LNP递送mRNA在体内生成CAR-T，新锐公司再获1.75亿美元融资，推进自身免疫病CAR-T临床研究

撰文丨王聪

编辑丨王多鱼

排版丨水成文

2022年9月，辉瑞（Pfizer）、拜耳（Bayer）、诺华（Novartis）、礼来（Eli Lilly）和百时美施贵宝（BMS）这五大制药巨头的风险投资部门向一家生物技术初创公司——Capstan Therapeutics，投资了1.65亿美元（包括6300万美元种子轮融资和1.02亿美元A轮融资）。

2024年3月20日，该公司宣布，完成1.75亿美元的B轮融资，此轮融资由RA Capital领投，原有投资者继续跟投，并增加了强生、Forbion、Mubadala Capital、Perceptive Advisors、Sofinnova Investments等新投资者。

此次融资将用于支持Capstan公司领先的体内原位CAR-T细胞疗法——CPTX2309，以进行自身免疫疾病的早期临床概念验证，并进一步开发其基于靶向脂质纳米颗粒技术（tLNP）的研发管线。

据悉，CPTX2309基于Capstan公司的tLNP技术，将编码抗CD19 CAR的mRNA有效载荷特异性递送到表达CD8的T细胞，有效地在体内原位构建CAR-T细胞，进而在血液和淋巴组织中快速清除B细胞来重置免疫系统，而无需应对传统体外CAR-T细胞疗法面临的挑战。Capstan公司尚未公布该疗法用于治疗哪种或哪些自身免疫疾病。

在生物技术领域融资受挫的大环境下，这家初创公司何以具有如此大魅力？

我们来看关键词：LNP、mRNA、体内原位CAR-T，创始团队包括Carl June（CAR-T细胞治疗先驱），Drew Weissman（诺奖得主、mRNA技术奠基人），Jonathan Epstein（体内原位CAR-T技术发明人）。

从左至右依次为 Carl June、Drew Weissman、Jonathan Epstein

靶向脂质纳米颗粒技术——tLNP

Capstan公司专有的靶向脂质纳米颗粒技术（tLNP）由三个相互关联的部分组成——非病毒递送系统、细胞特异性靶向分子和针对疾病设计的有效载荷。

非病毒递送系统：基于脂质纳米颗粒（LNP）的递送系统具有安全、可重复体内给药的潜力，以解锁新的临床应用。

细胞特异性靶向分子：将抗体或抗体片段功能化连接到纳米颗粒表面，产生靶向脂质纳米颗粒（tLNP），以精确递送有效载荷。

针对疾病设计的有效载荷：用mRNA编码嵌合抗原受体（CAR）、基因编辑系统，以及其他治疗性蛋白质。

利用靶向LNP（tLNP）和mRNA技术，开发的体内原位CAR疗法，分别靶向两类细胞——T细胞和造血干细胞，靶向前者，用于治疗血液类癌症、实体瘤，以及纤维化疾病和自身免疫病。靶向后者，用于治疗遗传性血液类疾病。

LNP-mRNA，创建体内原位CAR-T

该公司的创立，主要基于创始团队2022年初发表在Science的一篇重磅研究论文：CAR-T cells produced in vivo to treat cardiac injury（体内产生的CAR-T细胞治疗心脏损伤）。

研究团队开发了一种在体内生成的瞬时工程化CAR-T细胞疗法，通过注射脂质纳米颗粒（LNP）递送mRNA，重编程T细胞，使其识别心脏纤维化细胞，进而减少纤维化，恢复心力衰竭小鼠模型的心脏功能。

该方法类似于mRNA疫苗，仅需一次注射，就能在体内生成CAR-T细胞疗法，有望解决目前CAR-T疗法工艺复杂、周期长、价格高昂的难题。

在这项新研究中，研究团队设计了一种基于mRNA技术的新型CAR-T细胞疗法，通过mRNA重编程T细胞受体，使其靶向成纤维细胞活化蛋白（FAP），使用脂质纳米颗粒（LNP）进行递送，LNP载体已经在新冠mRNA疫苗中得到了广泛应用和验证。而该LNP载体能够识别T细胞表面高表达的CD5 ，从而特异性靶向T细胞，生成FAP-CAR-T细胞。

在心脏损伤小鼠模型上进行的治疗实验显示，CD5/LNP封装mRNA后注射到小鼠体内，这些mRNA分子成功进入小鼠T细胞中并有效重编程了T细胞，并使其靶向攻击活化的成纤维细胞。这种重编程的暂时性的，mRNA并未整合到T细胞基因组中，几天之后，这些T细胞就恢复如初，不再靶向成纤维细胞。就在这短短几天时间里，mRNA诱导重编程了大量的CAR-T细胞，导致心脏纤维化显著减少，恢复了心脏的正常大小和功能。

该研究开发的这种在体内生成的瞬时工程化CAR-T细胞疗法，通过具有靶向性的LNP递送mRNA在体内生成CAR-T细胞 ，极大地扩展了CAR-T和mRNA技术的应用前景，而且，这种方法更可控，在流程上也更简单，有望大幅降低CAR-T细胞疗法的成本和价格。

近年来，一些临床研究显示，CAR-T细胞疗法对系统性红斑狼疮患者产生了良好的治疗效果，这为系统性红斑狼疮患者带来了一种全新的，且安全有效的治疗选择。

治愈自身免疫疾病的曙光——CAR-T

2024年2月，《新英格兰医学杂志》（NEJM）上发表了一篇题为：CD19 CAR T-Cell Therapy in Autoimmune Disease — A Case Series with Follow-up 的研究论文。

该论文报道了15名自身免疫病患者（8名系统性红斑狼疮患者、4名系统性硬化症患者和3名特发性炎性肌病患者）在接受CAR-T细胞疗法后重获新生，他们不再出现症状或不再需要进行新的治疗，其中第一批接受治疗的患者已经保持了两年多无病状态。这一结果让人们燃起了彻底治愈自身免疫病的希望。

CAR-T细胞疗法先驱Carl June教授曾在Cell期刊发表评论文章指出，还需要更大规模的研究和更长期的随访来证实CAR-T细胞治疗红斑狼疮的效果，但从已公布的结果显示很大的希望。事实上，这些研究表明了红斑狼疮可能比B细胞肿瘤更容易成为CAR-T细胞治疗的靶点。此外，红斑狼疮中的驱动疾病的B细胞数量要比B细胞肿瘤中的少得多，因此，CAR-T细胞治疗红斑狼疮这些自身免疫疾病可能只需要更低的剂量，这将大大减少CAR-T细胞治疗的免疫副作用问题。

值得一提的是，2024年3月21日，Capstan公司的研究人员近期在《美国国家科学院院刊》（PNAS）发表了一篇题为：IL7 increases targeted lipid nanoparticle–mediated mRNA expression in T cells in vitro and in vivo by enhancing T cell protein translation 的研究论文。

该研究显示，白细胞介素7（IL7）能够选择性地增强向T细胞中递送的mRNAd的蛋白质翻译水平，这一特性可用于在体内提高tLNP递送的mRNA的表达。

参考资料：

https://www.capstantx.com/

https://www.science.org/doi/10.1126/science.abm0594

https://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMoa2308917

https://www.pnas.org/doi/10.1073/pnas.2319856121