江西
弯曲菌培养检测试剂盒双孔滤膜法
作者：深圳市恒昊生物科技有限公司
弯曲菌培养检测试剂盒双孔滤膜法
（用于家禽、家畜泄殖腔内容物及粪便样本）
【产品名称】弯曲菌培养检测试剂盒（双孔滤膜法）
【包装规格】
双孔板滤膜检测培养基（10 套／盒，内径 60mm）；弯曲菌样本采集液（10*4ml／盒）；
弯曲菌样本稀释液（10*10ml／盒）；促生长增菌液（10*4ml／盒）
弯曲菌选择性滤膜（20 片／盒）
注：双孔板上盖如有部分水汽，属正常现象，不影响使用；
增菌液有些许红色沉淀，属正常现象，摇匀即可投入使用。
【预期用途】
弯曲菌是重要的人兽共患病原菌之一，可导致动物的流产、减产等。同时许多动物如鸡、鸭、猪等
是弯曲菌的主要储存宿主。本分离方法主要适用于泄殖腔及粪便标本中弯曲菌的分离、鉴定。
【检验原理】
本产品中的弯曲菌检测双孔滤膜培养基是基于弯曲菌的滤膜通透性的分离培养方法，利用细菌的形
态及理化特征，以特异孔径、特异通透性亲水性的滤膜，替代弯曲菌的选择性培养基，解决样本中耐药
杂菌增高导致的弯曲菌检测率降低的问题，样本中弯曲菌的检出率可达到 101CFU/ml。
【主要组成成份】
双孔板滤膜检测培养基：主要由 Clumbia 培养基、Karmali 培养基和无菌脱纤维兔血等组成。
粪便采集液：主要由脑心浸液等组成。
样本稀释液：主要由 PBS 缓冲液等组成。
增菌液：主要由脱纤维兔血、弯曲菌生长营养物等营养成分组成。
【贮存条件及保质期】
产品于 2℃-8℃保存，切勿冻藏，增菌液需避光低温保存，自生产之日起保质期 3 个月。
【粪便标本采集】
（1）采集粪便标本（2 个豆粒大小），直接装入弯曲菌样本采集管中（含弯曲菌样本采集液 4ml），4℃
运回实验室，当天进行检测。2ml 的混匀粪便采集液加入到促生长增菌液(4ml)中，充分混匀，置于微
需氧环境下（5% O2、10% CO2和 85% N2）， 37℃或者 42℃增菌培养 24h；
（2）采集泄殖腔内容物、肛拭子，将肛拭子直接放入促生长增菌液（4ml）中，充分混匀，4℃运回
实验室，将促生长增菌液置于微需氧环境, 37℃或者 42℃增菌培养 24h；
【双孔板滤膜法检测方法】
将双孔滤膜检测试剂盒中的双孔板取出，室温平衡后，将无菌的滤膜轻轻贴在平板的中央表面（有
网格面向上），注意不要产生气泡（可用弯头镊子轻轻使膜与平板充分接触），取增菌培养物或者混有标
本的样本采集液 300ul，分成 4-6 点，均匀滴加于滤膜上，待水分充分透过滤膜后（约 45 min -60min）,
轻轻揭去滤膜，翻转平板于微需氧环境中 42℃或者 37℃,培养 36-48 h。
生长于双孔培养皿上的菌落多为弯曲菌单菌落，但仍需进一步核实鉴定，建议挑取单菌落进行弯
曲菌属及属内不同菌种 PCR 鉴定。
【检验结果的解释】
观察菌落形态，统计细菌种类和菌落数量。正确的标本采集是检出细菌的基础，所检出细菌需经镜
检、生化鉴定来确认。
【产品性能指标】
1.培养基对质控菌株培养生长率为 100%。
2.培养基对质控菌株培养的重复性为 100%。
3.培养基对质控菌株鉴定的批内不精密度应无差异。
4.培养基对质控菌株鉴定的批间不精密度应无差异。
【注意事项】
1.仅供科学研究使用。
2.全部样本、微生物培养物和接种产品都应该视为具有感染性的，而且应该由受过训练的胜任的技
术人员操作。在整个操作中，应该遵循无菌操作技术和常规处理菌群的注意事项。
3.不要使用超过有效期及不符合标准规定颜色的培养基。
4.使用前，将培养基从冰箱取出，使其达到室温。
5.如出现平皿或玻璃瓶破损、变形或包装损坏的情况，不要使用该培养基。
【生产批号及使用有效期】
见外包装盒。
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