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河南大学副校长以通讯作者身份在国际权威期刊上发表研究成果

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棉花是全球最重要天然纺织纤维经济作物,纤维长度直接决定棉花品质与产业经济效益。过往研究多聚焦激素、初生代谢对棉纤维生长的调控,次生代谢如何调控棉纤维伸长,仍是领域重要待解难题。

近日,《Plant Physiology》在线发表河南大学苗雨晨教授团队研究成果,论文题为:4-hydroxyphenethyl alcohol, a phenolic metabolite synthesized by GhADH1, positively regulates cotton fiber elongation。该研究核心创新是挖掘到酚类信号代谢物4-HPEA(4-羟苯乙醇),证实其为调控棉纤维伸长的关键效应分子,完整解析GhADH1-4-HPEA全新代谢通路:GhADH1催化底物4-HPAA生成活性代谢物4-HPEA;4-HPEA以激素样模式调控生长素稳态,协同ROS促进纤维伸长。该成果刷新次生代谢调控棉纤维发育的认知,4-HPEA的发现为本工作最重大突破,为长绒棉代谢育种、天然生物刺激剂开发提供核心靶标。


一、GhADH1在棉纤维快速伸长期高表达

团队基于多份陆地棉种质的基因表达筛选,定位到MDR家族一对部分同源基因GhADH1-A/D。该基因在纤维快速伸长期(10-20 DPA)高表达,长纤维品种中表达量更高;蛋白具备ADH家族保守结构域,转录本主要富集于15 DPA发育纤维中,提示其参与纤维发育调控。


图1 GhADH1表达与纤维伸长高度关联,蛋白结构高度保守二、遗传实验证明GhADH1正调控棉纤维伸长与棉铃发育

通过VIGS沉默、CRISPR敲除(KO)、35S过表达(OE)多种遗传材料开展功能验证:GhADH1敲除造成棉铃变小、纤维显著缩短;过表达则增大棉铃,成熟纤维长度提升17.1%-18.2%。纤维其他品质指标也发生相应改变,在遗传层面确认GhADH1是棉纤维伸长的正向调控因子。


图2 GhADH1正调控棉纤维伸长与棉铃发育三、鉴定4-HPEA是GhADH1直接催化生成的纤维特异性代谢物

本研究重点突破:以往ADH的研究大多集中于抗逆、挥发性物质合成,本研究首次在棉纤维中鉴定GhADH1的生理产物4-HPEA,发现一条全新纤维特异的次生代谢通路。

结合代谢组、质谱鉴定、体外酶活实验证实:GhADH1能够催化4-HPAA还原生成4-HPEA。转基因材料代谢定量表明,敲除株纤维4-HPEA含量大幅下降,过表达株显著积累,且该代谢物的改变只发生在纤维组织,其他器官不受影响。尽管体外GhADH1可作用于木质素前体,但植株体内并不参与木质素合成,功能特化用于4-HPEA的生成。


图3 GhADH1直接催化棉纤维中4-HPEA的生物合成四、4-HPEA作为信号代谢物,特异性促进纤维伸长,可回补突变体短纤维表型

关键性:4-HPEA仅需纳摩尔浓度即可发挥生理功效,作用模式类似植物激素,属于新型酚类信号代谢物,而非结构物质,并且活性具备严格的结构特异性。

离体胚珠培养证实,4-HPEA促纤维伸长存在明显浓度效应,1.2 nM处理促长效果最优;其同分异构体无促生长活性。外源施加4-HPEA能够回补GhADH1敲除株系纤维变短的缺陷;而前体物质4-HPAA的促伸长作用,必须依赖GhADH1的转化才可以实现,生理回补实验充分证明4-HPEA是GhADH1在体内发挥功能的核心效应分子。


图4 4-HPEA特异性促进纤维伸长,能够回补ghadh1敲除突变体表型五、GhADH1-4-HPEA通路通过调控生长素稳态协同ROS信号调控纤维伸长

转录组分析发现,GhADH1过表达与4-HPEA处理引发高度重叠的基因表达变化,激素信号通路是核心富集类别,尤其集中在生长素信号通路。

生化检测显示GhADH1-4-HPEA通路可以提升纤维内源IAA含量;生长素抑制剂能够消除过表达带来的长纤维表型。进一步机制研究表明,4-HPEA不直接调控生长素合成与转运基因,很可能通过抑制GH3基因,减少生长素的共价失活,以此维持细胞活性生长素稳态。另外该通路同时提高纤维ROS积累,生长素与ROS协同共同驱动纤维细胞伸长。


图5 4-HPEA通过调控生长素相关基因表达与生长素积累调节纤维伸长六、研究总结与科学意义

该研究揭示了GhADH1-4-HPEA全新次生代谢通路正调控棉纤维伸长。

  1. 理论创新:拓展ADH家族在植物细胞形态建成中的新功能;最重要的是发现酚类代谢物4-HPEA作为信号分子调控单细胞棉纤维伸长,丰富棉纤维发育的调控网络。该物质纳摩尔起效,具备类激素特征。

  2. 机制解析:GhADH1催化生成4-HPEA;4-HPEA抑制GH3介导的生长素失活,维持生长素稳态,协同ROS促进纤维伸长。

  3. 应用前景:GhADH1和4-HPEA为长绒棉代谢工程提供靶点;4-HPEA高效的生理活性,预示它有开发为棉花天然生物刺激剂的巨大潜力。

论文共同第一作者:河南大学已出站博后李海鹏、郭敬功教授、已毕业硕士研究生张紫琪;苗雨晨教授、贾昆鹏教授为共同通讯作者。研究得到海南省“南海新星”项目、国家自然科学基金青年基金C类等多项基金支持。

https://doi.org/10.1093/plphys/kiag806

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