从属性识别到结果表征：难测试化�...

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（来源：中国化工信息周刊）

关键词 | 化学物质水生毒性 测试策略

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化学品水生态危害评估是开展环境风险管控的重要基础工作，而部分具有难溶、易挥发、易降解等特殊理化属性的难测试化学物质，采用常规水生毒性试验方法往往难以得到稳定、可靠的试验数据，制约该类物质环境风险的科学评价。针对难测试化学物质的水生毒性测试，经济合作与发展组织（OECD）出台了No.23文件《关于难测试化学品的水溶液水生毒性测试导则》，为试验人员调整暴露方式、优化试验条件、开展浓度分析和结果解释提供国际技术参考。立足我国本土受试生物资源与生态环境试验实际需求，生态环境部组织编制国家生态环境标准《难测试化学物质水生毒性测试技术指南（征求意见稿）》，该标准前期草案名称为《特殊属性化学物质水生态危害测试技术指南》，经专家评审完成更名，文件针对难测试属性识别、测试方法改进、暴露浓度分析和毒性结果表征，提出了适配我国生态试验现状、内容更为细化完备的技术要求。

《难测试化学物质水生毒性测试技术指南（征求意见稿）》中难测试属性指标：

对于整个试验及评价过程，根据标准，可按以下思路进行：

1.难测试属性识别

基于现有数据（分子式、结构式、理化性质、QSAR预测等）进行初步筛查，判定受试物属于哪一类难测试物质；若现有数据不充分，则需通过试验研究进一步识别。

2.测试方法改进

因受试物为特殊物质，对HJ/T 153测试方法中测试对象选择、受试溶液配制、暴露系统选择和维护、样品采集与保存等过程进行必要的改进。对于同时具有多个难测试属性的受试物，需兼顾各种难测试属性的改进要求。

对于胶黏剂、光电材料等难溶受试物，受试物配制可采用直接添加法、助溶剂法、发生器法、悬浊液和乳浊液法等。对于表面活性剂类受试物，配制浓度应低于临界胶束浓度。为保证样品采集均匀，一般采集容器中全部样品或从不同位置取样后混合取样。

对于农药中间体等易挥发受试物，根据挥发性强弱不同，采取不同的溶液更新频率，在整个测试过程中，尽量采用零顶空、密闭方式来减少液面上方空间，配制环境温度尽可能低，但也要同时考虑减少打开容器换水的频率，减少溶液静置时间，以避免溶液挥发损失。样品采集采用零顶空样品瓶，24h内完成处理和分析。

对于医药中间体等易降解受试物，因受试物母体与其降解产物的毒性可能存在显著差异，基于受试物母体及其降解产物的水生毒性预试验结果或者QSAR预测结果。母体及降解产物均未观测到毒性时，以相对更稳定的一种物质形态作为测试对象；观测到毒性效应时，宜分别以母体及其降解产物开展毒性测试，或至少选择毒性较高的一种物质形态。对于需采用母体开展试验的，需考虑水解、光解、生物降解特性，采用增加溶液更新频率，避光等方法减少母体损失。对于需采用降解产物测试的，优先采用降解产物纯品，或采用母体溶液降解后的溶液进行测试。

对于纳米材料等吸附性强的受试物，可采用预饱和处理，避免膜过滤、减少溶液稀释和转移操作等方式来减少损失。

对于表面活性剂、电解液添加剂等离子型受试物，需考虑物质在不同pH值下的状态，在导则允许的范围内调整合适的pH值，并需同时考虑阴阳离子在溶液中的稳定性和毒性。

对于活性物质等易水解受试物，要根据水解速率选择采用原物质母体或水解产物进行分析。对快速水解的物质，采用水解产物标准品进行试验，或将母体溶液放置6倍半衰期或更长时间，再进行试验。

3.暴露浓度分析

优先采用HPLC、GC、HPLC-MS、GC-MS以及ICP等化学分析方法对暴露浓度进行定性定量检测。不适用时，可检测总有机碳（TOC）等综合性指标。重点关注分析方法的专属性、重复性、精密度；溶液配制和更新频次。

4.毒性结果表征

根据测试方法的改进情况和暴露浓度变化特征，合理表征毒性结果（如采用几何浓度平均值、时间加权平均浓度等）。单组分物质一般以溶解态受试物浓度表征；表面活性剂、带电聚合物和脂肪胺等自分散性物质，以分散在受试溶液中的全部受试物浓度表征；悬浊液或乳浊液采用最大分散浓度或临界胶束浓度表征；多成分物质的毒性结果一般以各主要成分（含量＞10%）的浓度表征，如各组分无法确定时，采用所有成分浓度加和进行表征。

小 结

难测试化学物质的水生毒性测试，关键在于先识别物质属性难点、然后控制暴露方式、再选择分析方法、最后合理解释结果。

只有通过系统的属性识别流程——从现有数据筛查到实验定性定量分析，从分析方法优化到试验方案调整——才能获得可靠、可解释的测试数据，为化学品环境风险评估提供有效支撑。