教你正确使用移液枪，很多人第一步就弄错了

引言

移液枪是实验室中常用的精确测量和转移液体的工具，正确使用移液枪不仅关系到实验结果的准确性，还关系到实验人员的安全。因此，掌握移液枪的正确使用方法和注意事项至关重要。 您知道吗，如果只是简单地遵从接下来这些技巧，您移液的准确性和重复性将可能会得到5%的提高。

1.最优的量程范围

大多数移液器的正常操作体积范围是指示量程的（10-100）%。 尽管这一范围是可操作范围，但随着体积设定的下降性能参数将会发生变化。

100uL移液器的准确性参数在指示量程的50-100%的时为±0.8%。 然而如果你移取10μL(或者指示量程的10%)，不准确度将会提高3倍，或者为（2.5-3）%。

所以获得最佳性能的 最优量程范围是指示量程的35-100% 。尽量避免将一个移液器的体积设定少于最大体积的10%，而应该用小量程的移液器来进行小体积移液操作。

2.吸头浸入深度

正确的吸头浸入深度可以提高准确性高达5%，尤其对微量移液器相当重要。 对于微量移液器，吸头应该浸入（1-2）mm，而对于大量程的移液器，浸入深度应为（6-10）mm。

如果吸头浸入太深，吸头内部的空气就会被压缩，造成过多的液体被吸入。 残留在吸头表面的液体也可能会影响结果。

吸头如果浸入不够充分，那么可能会吸入空气，就会造成气泡的形成和移取体积不准。 两者都会造成不准确的移液体积，

3.正确的吸液角度

吸液时吸头尽可能以90度角浸入到样品中，最好不要偏离垂直位置超过20°对于微量体积的移液器，以垂直角度移取溶液可以提高2.5%的准确性。

偏离垂直超过20°吸液将会导致不准确的量取-过多的液体将会被吸入，造成移液不准确。 以60度角浸入，将会使你的液体吸取量超过所设定的0.7%。

4.保持一致性

保持一致的移液节奏和速度将会帮助你得到理想的、重复性更高的结果。 保持节奏和速度的一致性可以将准确性提高5%。

保持一致的样品分配、一致的样品排液

注意区分润洗吸头和不适合润洗的情况

润洗吸头2-3次可以在吸头内形成同质膜，这样可以提高0.2%的准确度性。

润洗可以中和微量移液中的毛细效应，对于大体积移液，这可以使吸头内部温度与样品温度一致。

当移取热的和冷的溶液时润洗会对结果产生不利影响，如从冰浴中移液或者溶液温度超过37摄氏度，润洗可能会造成高达5%的错误率。

5.避免温度变化

恒定的室温:移液和校准的理想温度是21.5℃±1℃。 避免在有风或者有阳光直射，温度变化较大的区域操作，这些区域可能会降低移液的精准度。

保证足够的平衡时间:除非另有其他要求，否则请保证足够的时间来使您的液体样品和移液器达到平衡温度。

手温效应长时间使用移液器，来自手的热量可能会加热移液器-导致移液器内部的空气受热膨胀从而会产生不准确的结果。

图 移液枪的使用方法

6.移液枪的校准方法

6.1.准备超纯水、万分之一天平(如果校正 0.5~2.5ul量程的，至少要十万分之的天平)、温湿度计、恒温室，还需准备一个小口容器，防止水分挥发。

6.2.按移液器总量程的 100%、50%、10%分别进行第三和第四步。

6.3.吸头要反复吸取超纯水三次后，吸取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复 10次。

6.4.将测量的数据用 ISO8655 中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取平均值。

6.5.根据三个测量点的偏差，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。

6.6.重复 3、4 步，直至偏差在 ISO8655 的要求内为止。

7.移液枪维护和保养

如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。

最好定期清洗移液枪，可以用肥皂水或60%的异丙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干。

高温消毒之前，要确保移液器能适应高温。

校准是可以在20-25度环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行

使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中，方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下 降。

结语

如今全自动仪器的推进，移液枪使用的频率越来越少了，习惯了机器自动加样，反而导致一部分人不会正确使用传统移液枪，但是移液枪在转移标本或者质控品的时候，又不能没有。本文详细介绍了移液过程中的如何提高精度，比如做BCA项目，润洗枪头和不润洗差距很大，看完本篇文章，你应该会了吧？

来源：洞见IVD

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编辑：笪文武 审校：陈雪礼