高效价冷凝集标本的”拯救”之路

作者 | 董光陆 王培

单位 | 安徽省东至县人民医院检验中心

前 言

冷凝集素（cold agglutinins,CAs）是红细胞自身抗体的一种，主要抗体类型为IgM型，少数为IgG或IgA型。该自身抗体在外界温度低于31℃条件下，可与红细胞表面I、i或SP1三种抗原相结合，引起红细胞凝集，干扰红细胞计数及红细胞相关参数的检测分析［1］。由于白细胞和血小板表面也存在I/i抗原，CAs对白细胞和血小板计数也存在着一定的影响。日常工作中，对于含有低效价CAs的血常规标本进行37℃水浴，能够很好的纠正检测结果。近期工作中，作者遇到一例高效价CAs血常规标本，仅用水浴法和血浆置换法，并不能纠正红细胞相关参数的检测结果。

案例经过

2024年2月18日，一个普通的工作日上午，一例异常的红细胞直方图引起作者的注意，如图1。立刻查看检验结果，作者发现红细胞数目与血红蛋白比例明显不符，平均血红蛋白浓度（MCHC）异常升高，如图2①。

图1

图2

找出标本进行观察，可见试管壁附着红细胞呈“沙粒样”聚集，涂片镜检红细胞呈现明显聚集,如图3~4。作者考虑该标本为红细胞冷凝集标本，放置37℃水浴箱进行水浴30min。

图3

图4

等待水浴期间，查看患者住院病历。患者：男，84岁，汉族。主诉：[反复头晕3月，加剧1周。]现病史：[患者近3月前因无明显诱因下出现头晕不适，未予以重视及治疗，近1周前加剧，2024-02-14至我院门诊行血常规检查提示：白细胞5.76×10^9/L,红细胞1.86↓×10^12/L,血红蛋白66.001gL,红细胞压积18.80↓%血小板181.0×10^9/L,中性粒细胞数4.34×10^9/L,淋巴细胞数0.73↓×10^9/L;

生化：总胆红素10.6μmol/L,直接胆红素3.9μmol/L,间接胆红素6.7μmol/L,血清白蛋白30.0+g/L,谷丙转氨酶15.80U/L,谷草转氨酶23.7U/L,碱性磷酸酶68.40U/L,Y-谷氨酰转移酶15.0U/L,尿素8.10mmol/L,肌酐86.3μmol/L,尿酸270.0μmol/L,肾小球滤过率70.8↓ml/(min*1.73m²)。

CT提示：两肺结核(纤维钙化灶为主),左侧胸腔积液。现为求进一步诊治，门诊拟“中度贫血、胸腔积液、低蛋白血症”收入我院肿瘤科，病程中患者饮食差，无头疼不适，活动后心慌加剧明显，无咳嗽、咳痰，无腹胀、腹泻，睡眠尚可，大小便正常。]

既往史：[否认高血压病、冠心病、糖尿病史，无其他外伤及手术史，无药物过敏史，否认肝炎、结核、疟疾、伤寒等传染性疾病史，无输血史，预防接种随当地进行。]个人史：[出生于原籍，无外地久居史，无毒物接触史及放射线长期接触史。无吸烟、饮酒史，否认冶游史。近期无疫区旅居史，无与疫区人员接触史。]

37℃水浴30min后，作者充分混匀标本，立即上机检测，冷凝集并未得到纠正，如图2②。于是改用37℃温育血细胞稀释液进行多次血浆置换，置换后再次37℃水浴，并延长水浴时间至1h，冷凝集依旧未得到纠正，且经多次血浆置换，红细胞相关指标误差变大且存在血小板丢失的问题。如图2③。作者遂至病房对病患进行末梢血采样，20ul末梢血加到120ul稀释液中，混匀后及时上机检测，检测结果较为可靠，如图5。

图5

2月21日，住院部再次送检该患者血常规标本，检测其血标本时仍考虑冷凝集，如图6①。作者用37℃温育血细胞稀释液进行血浆置换，再进行温育，冷凝集仍未得到纠正，如图6②。改用41℃水浴30min,冷凝集也并未得到纠正，如图6③。最后用经过37℃温育的血细胞稀释液对标本按1：3的稀释倍数进行稀释，检测结果再乘以稀释倍数，检测结果符合要求，如图6④。

图6

案例分析

日常标本检测中，经常会遇到红细胞冷凝集的血常规标本，对于此类标本的处理，常规处理方法如下：

1、37℃水浴法，该方法操作简便，结果可靠。

2、血浆置换法，标本3000r/min，离心10min，小心吸取上层血浆并弃去，再加入等量血细胞稀释液或生理盐水，充分混匀。置换后可再进行37℃水浴，并可对标本进行多次置换。缺点是该方法操作繁琐，吸取血浆时需小心谨慎[2]，同时易丢失血小板。以上方法可用于绝大多数含低效价冷凝集素标本的处理。

对于含高效价冷凝集素标本，上述方法处理标本欠佳，可采用如下处理方法：

1、末梢采血（预稀释）法，该方法方便、快捷，适用于门诊及不易采血患者，且仅需微量血液。

2、温育加稀释法，标本用37℃温育血细胞稀释液或生理盐水1:3稀释，再进行水浴，检测结果乘以稀释倍数。亦有报道可采用1：1稀释倍数［3-4］。

3、41℃水浴法，水浴30-60min。有文献报道，红细胞形态和HGB构象可在相对高的温度下短时间内维持不变，随着温度的升高，聚集程度会降低［1］，冷凝集得到纠正。

对于该患者标本，作者尝试采用多种方法进行标本处理，用于纠正标本冷凝集。其中，37℃水浴法、血浆置换法效果均不理想，考虑为高效价凝集素凝集。41℃水浴法也未达到预期纠正效果，这与文献报道有出入，作者将进一步分析探讨其中原因。

总 结

冷凝集素抗体在室温31℃以下，可与红细胞表面相关抗原结合，导致红细胞发生可逆性聚集。冷凝集素阳性多见于肺炎支原体、病毒性感染、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤、实体瘤等。日常工作实践中，如遇到血常规标本不同程度的凝集，应根据自身工作特点、条件及患者疾病类型的不同，择优采用较为有效的方法用以纠正红细胞冷凝集，以简便、快速为患者提供准确的检测报告。

专家点评

王烈 池州市人民医院检验科副主任 主任检验师

血常规是检验科最基本的检测项目，日常工作中经常性遇到冷凝集标本。检验科报告审核人员应注意血常规红细胞参数变化，尤其应关注平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）的检测结果。检验科工作人员应了解标本冷凝集形成的机制及处理流程，以便于准确、快速为临床提供检测结果。

参考文献

[1]解鸿翔，沈燕，庞珍珍，孙彬，王珍妮，谢姝惠，周永列.41℃温浴对高效价冷凝集素样本血常规检测结果的影响[J].中国医学科学院学报,2021,43(4):507-512.

[2]王励，黄瑞英.生理盐水置换等量血浆并温育法可消除冷凝集素对血常规检验的影响[J]临床检验杂志,2014,32(8):637-637.

[3]张丽霞，张杰，陆琳，叶琴，潘世扬.温育加稀释法可解除冷凝集素对血常规检测的干扰[J].临床检验杂志,2011,29(4):317-318.

[4]王宏，周芸，陆琳，刘健，钱敏，唐未名，张杰.红细胞冷凝集1例[J].临床检验杂志,2012,30(7):517-517.

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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