5个真实案例带你了解，γ-干扰素检测的临床意义！

作者 | 付小金

指导老师 | 庞晓霞 黄艳新

单位 | 右江民族医学院附属医院

前 言

结核病（tuberculosis）是由结核菌感染引起的一种慢性传染性疾病，其中肺结核（pulmonary tuberculosis）在全球广泛流行，结核病最主要的类型，是全球关注的公共卫生和社会问题，也是我国乙类传染病之一。结核病的病原菌为结核菌复合群，包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌，人肺结核的致病菌90%为结核分枝杆菌。结核病主要通过呼吸道传播，传染源是排菌的肺结核患者，通过把含有结核菌的微粒排到空气中进行飞沫传播。

当前结核病的实验室检查方法主要分为以下几种：

1、直接涂片抗酸杆菌镜检：简单、快速、易行，但欠敏感，容易漏检，肺外结核难。

2、结核菌素皮肤试验（tuberculin skin test，TST）：用于判断是否存在结核菌感染，不能区分卡介苗接种者和非结核分枝杆菌。

3、结核菌培养：准确、可靠，灵敏度高于涂片，常作为结核病诊断的“金标准”，但耗时长，肺外结核难。

4、结核抗体检测：假阳、假阴多。

5、分子诊断：操作复杂，技术要求高，涂片阴性检出低，肺外结核难，阴性不能排除结核分枝杆菌感染。

6、γ-干扰素释放试验（IGRAs）：一种利用体外细胞免疫方法检测机体是否感染结核的方法，其原理为机体初次感染结核分枝杆菌后会形成致敏的T淋巴细胞，当机体再次感染结核分枝杆菌时，致敏的T淋巴细胞会释放较高水平的细胞因子，其中最重要的为γ-干扰素（IFN-γ）。通过对IFN-γ的检测，可以对结核分枝杆菌的感染状况进行判断。IGRAs很好的避开了1-5种方法的问题，包括了化学发光免疫分析方法、免疫荧光法、酶联免疫斑点法、酶联免疫吸附法ELISA等，下面我们通过几个案例了解γ-干扰素的检测意义。

案例1

案例经过

2024年1月7日，一患者的γ-干扰素释放测定结果如图1，T-N管含量>5000，结果判定为阳性，尽管这种T-N管含量这么大数值的阳性结果不少见，但比对前次2023年11月1日的结果（图2），两个月的时间由阴性转为阳性，数值还那么高，还是会心生疑虑。

查看样本未发现有明显异常，当日其他样本的结果也未见有整体异常或与历史结果、临床不符情况，原样本经实验室复查后结果一致。于是，与临床沟通，得知该患者为HIV感染者，医生同意重新采血确定该结果，重新采血后测定结果亦然。

图1 患者1 2024年1月7日γ-干扰素释放测定结果

图2 患者1 2023年11月1日γ-干扰素释放测定结果

案例分析

患者1，男，58岁，于2023年10月28日因“无明显诱因下出现双下肢水肿”首次入院。

①查体双下肢对称性凹陷性水肿，“肾病综合征”诊断明确。

②人类免疫缺陷病毒抗原/抗体(电化学发光)：215.558 COI （HIV感染待确定），HIV-1 RNA核酸定量检测：2.55E+04↑，CD4+T细胞绝对计数：275↓，确诊人类获得性免疫缺陷综合征（AIDS）。

③影像学检查：胸部CT平扫(64排)：1.左肺上叶下舌段少许慢性炎症2.两侧胸腔少量积液3.两侧腋窝肿大淋巴结4.两侧胸壁软组织水肿。

患者经确诊AIDS后11月4日开始予以比克恩丙诺片抗病毒治疗，12月开始服用泼尼松激素治疗肾病，于2024年1月5日返院复查。历经2个月左右的时间，γ-干扰素释放试验由阴性转变成阳性，T-N管含量高，而胸部CT平扫未见肺部有典型病变。

患者为AIDS患者，HIV病毒感染致使机体免疫功能低下，尽管在免疫力低下的人群中，IGRA能够维持较高的敏感性，在检测HIV合并结核感染时具有优越性，但由于HIV感染者中CD4+T细胞数量很低，会出现假阴性结果，因此，患者2023年11月1日γ-干扰素释放测定阴性结果是假阴性概率大，此时可能已经有结核分枝杆菌感染。

抗病毒药物治疗后免疫功能恢复，CD4+T细胞数量上升（2024年1月9日检测结果为1073），γ-干扰素检测不受或者受到的干扰小，因此2024年1月7日的结果为阳性，结核菌潜伏感染可能性大。

主管医生告知患者家属病情及用药相关风险后，家属表示理解并签字同意使用异烟肼预防性治疗。有文献建议，对初始IGRA阴性且CD4+T细胞计数<200/mm3的HIV患者在接受抗HIV病毒治疗且CD4+T细胞≥200/mm3之后，应再次进行IGRA检测。

案例2

案例经过

患者2，女，2岁2月，因“嗜睡4天，发热3天，咳嗽两天，抽搐3小时。”入院。其γ-干扰素释放测定结果如图3，T-N管含量为23.55pg/mL，稍高于正常参考值上限，在没查看患者其他检验结果和临床病历前，第一反应是该患儿是否接种了卡介苗导致的阳性结果？而本实验室采用的是化学发光免疫分析的检测方法，选用的特异性刺激抗原是致病性结核分枝杆菌特有而卡介苗、其他分枝杆菌没有的片段，所以结果不受卡介苗的影响，经复查后，结果跟第一次一致。

