受类似。

CCI模型：

腹腔注射麻醉大鼠，左后肢消毒，股外侧纵行切开皮肤，分离肌肉，暴露坐骨神经，游离接近神经分叉前的神经，使用4~0线结扎3处，间隔距离为1mm，神经结扎力度以见到肢体轻微抽动为宜。注意结扎的力度要适中，太紧可能会导致神经完全切断，太松则无法产生有效的压迫损伤。手术完成后，用生理盐水冲洗伤口，缝合肌肉和皮肤，然后将大鼠放置在温暖、安静的环境中等待其苏醒。术后见大鼠左后肢步态不稳，足趾卷曲，行走时足部边缘着地、跛行，提示模型建立成功。

行为学评估：

机械痛觉过敏评估（von-Frey测试）

通过使用不同强度的von-Frey纤维丝刺激大鼠后肢足底，来测量大鼠对机械刺激的疼痛阈值。正常大鼠对一定强度范围内的机械刺激有正常的反应，而坐骨神经慢性压迫损伤后，大鼠会出现机械痛觉过敏，即对正常情况下不会引起疼痛的轻微机械刺激也产生疼痛反应。将大鼠放置在金属网筛上，使其适应环境一段时间（约15-30分钟）。然后使用一套已知强度的von-Frey纤维丝（强度范围从0.4g到15g），从最弱的纤维丝开始，垂直刺激大鼠后肢足底中部，每次刺激持续时间约3-5秒，间隔5-10秒。当大鼠出现快速缩足反射时，记录此时纤维丝的强度，这个强度即为大鼠的机械痛阈值。在CCI模型大鼠中，机械痛阈值会明显降低，例如正常大鼠的机械痛阈值可能在10g左右，而CCI模型大鼠可能在2-4g。

热痛阈以热刺激缩足反射潜伏期（PWTL）反映大鼠热痛阈变化。分别于干预2、6、10、14d，将大鼠置于玻璃板上，用透明亚克力笼限制活动，下方置热辐射痛阈测量仪，移动测量仪，使光源对准大鼠足中部，出现缩足或舔足的反应时间记为PWLT。每足重复测试3次，间隔5min，取平均值。

热痛觉过敏评估

基于动物对热刺激的逃避反应来评估其痛觉感受。当大鼠后肢足底接触到热刺激时，如果疼痛感受增强，其会更快地抬起后肢以逃避热刺激。将热板温度设置在一定范围内（通常为50-55℃），把大鼠放置在热板上，记录从大鼠后肢接触热板到其抬起后肢的时间，这个时间称为热痛潜伏期。在CCI模型大鼠中，热痛潜伏期会显著缩短。正常大鼠的热痛潜伏期可能在10-15秒左右，而CCI模型大鼠可能在4-8秒。

自发痛行为观察

观察大鼠在没有外界刺激的情况下是否出现自发的疼痛相关行为，如舔舐、摇晃或抬起受伤的后肢等行为，这些行为可以反映大鼠的自发痛程度。将大鼠放置在透明的观察箱中，观察一段时间（如10-30分钟），记录大鼠自发出现上述疼痛相关行为的频率和持续时间。例如，正常大鼠很少会自发地舔舐后肢，而CCI模型大鼠可能会频繁地舔舐受伤的后肢，且每次舔舐的持续时间可能较长。

情绪行为

末次干预后2h，进行明暗箱实验。检测系统包括明暗箱和记录系统两部分，明暗箱分3个不透明室，A室、B室较大，为条件训练室；C室较小为中性室，位于A、B室前面，各室之间有门互通。明暗箱顶部装有记录系统，将大鼠放入明室，记录10min内的停留时间和穿梭次数。

参考文献

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