作者 | 贾延 高娃 江门市澳保生物科技有限公司
黄颡鱼，俗称黄骨鱼、黄腊丁等，隶属鲶形目（Siluriformes）、鲿科（Bagridae）、黄颡鱼属（Pelteobagrus），广泛分布于我国江河、湖泊、池塘等水体中。
杂交黄颡鱼是由雌性普通黄颡鱼（P. fulvidraco）♀和雄性瓦氏黄颡鱼（P. vachelli）♂杂交繁殖的子代，其中全雄黄颡鱼是利用鱼类性逆转技术，通过雌核发育、测交等手段获得全雄子代，因其个体大、抗病强、长速快、料比低、亩产高，故深受养殖群体欢迎。自2017年之后，广东多家黄颡鱼孵化场及浙、鄂、湘等部分大型孵化场大规模繁育全雄苗供国内各区域养殖。
随着黄颡鱼养殖密度和规模不断攀升，养殖水域环境日益恶化，细菌性疾病也逐年频发。2015年辽宁省灯塔市某养殖基地出现典型患“红头病”的黄颡鱼，经16S rDNA测序结合细菌形态及生理生化特性，鉴定为蜡状芽孢杆菌。2016年广西省柳州市某养殖厂黄颡鱼发生大规模死亡，从病鱼肾脏中分离鉴定出的菌株为迟钝爱德华氏菌。2017年云南省某养殖公司的瓦氏黄颡鱼出现死亡情况，对分离菌进行生理生化鉴定与基因序列分析等，从病鱼肝脏中鉴定出嗜水气单胞菌。
2018年浙江省某黄颡鱼主养区暴发严重溃疡病，对分离的多株优势菌进行分类鉴定，结果表明11株优势菌皆为拟态弧菌。2019 年湖北省汉川市某黄颡鱼养殖场爆发疾病，经病原菌分离鉴定为铜绿假单胞菌急性感染。2020年湖北省潜江市某黄颡鱼主养池塘出现暴发性病害，经细菌纯化鉴定致病菌为维氏气单胞菌和类志贺邻单胞菌。病原多样性常导致疾病难以实时防控，从而造成较大经济损失。做好疾病早期筛查机制有助于养殖疾病大规模薄发的风险。科学用药即可降低用药成本，也可以避免乱用抗生素药物导致环境污染及药物残留。
组织颜色发绿，有胆汁回流情况，胆囊轻微肿大（图-2i-k）。
2021年10月末，江门市新会区大泽镇某黄颡鱼养殖池塘出现病情，池塘面积30亩，水深1.8米，塘内养殖的黄颡鱼连续数日损耗超过600斤/天（图-1）。11月9日，采集发病池塘水体样本和濒死病鱼样本进行检测和诊断。
图-1 发病黄颡鱼池塘
1池塘水质指标检测
表-1 发病黄颡鱼池塘水质指标检测结果
2发病黄颡鱼规格测量
表-2 发病黄颡鱼平均体重和体长指标测量结果
3发病黄颡鱼临床病灶记录
发病黄颡鱼经体表标准化检查可见：鳃丝肿大充血、部分发白，吻部及下颌多处出血、口腔内少量出血（图-2a-c）；体表黏液增多，背鳍有出血点，鳍条基部溃疡，胸鳍基部充血、发红，腹鳍出血，肛门充血、红肿，臀鳍有多处点状溃疡灶，尾鳍点状出血（图2d-h）。经解剖标准化检查可见：病鱼脑部外观无明显病变，肝脏肿大、发白、充血，贴近胆囊一侧肝
图-2 发病黄颡鱼体表和解剖检查结果
a：鳃丝、眼部；b：吻部、口腔；c：下颌；d：背鳍；e：胸鳍；f：腹鳍、肛门；g：臀鳍；h：尾鳍、尾柄；i：脑；j：内脏团（白肝）；k：内脏团（绿肝）。
4发病黄颡鱼各组织印片细胞学检查
取发病黄颡鱼的少量脾脏、肝脏、肾脏、血液、心脏、脑和肠道内容物，制成细胞学印片，后进行瑞氏-姬姆萨染色，显微镜油镜下镜检各组织中病原菌的形态和数量分布情况。显微视野下可见：病鱼脾脏部位病原菌感染量较多（图-3a）；肾脏、血液部位次之（图-3c，d）；肝脏、心脏、脑和肠道内容物等部位较少（图-3b，e-g）。
图-3 发病黄颡鱼各组织印片、染色、镜检结果
a：脾脏；b：肝脏；c：肾脏；d：血液；e：心脏；f：脑；g：肠道内容物。
5病原菌分离纯化、测序比对
经挑取脑心琼脂固体培养基平板（BHIA）上划线分离得到的链球菌单菌落（图-4），接种于脑心液体培养基（BHI）中培养，分离纯化后的单菌珠进行16S rDNA基因检测鉴定，该菌株与海豚链球菌（Streptococcus iniae）同源性为99.65%，结合细菌形态特征，确认本次分离菌株鉴定为海豚链球菌（表-3）。
