超氧阴离子清除能力测定的方法和意义

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啥是超氧阴离子？

超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

人体内有一定数量的存在，不发生化学变化对人体无害，但与羟基(-OH)结合后的产物会导致细胞DNA损坏，破坏人类机体功能。

它是怎样产生的？

需氧生物体内氧分子作为最重要的电子受体在物质代谢过程中被还原成水:O2+4e→2H2O，如此利用的氧约占组织耗氧总量的95%，其余5%的氧在还原过程中由于接受电子数目不等可以形成多种性质活泼的活性氧。氧分子受单一电子还原的产物称为超氧阴离子O2+e→O2。

O2是阴离子，又是自由基，性质活泼，具有很强的氧化性和还原性，既是氧化剂，又是还原剂，过量生成可致组织损伤。在体内主要通过超氧歧化酶清除。

由于超氧阴离子自由基与机体衰老和各种疾病有很密切的关系，因此测定超氧阴离子自由基清除能力有很重要的意义。常见的原理有如下几种：

01

邻苯三酚法

在弱碱性条件下，邻苯三酚能发生自氧化反应，生成超氧阴离子，和有色中间产物，该中间产物在320nm处有一特征吸收峰。

在初试阶段，中间产物的量与时间成线性关系。当加入超氧阴离子清除剂时，它能迅速与超氧阴离子反应，从而阻止中间产物的积累，使溶液在320nm处光吸收减弱。故可以通过测定A320值来评价清除剂对超氧阴离子的清除作用。

02

AP-TEMED系统法

AP-TEMED 系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成 NO2－，NO2－与对氨基苯磺酸和 α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在 530nm 处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。

03

黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统法

模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统，产生超氧阴离子，加入电子传递物质及显色剂，使反应体系呈现紫红色，可用分光光度计测其吸光度。

当抗超氧阴离子的物质，可抑制该反应使超氧阴离子减少，故颜色变浅。根据形成物的颜色深浅计算出清除超氧阴离子的能力强弱。