一文读懂！G实验及异常反应曲线

作者 | 李玉玮

单位 | 唐山南湖医院

近年来，因细胞毒性药物、广谱抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂的广泛应用以及大剂量X射线、器官移植、侵入性检查和恶性肿瘤、尿毒症等慢性疾病的增加，侵袭性真菌感染呈上升趋势。目前，G实验检测相较于其他传统方法，具有标本容易获得，实验操作简单，检测所需要的时间短，做到了早诊断早治疗，极大地满足了临床需要的特点，并且G实验已被列入真菌诊断和治疗的指南［1］。本实验室采用的G实验检测试剂为湛江安度斯公司生产的鲎试剂。

PART.1

什么是鲎试剂？

鲎是地球上最古老的海洋生物之一，已有三亿多年的历史，人们称为“活化石”。人们利用鲎的阿米巴细胞溶解物制备成了鲎试剂（LAL或TAL）。如图：

PART.2

什么是G实验？

G实验是真菌（1-3）-b-D-葡聚糖检测实验(BG),BG是真菌细胞壁葡聚糖中主要成分，真菌进入人体后，葡聚糖是如何入血的见下图：

了解到BG是如何入血的，下面就来谈谈检测的原理：

G实验检测试剂活化G因子➩活化凝固酶原➩变成凝固酶➩作用显色寡肽➩生成寡肽+显色集团（黄色），然后显色法进行显色。

了解完检测的原理，然后来一起探究下影响因素及结果判读。

PART.3

影响实验结果的假阳性因素都有哪些呢？

(1) 药品或治疗过程中的b-葡聚糖污染［2］

血液制品（人血白蛋白、人血球蛋白等）及抗生素常含有b-葡聚糖（建议用药前或用药8小时后采血）;

蘑菇和植物制成的药品含有b-葡聚糖（如香菇多糖、黄芪多糖、双黄连、生脉注射液等）建议停药3天后采血复查；

激素药：注射泼尼松龙等含有羧甲基纤维素（盐）（建议停药3天后采血检测） 注射过脂肪乳（建议停药8小时后采血检查）。

(2) 手术使用的纱布和海绵是易含葡聚糖的高污染材料，术后患者会出现短暂的阳性结果。

(3) 使用纤维素膜人工肾的血液透析患者（建议血透前采血检查）。

(4) 高免疫球蛋白（多发性骨髓瘤患者）（由于蛋白加热变性使处理液混浊，影响检测）。

(5) 导致检测结果异常的标本（高溶血、高脂、高胆红素标本等）（中度溶血的标本、中重度脂血的标本，胆红素在250umol/L以上的黄疸标本不建议检测）。

(6) 采血管中b-葡聚糖污染（容易忽略，必须厂家配套的采血管）。

PART.4

影响结果的假阴性因素都有哪些呢？［2］

(1) 不敏感菌：某些真菌如接合菌（毛霉菌、根霉菌）细胞壁没有（1-3）-b-D-葡聚糖成分；

(2) 隐球菌细胞壁外有荚膜致使（1-3）-b-D-葡聚糖释放不出（感染严重时方能检测）；

(3) 此外，皮炎芽生菌的酵母相几乎不产生（1-3）-b-D-葡聚糖。

因此这些真菌G实验不能敏感检测，有临床症状，但G实验阴性时，需考虑这两种真菌感染的可能。

PART.5

反应曲线是正常？还是异常？结果能报告吗？

因我单位采用的莱伯金耐特公司提供的动态试管检测仪LKM-02-32，就此仪器，介绍几种工作中遇到的正常与异常反应曲线。

1.G实验正常反应曲线

2. G实验异常反应曲线：达限时间250秒，浓度为61000pg/mL.

3. 脂血、输注血液制品干扰的反应曲线

4.反应过程中出现翘尾，反应管中有物质干扰，或仪器放置桌面发生了震动，导致反应波动。

5. 重度黄疸血干扰的反应曲线

综上所述，我们从G实验鲎试剂的介绍、BG入血的过程、检测的原理、影响因素以及结果判读时的正常或异常反应曲线，综合了解了一下什么是G实验。另外，值得强调的是采集标本时，应使用专用的祛除热源的采血管，检测过程中使用配套的祛除热源吸头和反应管。

侵袭性真菌病（IFD）国际诊断标准标准［3］：

确诊☞需要在病变组织检出真菌成分

拟诊☞宿主因素+临床表现+微生物学标志

疑似☞宿主因素+临床表现

G实验是IFD微生物学标识检测实验，已被IFD诊疗规范文件收载，如《IFD诊断标准与治疗原则》、《中国血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则》等，并且具有快速、抗干扰能力强、敏感性高、精确、简便的特点。在以后的工作中，我们不仅要多开展新技术，而且要对检验结果合理解读，来辅助临床诊疗。读完本篇，你对G实验是否大概有个了解了呢？

【参考文献】

［1］王笑云，张彦峰，刘春晖. 检测BALFBG在侵袭性肺部真菌感染患者的早期诊断价值研究[J].临床肺科杂志，2016，21 （8 ）：1363-1367.

［2］方慧，沈菊英，蔡惠萍. 探究菌血症对G 试验的干扰[J]. 中国医药指南，2017 ，18 （15 ）：24-26.

［3］Walsh TJ ，Anaissie EJ ，Denning DW ，et al.Treatment of as-pergillosis ：clinical practice guidelines of the Infectious Diseases Society of America[J].Clin Infect Dis ，2018 ，46 （3 ）：327-360.

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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