图3 患者2γ-干扰素释放测定结果

案例分析

该患者脑脊液常规+细胞学检查和脑脊液生化结果如下图4、图5，结核性脑膜炎的脑脊液主要有三个特点：

①脑脊液压力一般会升高，即常说的颅内压升高，嗜睡、抽搐为该患者具体表现。

②脑脊液细胞数升高，以淋巴细胞为主，且最常见，患儿淋巴细胞比例高达80%。

③脑脊液生化指标中糖含量降低，氯化物含量降低，蛋白含量增高，即低糖、低氯、高蛋白，患儿脑脊液生化结果完全符合。

此外，患儿脑脊液外送提示结核分枝杆菌，血清结核酶标抗体阳性（+），脑脊液结核酶标抗体阴性，痰涂片抗酸杆菌阴性。

头颅+肺部CT：脑室系统积水，右肺下叶炎症。

患儿母亲有结核，半年前患儿也被确诊肺结核，正进行抗结核治疗，因此，该患儿考虑是肺结核并发的结核性脑膜炎。

图4 脑脊液常规+细胞学检查结果

图5 脑脊液生化结果

案例3

案例经过

患者3，女，50岁，10余年前确诊“淋巴结结核”，期间不规律用药，现γ-干扰素释放测定结果如图6。

图6 患者3 γ-干扰素释放测定结果

案例分析

患者既往病理活检诊断明确颈部淋巴结结核，近期痰结核分枝杆菌培养阴性，肺部CT无结核相关明显病变，为肺外结核，最近规范抗结核治疗19个月，经治疗后患者症状未见改善，γ-干扰素释放试验滴度高，考虑仍存在活动性结核病，不排除耐药结核可能。

案例4

案例经过

患者4，男，47岁，诊断“结核性脊髓炎”，痰抗酸杆菌阴性，血清结核酶标抗体阴性，γ-干扰素释放测定结果如图7；

患者5，女，68岁，诊断“腰椎结核”，痰抗酸杆菌阴性，血清结核酶标抗体阴性，γ-干扰素释放测定结果如图8；

图7 患者4γ-干扰素释放测定结果

图8 患者5γ-干扰素释放测定结果

案例分析

IGRAs在肺外结核诊断上有一定的应用价值，但敏感度和特异度欠佳，且不同部位的肺外结核IGRAs性能有差异，同时也会出现一定的假阴性。

案例5

案例经过

患者6，女，52岁，诊断“急性呼吸衰竭、细菌性肺炎、乳腺癌术后”，其γ-干扰素释放测定结果如图9。

图9 患者6γ-干扰素释放测定结果

案例分析

血常规：淋巴细胞数0.69×109/L↓，占比7.3%↓

营养指标：ALB 33.2g/L↓，PA 50.8mg/L↓，Fe 3.68umol/L↓，Zn 6.9umol/L↓

炎症指标：IL-6 35.23pg/mL↑，PCT 0.0808ng/mL↑，hsCRP 90.6mg/L↑，AGP 135.4mg/dL↑

患者γ-干扰素释放测定结果判定为“不确定”，该患者血常规检查中淋巴细胞减少，生化结果显示其白蛋白和前白蛋白都下降，各项炎症指标均明显升高，因此有可能是因为该患者因疾病长期营养不良，加之感染因素免疫功能异常致使淋巴细胞减少，T淋巴细胞数量与活性下降致使IFN-γ分泌不足，P管含量生成低出现的“不确定”结果。建议免疫功能恢复后再次检测，以确定是阴性还是阳性结果。

知识拓展

“不确定”结果原因包括：机体IFN-γ浓度过高或体内存在异嗜性抗体，本底对照管N管含量偏高；免疫缺陷如HIV感染，服用大剂量激素类和免疫抑制剂药物，阳性对照管P管IFN-γ释放不足；大叶性肺炎、肺脓肿等严重炎症患者对P管植物血凝素（PHA）不敏感，产生IFN-γ的量比较少；同时，儿童患者由于免疫功能尚处在发育阶段，还有老年患者免疫功能逐渐衰老，不确定结果的发生率也会有所增高。

总 结

IGRAs是临床诊断结核病的重要辅助手段，相对于直接涂片、结核菌痰培养、结核菌素皮肤试验、结核抗体和分子诊断等实验室方法，其具有较高特异性和敏感性，不受卡介苗和大部分非结核分枝杆菌的影响，但无法区分潜伏性结核和活动性结核，也不能预测潜伏性结核是否会发展成活动性结核；难区分肺结核和肺外结核；是既往感染还是现感染；阴性可排除结核分枝杆菌的感染。在检测过程中，除了阴性和阳性结果外，也会产生一定比列的不确定结果或假阴假阳的情况。因此，对结核病的诊断仍需结合流行病学资料、临床表现、影像学检查和其他实验室结果进行综合判断。

参考文献

[1]李冰洁，钱克莉，李茜等.HIV感染者行γ-干扰素释放试验用于筛查潜伏性结核感染的临床价值[J].东南大学学报（医学版）,2022，41（4）：471-476.

[2]陶娴，杨正贵，程亚龙等.HIV/AIDS患者结核潜伏感染筛检试验效果评价[J].中国艾滋病性病，2024，30（01）：61-64.

说明：本文为原创投稿，不代表检验医学新媒体观点。转载时请注明来源及原创作者姓名和单位。

近期直播推荐

编辑：徐少卿 审校：陈雪礼