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近期多地遭遇台风、暴雨洪涝灾害,潮湿积水、温差波动的恶劣环境,让不少实验室的储存环境受到影响,大家也纷纷担忧:
受潮、久放的实验试剂会不会直接失效?很多封存许久的老旧试剂、留存多年的抗体是否彻底无法使用?
其实实验室的试剂「保质期」,从来都不是绝对的标准答案。
乔治 · 卡托雷蒂,一位来自意大利的生物学家,用他的研究为我们揭开了这一谜题。
26 岁抗体「老将」,能否准确检测?
意大利生物学家乔治 · 卡托雷蒂(Giorgio Cattoretti)和他的同事们对 38 个在冷藏环境中(4°C)保存了 12 至 26 年的病理学诊断抗体的有效性进行了测试,并发现这些抗体的有效性并没有因为长期搁置而被削弱。
具体研究方法、结果如下:
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图源:论文截图
四个独立的实验室测试了一批在 4°C 下保存了 12 至 26 年的诊断抗体。
包括 1986 年的抗角蛋白抗体 AE-1 和 AE-3、1992 年的抗角蛋白抗体、1993 年的抗 PCNA、1993 年的抗胰岛素多克隆抗体、1994 年的抗 LN5、1995 年的抗 MAC387、1996 年的抗弹性酶、1998 年的 HRP 偶联的抗 kappa 轻链、2000 年的抗 LN1 和抗 LN2。
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图源:论文截图
受监测的抗体类型包括多克隆和单克隆抗体,可能存在批次、动物或亚克隆的差异。
所有试剂都保存在 4°C,含有抗菌剂、缓冲液和蛋白质稳定剂或培养基。使用未过期的抗体作为对照组进行测试和比较。
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图源:网络
老抗体带来 89% 的成功检测
结果不负众望!26 岁高龄的抗体表现出了不错的成绩。
38 个抗体样本中有 34 个能够在常规处理的人组织上成功染色,也就是 89% 的成功检测率,且过期抗体的最佳工作稀释度与它们最初供应时的稀释度相匹配。
结果还显示 ,所有抗体都能染色表达水平广泛的组织抗原,包括一些非常弱的表达。
使用过期抗体得到的结果与使用当前未过期试剂的结果无法区分。以下是多种组织样本使用过期抗体染色的免疫反应性。
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图源:论文截图
图表中包括了结肠癌转移到肝脏的样本(AE1 和 AE3 染色)、唾液腺的 EMA 染色、结肠黏膜的细胞角蛋白染色、结肠黏膜下层的肌动蛋白染色、腭扁桃体的 CD34 抗体染色、野生型和突变型 TP53 的染色、CD45 抗体染色的扁桃体组织等。
看来,过期抗体在不同组织和不同抗原上的应用效果都不错。
回归现实,过期试剂仍要谨慎用
但其实,实验归实验,抗体归抗体。这一结果并不能代表全部过期试剂有效。实验室试剂的保质期因其类型和成分的不同而有很大差异。
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图源:网络
实验室部分常用试剂的保质期还是非常短的,比如酶通常在 -20°C 或 -80°C 下保存,保质期可能从几个月到几年不等,但活性可能会随时间降低。
血清需要在 -20°C 以下保存,通常保质期为 1—2 年,但长期保存后可能需要检测其效价。
而缓冲液(如 PBS):在 2-8°C 下保存,保质期可能从数月到一年,取决于是否添加防腐剂。
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* 备注:具体每种试剂的存储和使用条件应根据制造商提供的具体说明来确定。
最后,还是建议大家定期检查试剂的有效性,并根据实验室标准操作程序(SOPs)来处理和存储这些试剂。
你用过年龄最大的试剂是什么?哪一年的?你拿到理想结果了吗?请在评论区留言吧!
题图来源:Stephen Barnes/Science/Alamy
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