图-4 链球菌在脑心琼脂固体培养基平板（BHIA）上形成的菌落特征
表-3 分离菌种NCBI物种相似度比对结果
6药物敏感性试验
采用纸片琼脂扩散法检测分离的海豚链球菌MP002药物敏感性实验，实验结果显示该菌株对阿莫西林、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、复方新诺明的相对敏感度较高，对硫酸新霉素的相对敏感度较低，其中阿莫西林和多西环素的抑菌圈直径较大（图-5，表-4）。
图-5 链球菌的药敏试验
表-4 海豚链链球菌MP002的药敏试验 单位:mm
链球菌病的病原主要为海豚链球菌（Streptococcus iniae）和无乳链球菌（Streptococcus agalactiae），普遍存在于养殖环境中，其发病与水温、密度和环境有着密切联系，可危害包括罗非鱼、鲻、鲷、鳉等几十种淡海水鱼类，一般流行于5~10月份。2016年7~8月福建省某黄颡鱼养殖场暴发病情，发病率40%~60%，死亡率约90%，经诊断确诊病原菌为海豚链球菌；2616年10月贵州省某黄颡鱼养殖场出现水中转圈、死亡现象，死后可见鱼体不同部位溃疡，经诊断确诊病原菌为无乳链球菌。
本次诊断中，根据发病黄颡鱼胸鳍基部发红、尾鳍点状出血等临床症状，结合实验室内对病鱼各组织进行印片、染色及镜检，并将分离纯化的菌种送检测序比对，最终确诊造成本次黄颡鱼养殖池溏发病的病因为海豚链球菌感染。目前抗生素治疗仍是治疗该类疾病的主要有效手段之一，但随着各种细菌性疾病频繁暴发，药物使用不当或滥用药物导致致病菌产生耐药性，且在环境中残留，给养殖户防控链球菌病带来较大困难。因此，在疾病诊断时应及时准确确诊病原，了解其耐药性，寻找高度敏感药物，做到科学用药。根据药敏试验结果，该病原菌对阿莫西林、多西环素、氟苯尼考及恩诺沙星等敏感度较高，临床上需考虑药物质量、给药剂量和给药途径，而养殖一线则还需考虑成本因素。
对于链球菌病的防治，本文给出了几点建议方案，供广大养殖户朋友参考借鉴：
1、首先镜检确认是否有小瓜虫、车轮虫等寄生虫感染，如有则建议先杀虫。
2、建议交替使用二氧化氯和水产用碘制剂，消毒2~3次（3天/次），杀灭水层与泥层病原菌。
3、根据药敏试验结果，可尝试选择敏感度较高的药物进行拌料投喂，每日1餐（5天/疗程），观察用药效果，当损耗降至0.02%时（例：5万尾/塘，日损耗≤10条），建议停止用药。
4、通过对芽孢杆菌抑菌效果的研究，已证实芽孢杆菌中的某些菌株对嗜水气单胞菌、爱德华氏菌、溶藻弧菌等致病菌均有抑制效果，建议使用复合芽孢杆菌，为池塘水体及鱼体肠道内补充有益菌，抑制病原菌生长繁殖。
5、定期使用高铁酸钾+过氧化钙，净水絮凝、改底增氧，降解池塘底层毒素，抑制病原菌滋生。
6、使用中草药类保肝产品+水产用多维拌料投喂，每日1餐（5天/疗程），护肝增免疫，健肠促消化，降低病原菌感染率。
国内很少有链球菌感染黄颡鱼的病例报道，但由海豚链球菌引起的疾病对水产养殖业仍造成巨大损失。由于本次爆发链球菌病的情况较为严重，发病黄颡鱼均已闭口不吃料，在使用阿莫西林和少量恩诺沙星后，损耗明显下降并开始摄食，配合水产服务技术专员的方案，养殖池塘黄颡鱼回复健康水平，池塘水质良好、黄颡鱼活力好摄食猛。
结束语：
黄颡鱼链球菌病通过水体传播非常迅速，肠道黏液及粪便内均存在链球菌，建议养殖户平时多留意观察，日常做好消毒、改底、增强鱼体质等工作，遇到疑似发病情况，尽早联系技术员现场采样检测，或及时送到周边服务站寻求诊断，同时选择相对敏感性较好的药物进行口服给药治疗，避免链球菌病传播和爆发。
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