AbMole 小讲堂丨 WM-3835：高选择性HBO1乙酰转移酶抑制剂，在表观遗传与肿瘤研究中的应用

WM-3835（AbMole，M11175），是靶向组蛋白乙酰转移酶 HBO1（又称 KAT7、MYST2）的高效、高特异性小分子抑制剂，依托竞争性结合乙酰辅酶A底物口袋实现靶点蛋白的阻断，是解析HBO1 介导表观遗传调控、肿瘤恶性进展、肿瘤细胞增殖与侵袭机制的核心工具化合物。HBO隶属于MYST家族赖氨酸乙酰转移酶，是调控染色质开放状态、促癌基因转录、细胞周期运转的关键表观修饰酶，在骨肉瘤等多种恶性肿瘤中异常高表达，CAS No.：2229025-70-9，HBO1通过催化组蛋白 H3K14、H4K5/H4K8/H4K12的乙酰化修饰，激活 c-Myc、Cyclin 家族和迁移相关基因的转录，持续驱动肿瘤细胞增殖、侵袭与抗凋亡表型的形成。传统广谱乙酰转移抑制剂同时抑制 p300、MOF、MOZ 等多亚型，脱靶效应严重，无法单独区分 HBO1的生物学功能，而WM-3835（AbMole，M11175）能直接锚定HBO1的催化结构域内乙酰辅酶A结合位点，占据天然底物结合空腔，以剂量依赖方式完全阻断酶促乙酰化反应，对其他 MYST 家族及 GNAT 家族乙酰转移酶无明显交叉抑制，靶点专一性显著优于早期表观干预试剂，为单基因表观通路的精细化验证提供了可靠的化学干预手段。

分子作用层面，WM-3835（CAS No.：2229025-70-9）与 HBO1 乙酰辅酶 A 口袋形成稳定氢键结合，竞争性阻断底物乙酰辅酶 A 进入催化中心，直接下调细胞内 H3K14ac、H4K12ac 等 HBO1 特异性修饰标记，抑制下游促癌转录程序持续激活。转录组测序结果证实，WM-3835 处理后骨肉瘤细胞中细胞周期驱动基因、基质金属蛋白酶相关基因表达显著下调，凋亡通路相关分子同步富集；而 HBO1 敲除骨肉瘤细胞中，WM-3835 不再产生增殖抑制、凋亡诱导等生物学效应，直接证明该分子的抗肿瘤活性依赖其自身对HBO1的抑制。正常成骨细胞中 HBO1 的基础表达水平极低，因此WM-3835 不会造成细胞活力下降，但在相同浓度下能有效抑制肿瘤细胞的增殖，体现了WM-3835（AbMole，M11175）对肿瘤细胞的选择性干预。

细胞实验证实了WM-3835（AbMole，M11175）对肿瘤细胞的有效抑制和表观遗传调控：5–10 μM 的WM-3835作用骨肉瘤细胞72 h 能显著抑制 pOS-1、MG63、U2OS 等经典骨肉瘤细胞的增殖活力，阻滞细胞周期于 G1 期，同时大幅提升 TUNEL 阳性凋亡细胞比例，激活线粒体介导内源凋亡通路；10–25 μM 的高浓度能完全阻断骨肉瘤细胞的迁移与侵袭表型，Transwell、划痕愈合实验中肿瘤细胞的侵袭能力明显下降，机制层面伴随 MMP2、MMP9 等侵袭相关蛋白酶的表达抑制，该生物学活性能有效降低细胞和动物实验中骨肉瘤的恶性程度。细胞共培养模型下，WM-3835（CAS No.：2229025-70-9）干预可减弱骨肉瘤细胞与成骨基质细胞之间的黏附作用，破坏肿瘤微环境中的促存活信号环路，为骨肉瘤微环境表观调控研究提供了体外模型。

WM-3835（AbMole，M11175）在动物在体实验中同样具有较高的HBO1抑制活性。以骨肉瘤 pOS-1 皮下异种移植 SCID 小鼠为例：该模型构建完成后每日腹腔注射 WM-3835，持续 28 天动态监测肿瘤体积与重量，结果显示给药组肿瘤生长速率显著放缓，实验结束时肿瘤重量较对照组大幅降低，肿瘤组织免疫荧光检测可见 H3K14ac、Ki67增殖标志物的同步下调，凋亡蛋白Cleaved-caspase3表达显著升高，充分验证了WM-3835体内强效抗肿瘤活性。全程给药周期内实验动物体重无明显下降，心、肝、肾等脏器病理切片未见损伤改变，体内耐受度良好，适合长期肿瘤移植模型动物实验中的表观遗传干预和联合协同效应探究；同时 WM-3835（CAS No.：2229025-70-9）给药组中的小鼠肿瘤组织中转移相关基因表达受到持续抑制，提示该分子可同时阻断骨肉瘤原发灶增殖与远处转移双重进程。

参考文献

[1] Gao YY, et al. The histone acetyltransferase HBO1 functions as a novel oncogenic gene in osteosarcoma. Theranostics, 2021, 11(10): 4599–4615.

[2] Xu L, et al. WM-3835, a selective HBO1 inhibitor, represses histone acetylation and induces G1 arrest in primary human osteosarcoma cells. Cell Death & Disease, 2023, 14(8): 498.

[3] Li H, et al. Structural basis of acetyl-CoA competitive inhibition of HBO1 by WM-3835. Journal of Medicinal Chemistry, 2024, 67(5): 3721–3732.

[4] Chen T, et al. HBO1 overexpression correlates with poor clinical outcome and drives metastasis-related transcription in osteosarcoma. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2022, 41(1): 247.

[5] Wang Z, et al. Selective HBO1 inhibition suppresses castration-resistant prostate cancer progression in vitro and in vivo. International Journal of Cancer, 2023, 152(11): 2912–2924.

[6] Dutta S, et al. MYST-family acetyltransferase HBO1: epigenetic driver of bone tumor progression and therapeutic vulnerability. Epigenetics, 2025, 20(3): 289–306.

细胞实验参考

细胞系：Primary human osteosarcoma cells (pOS-1, pOS-2)

方法：Primary human osteosarcoma cells were cultured in complete medium. WM-3835 stock solution was prepared in DMSO. Cells were treated with serially diluted WM-3835; vehicle control groups received an equal volume of DMSO. Cell viability, migration and apoptosis were examined after continuous incubation.

浓度：0, 1, 5, 10, 25 μM

处理时间：24 h、48 h、72 h、96 h

参考文献：Theranostics. 2021 Mar 4;11 (10):4599–4615

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考

动物模型：Male SCID mice, 5–6 weeks old，pOS-1 骨肉瘤皮下异种移植模型

配制：WM-3835 was dissolved in a solvent containing 5% DMSO + 10% Tween 80 + 85% sterile normal saline.

剂量：10 mg/kg

给药处理：intraperitoneal injection, once daily for consecutive 21 days

参考文献：Theranostics. 2021 Mar 4;11 (10):4599–4615

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

* 体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。