三八式步枪使用的6.5×50毫米有坂步枪弹
三八式步枪采用的是6.5×50毫米有坂步枪弹，实际上，这款枪配的这款子弹威力并不弱。这款子弹的优点是后坐力小，精度优良，中近距离击中目标后会发生滚转，并造成严重伤害。但是由于膛线设计导致细长的弹头拥有非常高的转速，使得对较远距离目标造成的伤道非常小，才会威力不足。
6.5×50毫米有坂步枪弹有一个特点，就是其在大气环境里拥有低伸平稳的弹道，低伸平稳的弹道，与枪管的长度并没有绝对关系。弹道低伸平稳的原因是其弹头的口径与长径比高达一比五。高长径比的子弹受限于体积与尺寸的关系，运动的特性往往从一般大气的环境下突然变化成为高密度的环境时(例如人体)，弹头很容易因为密度的变化而在击中与击入物体后产生滚转，而滚转又会引发与加速弹头的变形破裂，尤其弹头曾经先击穿过坚硬的物体而变形后，弹头的破裂的过程会变的更快。
美国陆军军医部在二战出版的弹道杀伤书的第一章，敌人弹药中，曾对日本三八式步枪使用的6.5毫米有坂步枪弹进行了细致的描述，称6.5毫米弹击中目标头部到躯干后会形成可怕贯穿伤的不在少数。而据北美的枪支爱好者的称，该枪可以在150至200米的距离上，射杀一头棕熊。并称6.5有坂步枪弹在150米、最多200米内命中人体后，会出现相当可怕的弹头变形。但在200米至600米的距离上，其弹道会非常稳定，命中人体之后也很难失去稳定，因此会造成进口出口一样大的情况发生，威力较小。
三八式步枪总共开发出了三种6.5毫米弹药，最初所开发的弹药杀伤力最小，是圆头弹，打到人体只要没击中要害
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