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斑马鱼昼夜节律测试是用来评估斑马鱼行为的昼夜节律变化，这些变化可能受到环境因素或化学物质的影响。斑马鱼的昼夜节律行为包括产卵、进食、运动活动、集群行为、对光暗的偏好以及垂直位置的偏好等。
在进行昼夜节律测试时，需要监测斑马鱼在不同时间段的行为模式，包括在光照和黑暗阶段的活动水平。斑马鱼昼夜节律测试是通过监测斑马鱼在不同光照条件下的行为模式来进行的。例如，斑马鱼在光照期间会选择更高的温度区域，而在黑暗期间则选择更低的温度区域。这种行为表明斑马鱼的体温偏好具有昼夜节律；在进行毒性测试时，可以评估化学物质如氯化锌对昼夜节律的影响。例如，通过比较氯化锌处理组和对照组斑马鱼的行为表现，可以了解化学物质对昼夜节律的潜在影响。此外，斑马鱼的昼夜节律行为测试也可以用来评估环境压力的影响。例如，研究发现，暴露于不同化学物质的斑马鱼表现出昼夜节律的紊乱，这表明昼夜节律可以作为环境压力评估的一个指标。总的来说，斑马鱼昼夜节律测试是一个重要的工具，它可以评估环境因素和化学物质对生物节律的影响。
昼夜节律测试的具体步骤：
斑马鱼被放置在一个特定的环境中，该环境可以模拟自然的昼夜周期，包括光照和黑暗阶段。实验通常在透明的水族箱中进行，以便观察鱼的行为。实验室中的光照周期通常被设置为与自然环境相似，例如12小时的光照后跟随12小时的黑暗，或者10小时的黑暗/14小时的光照，以模拟自然昼夜节律。使用红外摄像机或其他监测设备记录斑马鱼在不同时间段的行为。这些行为可能包括游泳模式、进食行为、社交互动等。通过分析斑马鱼在光照和黑暗期间的活动水平，可以确定其昼夜节律。可以评估不同因素对昼夜节律的影响，如温度、食物可用性或化学暴露。例如，氯化锌等化学物质的暴露可能会扰乱斑马鱼的昼夜节律行为。还可对斑马鱼进行长期监测，以评估昼夜节律的长期变化或慢性影响。
为了分析斑马鱼在日间和夜间的运动活力，进行了昼夜节律测试。为防止任何外部干扰，测试鱼被移入一个温度控制的孵化器中，并保持在28℃。使用一个特别设计的发光二极管(LED)灯箱，配备传统和红外LED阵列，作为底部光源。使用一个红外敏感的电荷耦合器件(ccd)进行视频录制，其检测窗口为700-1000纳米，最大分辨率为1920×1080像素，帧率为每秒30帧。每小时记录斑马鱼的运动活力（平均速度、平均角速度和曲折度）1分钟，并使用idTracker软件跟踪鱼的运动轨迹。
在进行了21天的暴露测试后，对斑马鱼进行了昼夜节律测试。
测试内容包括：(A) 药物处理组（绿线）和对照组鱼（黑线）在昼夜周期中的平均速度和(B) 曲折度。灰色区域表示黑暗期，未阴影区域表示光照期。在(C)白天和(D)夜晚周期中，对平均速度进行了定量比较。在(E)白天和(F)夜晚周期中，对平均角速度进行了定量比较。
参考文献：
Audira, G.; Sampurna, B.P.; Juniardi, S.; Liang, S.-T.; Lai, Y.-H.; Hsiao, C.-D. A simple setup to perform 3D locomotion tracking in zebrafish by using a single camera. Inventions 2018, 3, 11.
Steenbergen, P.J.; Richardson, M.K.; Champagne, D.L. Patterns of avoidance behaviours in the light/dark preference test in young juvenile zebrafish: A pharmacological study. Behav. Brain Res. 2011, 222, 15–25.
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