《食品科学》：EGCG通过激活AMPK、抑制PPARγ调控3T3-L1脂肪细胞中脂滴蓄积

肥胖是近年来世界范围内的主要健康问题之一，通常是由于食物摄入与能量消耗不平衡，脂肪细胞肥大和增生而导致的脂肪量过多和脂肪组织扩张。早在2013年肥胖被美国医学协会（American Medical Association）认定为一种疾病之前，肥胖的发生率一直在稳步增长。茶是一种被人们广泛接受的饮料。绿茶已被证明具有许多潜在的健康益处，包括抗氧化、抗癌和保护心脏活性，并可能影响能量平衡的多个方面，绿茶对健康的好处主要是由于其高浓度的多酚，这些多酚统称为儿茶素。绿茶多酚被广泛报道可以改善人类和动物模型的肥胖和代谢综合征。

有研究表明绿茶提取物和表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）可显著提高脂质活性并降低脂肪组织质量。在探究绿茶多酚对减轻体质量作用的研究中，报道了几种多酚可以刺激腺苷一磷酸（AMP）活化蛋白激酶（AMPK）的活性。云南农业大学 普洱茶学教育部重点实验室的管巧丽、李 芳*、盛 军*等人以EGCG为实验原料，通过体外诱导分化培养3T3-L1前脂肪细胞，研究EGCG对3T3-L1脂肪细胞中脂滴蓄积的影响，为改善肥胖症的分子机制提供理论参考。

1、EGCG对3T3-L1脂肪细胞活性及脂代谢的影响

EGCG处理对3T3-L1脂肪细胞活性的影响

为了检测EGCG对3T3-L1前脂肪细胞的影响，使用EGCG不同质量浓度处理3T3-L1前脂肪细胞72 h，与对照组相比，细胞活性显著增强（图1A），然后对细胞凋亡相关的蛋白表达水平进行蛋白免疫印迹分析。结果显示，不同质量浓度的EGCG对细胞凋亡促进蛋白Bax的表达没有影响（图1B、C），而细胞凋亡过程中最主要的Cleaved-caspase 3的表达水平在使用50 μg/mL EGCG 处理72 h后显著降低（图1B）。以上研究结果表明，EGCG可能不会引起3T3-L1成熟脂肪细胞的凋亡。

EGCG对成熟3T3-L1脂肪细胞脂滴蓄积的影响

在EGCG处理时间相同的条件下，随着EGCG处理质量浓度的增加，3T3-L1成熟脂肪细胞脂滴数量以及大小减小，当EGCG处理质量浓度为50 μg/mL时，脂滴变小得最为明显（图2A）。而在EGCG处理质量浓度相同的条件下，随着处理时间的延长，3T3-L1成熟脂肪细胞脂滴数量以及大小也减小（结果未显示），当EGCG处理时间为144 h时，脂滴变小得最明显（图2A）。分析EGCG处理72、144 h后3T3-L1成熟脂肪细胞中的甘油三酯相对含量，可发现EGCG处理减少了脂肪细胞中甘油三酯的相对含量（图2B）。以上结果表明，EGCG的处理可以减小成熟3T3-L1脂肪细胞脂滴的大小并减少甘油三酯的相对含量。

EGCG对成熟3T3-L1细胞脂代谢相关因子mRNA表达水平的影响

为了探讨EGCG降低3T3-L1成熟脂肪细胞脂滴大小的具体机制，对3T3-L1成熟脂肪细胞中脂代谢相关基因的mRNA表达水平进行了检测（点击下方 阅读原文 可查看图3）。EGCG分别处理3T3-L1成熟脂肪细胞72 h和144 h后发现，脂肪合成相关基因（acc1、srebp1c、fas、scd-1、pparγ、dgat1、elovl6）的mRNA水平的表达整体上显著下降（图3A、E）。参与脂肪酸转运的相关基因（mttp、cd36、fatp1、fatp4）的mRNA水平的表达显著下降（图3B、F）；与脂滴形成相关的基因cgi 58的mRNA水平的表达显著下降（图3C、G）；与脂肪分解相关的基因atgl mRNA水平的表达显著下降（图3D、H）。

2、EGCG通过激活AMPK抑制成熟3T3-L1脂肪细胞PPARγ的表达

EGCG可以抑制脂代谢相关基因的表达，但机制并不清楚。Yang等提出AMPK在介导EGCG对脂肪酸合成和分解代谢的作用中发挥主要作用。因此，在使用EGCG处理3T3-L1成熟脂肪细胞144 h后通过免疫印迹法检测AMPK的蛋白表达，结果显示EGCG能显著激活AMPK的表达（图4A）。有文献报道，AMPK可以通过抑制PPARγ调控脂肪的合成及储存。通过检测PPARγ和其辅活化因子PGC-1α的表达情况发现，EGCG能明显降低3T3-L1成熟脂肪细胞中PPARγ和PGC-1α的蛋白表达水平（图4A、B）。另外，PPARγ的蛋白表达水平也随着EGCG处理质量浓度的提高而显著下降（图4B）。这些研究结果表明，EGCG可能通过抑制PPARγ的表达来调控成熟脂肪细胞中脂滴蓄积。

结论

综上，EGCG处理3T3-L1成熟脂肪细胞可以降低脂滴大小和脂肪细胞甘油三酯相对含量，其降低脂滴大小的机制可能与增强AMPK活性有关。一方面，AMPK活性增加使PPARγ的表达降低从而调控脂肪合成和分解，进而减小脂滴大小；另一方面，AMPK通过抑制PPARγ从而抑制cd36、fatp1、fatp4这些与脂肪吸收相关基因的表达，减少脂肪吸收进而减少脂肪细胞中脂滴蓄积。

本文《EGCG通过激活AMPK、抑制PPARγ调控3T3-L1脂肪细胞中脂滴蓄积》来源于《食品科学》2021年42卷23期152-161页，作者：管巧丽，吴晓云，李芳，盛军。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20201221-234。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。

修改/编辑：袁艺；责任编辑：张睿梅

图片来源于文章原文及摄图网

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