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malid-tof测试原理

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malid-tof测试原理

关于mladi-tof,一个听起来高端大气的仪器测试,可能大家了解这个仪器会是关于田耕一靠研究它获得诺奖的故事。没错就是关于对这个仪器的研究是一个诺奖级别的,那么为什么这个仪器可以收获诺奖,它的工作原理是,又解决的哪些难题呢?

今天我们先来介绍一下关于maldi-tof工作的原理。

01 maldi-tof的基本构成

maldi-tof,中文全称:基质辅助激光解吸飞行质谱,是不是很长很绕。根据其中的关键词就能对进行字面意思的理解:基质辅助:仪器需要加入特殊的物质称为基质;激光解吸:需要使用到激光装置的一种技术;飞行时间质谱:质谱分析器(这个之前讲质谱的时候我们就讲过)实际上这也是一种质谱,那么根据质谱的普遍结构组成:离子源+质量分析器;我们知道maldi其实是一种离子化的方式,而飞行时间质谱(TOF)就是质量分析器的一种;因此这个仪器的核心,也就是关节的部分就是这种被称为maldi(基质辅助激光解吸)的技术。

02基质辅助激光解吸

这个词挺起很复杂的样子,实际上就是先将样品与一种有机基质进行混合,然后使用激光对这个基质进行轰击,在极短的时间内就能使得样品离子化,形成带一个电荷的准分子离子,这样就能满足后面TOF进行质量分析的要求。简单的来说就是经历以下几个流程:


基质辅助激光解吸流程

实际上对于这项离子化的技术而言,核心就是样品的离子化是先将基质离子化,然后基质传递使得样品带电从而实现的样品离子化的。那么为什么要这么麻烦地进行这样的离子化呢?飞行时间质谱(其他类型的质谱也一样)基本上是在真空环境下工作,换而言之是在气相中工作的,样品离子化之后必须要进入气相空间才能分析。对于一般的小分子而言,单纯的加热到沸点就能解决这个问题,但是一般来说分子量越大,沸点就越高,而对于有机物来说,一般C-C键在400℃以上就会开始断裂,单纯的加热肯定不行。(如Py-GCMS就是直接将大分子裂解成小分子片段来研究高分子的)。那么如果想研究完整的大分子咋办?如DNA;蛋白质;多肽;多糖等拆成零件不就没啥研究的意义了么?所以这个就能体现maldi技术的强大,换而言之就是这种技术足以获得诺奖的原因,因为它是先让基质离子化,然后传递给样品的,可以让样品保持自身原本的状态,因此maldi又称为软电离技术,得到的都是分子本身的准分子离子峰,并且基本上都是得到的单电荷峰;质谱结果很容易分析。我们可以发现,在这里面实际上核心的就是这个叫做基质的物质,是什么物质可以实现这么强大功能?一般来说要作为基质,需要满足一些条件:

1)对光敏感,能吸收激光能量

2)可以传递电荷

3)能够将离子化的样品从抛离基质市面上常见的基质如下图所示:


常见的基质

从它们的结构我们可以发现很多东西;首先它们都有苯环,而苯环就是就是对光线很敏感的结构,其次它们都含有羧基;羟基一类的基团,方便传递电荷;还有一点是结构上看不出的,它们的结构其实很容易结晶,室温下都是固体哦,是不是哪里有点奇怪?这点就与maldi-tof的实际测试过程有关系了,这个我们放到下期讲。

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