一种全新的帕金森病诊断标志物——皮肤α-突触核蛋白接种活性

　　目前临床上根据不同临床症状来对帕金森（PD）患者进行诊断及鉴别诊断具有一定局限性，明确诊断需要病理检测到大脑组织中α-突触核蛋白聚集物（包括其它突触核蛋白病）。

　　然而，采集脑组织标本有一定的困难，并且是一种创伤性较大的操作。我们注意到，在一些前期研究中，使用免疫荧光或免疫组织化学在PD患者的皮肤标本中可以检测到α-突触核蛋白的聚集体，但其特异性及诊断意义尚不清楚。

　　近日，来自美国凯斯西储大学病理系的邹文泉课题组在JAMA Neurology期刊上发表题为 Skin α-Synuclein Aggregation Seeding Activity as a Novel Biomarker for Parkinson Disease 的研究论文，邹文泉教授课题组的王泽瑞博士为文章的第一作者。在本研究中，通过回顾性和前瞻性诊断研究表明，应用实时震荡诱导转化（RT-QuIC）和错误折叠蛋白循环扩增（PMCA）两种技术，可以在体外扩增皮肤标本中的微量α-突触核蛋白的聚集体，并从其中是否存在α-突触核蛋白（aSynP）的接种活性来诊断帕金森病（PD）及其他突触核病例如路易体痴呆（LBD）和多系统萎缩症（MSA）。

　　前期的免疫组化及免疫荧光研究已经表明PD 患者皮肤相对健康对照组皮肤，含有特异性的磷酸化α-突触核蛋白。如图一所示。pS129-Syn可检测到磷酸化的aSynP，也是针对磷酸化的a-突触核蛋白的抗体，与PGP9.5（轴突标记）共定位的结果表明PD病人的皮肤神经纤维中存在aSynP。

　　图1：皮肤中的突触核蛋白：PD患者皮肤的神经末梢（绿色，上图）含有磷酸化的α-突触核蛋白（红色），而健康对照组的神经末梢（下图）则没有。

　　接下来，本研究分析了140具尸体中的160份皮肤标本（85具男性尸体[60.7％]；平均死亡年龄为76.8岁 [SD，10.1]）和41份死前皮肤活检（27名男性[66％]；活检时的平均年龄为65.3岁[SD，9.2]），对照组有73例无突触核病的尸体（阿尔茨海默病[AD]，进行性核上性麻痹[PSP]，皮质基底变性[CBD]和无神经退行性疾病的对照[NNC] ）。通过RT-QuIC和PMCA分析皮肤aSynP接种活性。RT-QuIC检测了47个PD尸体和43个NNC的尸检腹部皮肤样本，其敏感性为94％（95％CI，85–99），特异性为98％（95％CI，89–100）；在头皮标本检测中，敏感性和特异性均可达到100%。在57份突触核病（PD，LBD和MSA）的标本中，RT-QuIC可达到93％的敏感性（95％CI，85–97）和93％的特异性（95％CI，83–97）。PMCA检测的敏感性为82％（95％CI，76-88），腹部皮肤样本具有96％的特异性（95％CI，85-100）。

　　在通过上述两种方法分析的尸检皮肤上分析RT-QuIC和PMCA的aSynP播种活性的一致性水平时，计算得出一致性百分比为78.6％（95％CI，62.2–95.0），其中RT-QuIC的灵敏度略高于PMCA。其他诊断组的百分比一致性为100％。仅在PD病例中，有75％的一致性，McNemar检验表明无显着差异（P = .69），这也支持两种方法之间的一致性。

　　本研究从具有突触核蛋白病的皮肤样本中检测出特异性的αSynP接种活性的存在，提示它可能成为未来诊断PD以及其它突触核蛋白疾病的有效生物标志物。

　　本研究的第一作者美国凯斯西储大学病理系邹文泉教授实验室的王泽瑞博士表示“据我们所知，这项研究首次证明，皮肤αSynP具有朊蛋白样的接种活性，在PD和其他突触核蛋白病患者中，其接种活性显着高于对照组。基于皮肤标本容易采集的特性，分析可提供更便利，更易于接受，创伤更小适应性更广的，高敏感性和特异性的检测方法。”

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　　所有引图来自JAMA Neurology

　　文章链接：
https://jamanetwork.com/journals/jamaneurology/fullarticle/2771032