脂肪测定仪的使用注意事项

脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。国内外普遍采用抽提法，其中索氏提取法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法，也是我国粮油分析首选的标准方法。索氏抽提法以索氏提取器为提取仪器，采用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂肪物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
河南农业大学自2006 年开设农产品标准化与贸易专业以来，农产品中脂肪含量测定实验一直是本专业的本科生主要实验之一，结合近年来实验教学中总结的一些体会，笔者就索氏提取法测定农产品中脂肪含量实验中试剂选择、样品处理、提取等几个注意事项进行探讨。
抽提试剂的选择
利用相似相溶规律，农产品中脂肪极性一般较小，可采用石油醚或乙醚作为抽提试剂。常见实验室用石油醚有低沸程（30~60℃）和高低沸程（60~90℃）两种，一般选用低沸程石油醚为抽提溶剂有利于缩短提取时间。若选择乙醚为抽提试剂，则必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内应严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆。乙醚中过氧化物的检查方法是：取适量乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置1min，若出现黄色则表明存在过氧化物，应进行处理后方可使用。处理的方法是：将乙醚放入分液漏斗，先以1/5 乙醚量的稀KOH 溶液洗涤2~3 次，以除去乙醇；然后用盐酸酸化，加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3 溶液，振摇，静置，分层后弃去下层水溶液，以除去过氧化物；最后用水洗至中性，用无水CaCl2 或无水Na2SO4 脱水，并进行重蒸馏。
样品粉碎度
试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。
实验中的干燥处理
测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为：（1）抽提体系中若有水，会使样品的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；（2）抽提体系中若有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2%的水）,从而影响抽提效率；(3)样品中若有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。
抽提过程中注意事项
将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67 倍的石油醚，使样品包完全浸没在石油醚中。连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温在70~80℃之间，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（120~150 滴/min 或回流7 次/h 以上），抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6~12h）。抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发（抽提室温以12~25℃为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。
其他方面
（1）索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将样品先回流1~2 次，然后浸泡在溶剂中过夜，次日再继续抽提，则可明显缩短抽提时间。
（2）若实验中样品较多的话，可采用容量更大的YG- Ⅱ型油分测定器来测定脂肪含量，温度控制在70℃左右，8h 可提取完毕。