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动物模型构建与评估丨大鼠面瘫模型

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造模方法

所有SD大鼠采用质量分数10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后,右侧面部去毛,消毒,耳后纵切口,于腮腺后上缘暴露并分离面神经主干,在面神经主干近端一侧插入电极给予刺激,在其远侧端口插入电极,诱发面神经复合动作电位(CMAP),测定各组大鼠面神经损伤之前的面神经CMAP波幅后,用蚊式钳闭合三齿分别夹闭面神经主干6min、8min、10min、12min、14min,测定夹闭后面神经CMAP波幅,测定结束后缝合皮肤,即制成面瘫动物模型。术后隔日观察大鼠一般行为学状况。

观察指标

  • 大鼠面部一般行为学表现:

于术后麻醉恢复后隔日,观察大鼠面部运动情况。大鼠面部一般行为学指标主要包括瞬目反射、触须运动和鼻尖位置。瞬目反射的诱发方法:用5mL注射器18号针头距离鼠眼2cm处,向眼部吹入空气,观察大鼠眼睑活动及闭合情况,双侧无明显差异记0分,右侧较对侧闭合延迟记1分,右侧眼睑不能闭合记2分;计数30s内大鼠双侧的触须运动:双侧胡须运动无明显差异记0分,右侧胡须运动较对侧减弱记1分,右侧胡须运动消失记2分;观察大鼠鼻尖位置:0分为居中,1分鼻尖偏向对侧。将3项指标的评分相加进行面瘫的鉴定和评价:0~1分为无面瘫,2~3分为不完全面瘫,4~5分为完全性面瘫。

  • 大鼠面神经生物电:

分离出大鼠右侧面神经主干后,在面神经主干近端一侧插入电极给予刺激,在其远侧端口插入电极,诱发面神经CMAP,用BL-420S生物机能实验系统测定各组面神经损伤之前的CMAP波幅,测定结束后,分别用蚊式钳闭合三齿夹闭面神经主干6min、8min、10min、12min、14min,并测定夹闭损伤不同时间之后的CMAP波幅。

大鼠面部一般行为学指标

经过观察,大鼠面神经损伤之前,各组大鼠面部一般行为学评分为0,且各组间评分均无明显差异。造模6min、8min的模型组,行为学评分均未达到完全面瘫的评分标准,而造模10min、12min、14min大鼠行为学评分均达到完全面瘫评分标准,且与造模8min比较差异显著;造模12min、14min与造模10min比较行为学评分无明显差异。

造模6min,大鼠鼻尖无变化,胡须运动较对侧减弱;造模8min,大鼠鼻尖稍偏向对侧,胡须运动和眼睑闭合较对侧缓慢;造模10min、12min、14min,大鼠鼻尖偏向对侧,右侧眼睑不能闭合、胡须运动基本消失,判定为完全面瘫,经比较,造模10min、12min、14min组间动物行为学状况无明显差异。

Fig1造模不同时间大鼠面部表现

采用蚊式钳闭合三齿夹闭大鼠面神经主干6min、8min、10min、12min、14min,检测大鼠面神经CMAP波幅,确定用蚊式钳闭合三齿夹闭面神经主干10min为大鼠面瘫模型的优选制备方法。该方法简便易行,成功率高。

文献引用:

  • Mouse Model of Bellʼs Palsy Induced by Reactivation of Herpes Simplex Virus Type 1[J]. HIROTAKA TAKAHASHI;;YASUO HITSUMOTO;;NOBUMITSU HONDA;;NAOHITO HATO;;MUTSUHIKO MIZOBUCHI;;SHINGO MURAKAMI;;HISANOBU KISAKI;;HIROYUKI WAKISAKA;;KIYOFUMI GYO.JNEN: Journal of Neuropathology & Experimental Neurology,2001

  • 李瑶,高小莉,陈健康,等.面神经夹闭建立大鼠面瘫模型[J].实验动物与比较医学,2016,36(03):190-194.

  • 大鼠面神经压榨对面神经元CNTF表达的影响[J]. 刘悦;李培华;刘稳;神平;许学谷;孙光明;孙海清.山东大学耳鼻喉眼学报,2013(01)

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