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图 1: Prime BSI 的大视野可以轻松跟踪多个膜片钳电极,图中有六个。前一个摄像头的视野溶液如黑色方块所示,仅显示四个电极的尖端。
背景
洛桑联邦理工学院 (EPFL) 设有神经微电路实验室 (LNMC),致力于研究和阐明神经微电路的结构和功能,特别是新皮质中的神经微电路。该小组由 Henry Markram 教授领导,成员包括研究科学家 Rodrigo de Campos Perin 博士,他正在结合荧光显微镜和膜片钳技术进行细胞内电生理记录。这项工作经常使用多片电生理学来记录多个神经元。
挑战
当对活神经元进行膜片钳(尤其是多重膜片钳)时,拥有良好的视野至关重要,以便准确定位与细胞相关的多个电极。 Perin 博士指出:“在我们通常的实验中,用我们以前的相机将四个电极保持在视野中被证明是具有挑战性的”。这种荧光和明场组合来定位电极意味着相机需要高动态范围来显示高信号和低信号而不饱和,并且需要高分辨率来更准确地确定正在修补和记录哪些细胞特征。
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我们最近开始使用 [Prime] BSI 相机作为解决方案,使我们能够以多种方式加速实验并使实验更加可靠……大大提高了荧光标记细胞识别和记录的可靠性。——罗德里戈·德·坎波斯·佩林博士
解决方案
Perin 博士现在在该应用中使用 Prime BSI sCMOS 相机,并受益于大视场和出色的分辨率。正如 Perin 博士所提到的:“我们最近开始使用 BSI 相机作为解决方案,使我们能够以多种方式加速实验并使实验更加可靠。” BSI 能够对荧光信号进行成像,同时还可以定位膜片钳电极,从而提高识别和记录荧光标记细胞的可靠性。
此外,BSI 的 11 位和 16 位模式提供了高动态范围,Perin 博士说:“帮助我们专注于实验,而无需在进行电生理记录时多次调整光强度。它还提供了额外的优势,可以更清晰地可视化解剖特征,而不会像我们以前的相机那样出现图像饱和现象。”
BSI 的大视场现在允许在高放大倍数下容纳六个或更多电极,并且即使感兴趣的细胞位于组织深处,也可以更轻松地定位目标细胞,从而需要更少的位置调整并使实验更快。最后,BSI 的 6.5 µm 像素提供出色的分辨率,这意味着可以在不损失图像质量的情况下扩展感兴趣区域,这是一种更适合改变物镜或光学变焦的方法,因为这可能会机械干扰记录。
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