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整批标本结果偏高,谁在影响HBeAg测定?

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一文了解

撰文|徐培莉

背景介绍

乙肝五项检查用于乙肝疾病的筛查和诊断,通过检测乙肝表面抗原、乙肝表面抗体 、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝核心抗体五项指标对病情做初步判断。

HBsAg(乙肝表面抗原):已经感染乙肝病毒的标志。作为乙肝的早期诊断和普查。

HBsAb(乙肝表面抗体):一种保护性抗体,是机体感染或接种乙肝疫苗的标志,是是否康复、是否有抵抗力的标志。

HBeAg(乙肝e抗原):为病毒复制标志,反应乙肝病毒的复制情况及传染性强弱。

HBeAb(乙肝e抗体):为病毒复制停止标志,病毒复制减少,传染性较弱。

HBcAb(乙肝核心抗体):为曾经感染或正在感染者出现的标志。

乙肝五项最好的结果为HBsAb阳性,其余四项阴性,出现HBsAg、HBeAg阳性诊断为乙肝感染。

案例经过

我院采用化学发光法对乙肝五项进行定量检测。某天工作人员上机操作一批标本,审核标本时发现HBeAg数值在0.80-1.20之间(正常值为≤0.79mIU/ml),平时的测值范围在0.20-0.50之间,都比正常值高一点,都是可疑?一个结果出现可能为病人的真实情况(处于刚接触病毒,复制初期),多个结果出现这个情况是不对的。

同时HBsAg检测正常结果都在0.40左右,平时正常检测结果在0.20左右(正常值≤0.89mIU/ml),HBsAb、HBeAb、HBcAb三个检测项目都正常。

给HBeAg、HBsAg两个项目重新做校准、质控,质控在控。重新检测标本,结果正常,难道是校准曲线不可用了吗?

第二天,同一工作人员上机操作标本,结果HBsAg、HBeAg这两个项目又出现同一情况,这是什么原因?试剂不稳定?仪器不稳定?联系仪器工程师、技术工程师、试剂商家过来进行检测,全都没问题。外在因素?这几天与之前有什么不同?只在早上用配置的含氯消毒剂拖地,其余和往常一样,难道是它引起的?停止这项操作后,HBsAg、HBeAg结果升高现象没有再出现。

案例分析

化学发光免疫分析原理是通过将发光物质或酶标记在抗原或抗体上,抗原或抗体与待测物质发生特异性结合,随后加入氧化剂、化学发光底物或是电压的激发,通过氧化剂氧化发光物质,酶催化发光底物或是发光物质在电压的激发下形成高能的激发态,由于激发态不稳定,再回到基态过程中会以光的形式释放出能量,同时由于待测物浓度与发光强度在一定条件下呈线性定量关系,检测光的强度就可以确定待测物的含量。

含氯消毒剂具有很强的氧化性。过氧化氢是许多生物氧化反应的产物,而过氧化氢可使鲁米诺(发光底物)转变成激发态,进而增加了鲁米诺发光强度。HBsAg、HBeAg两个项目采用双抗体夹心一步法,检测时间短(15min),受含氯消毒剂影响造成结果可疑。HBsAb、HBeAb、HBcAb三个项目采用二步法,反应时间长(30min),氧化反应消失,结果影响小。

心得体会

一步法测HBsAg、HBeAg简单、方便、快速、灵敏度较高、特异性较好,但操作中各个环节对实验的检测结果影响较大,如标本因素、试剂因素、仪器因素等,造成检测结果的假阳性或假阴性。这个案例是由于环境中存在含氯消毒剂具有氧化性造成结果可疑。一件小操作,造成结果异常,带来很大的困扰。要求我们实验过程中认真仔细、严把质量关,做好分析前质量控制、分析中质量控制、分析后质量控制,确保结果准确性。

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本文来源丨基层检验网

责任编辑丨舒豪

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