浙江
师弟
救命，细胞又崩了！昨天细胞铺的密度刚刚好；培养基新配的。上午加重组蛋白刺激，下午收 RNA；今天收上清做 ELISA，发现细胞变圆皱缩，出现脱落。这结果能信不？
那炎症因子怎么样？
师兄
师弟
你别说，虽然细胞状态差，炎症因子却高得漂亮。阴性对照好好的，一加重组蛋白就崩了
以我多年踩坑经验，最该怀疑是内毒素污染。
师兄
内毒素不仅导致细胞状态变差，甚至出现「蛋白有活性」的假象！
为什么内毒素会伤害细胞？
内毒素（Endotoxin）是革兰阴性菌外膜中独特的结构成分，主要成分是脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS），是维持细菌正常结构的主要成分。当细菌发生裂解、自溶或死亡后，内毒素会被大量释放，粘附在设备表面或污染试剂。
内毒素具有较强的热稳定性和吸附性，培养体系中混入的内毒素，不仅会造成细胞形态发生明显变化，如体积缩小、折光率降低等，还可抑制细胞的增殖。内毒素的磷酸基团能与细胞膜上的蛋白质反应，改变细胞膜形态，导致细胞功能障碍。对于细胞实验来说，内毒素的影响并不只是让细胞状态变差，更大的问题还在于干扰实验结果。
内毒素会造成哪些实验干扰？
1）制造「假阳性」炎症反应：在免疫学实验中，内毒素是典型的强效免疫刺激剂，可通过 TLR4 等模式识别受体激活下游炎症信号通路，诱导细胞因子表达升高。对于细胞因子检测、炎症信号通路分析、免疫细胞活化、抗原蛋白功能验证等实验来说，内毒素污染会直接影响实验结论。
2）增加样品异质性：在蛋白结晶和结构生物学研究中，样品均一性是决定实验成败的关键因素之一。内毒素结构复杂、异质性高，容易与蛋白样品或实验体系发生非特异性相互作用，增加样品复杂度和批次差异。对于结晶筛选、结构解析、蛋白互作研究等实验而言，这种额外异质性可能影响蛋白稳定性和均一性，增加结晶失败风险。
3）干扰体内药效与毒性评价：主要体现在动物实验中，对于体内给药、药效验证、毒性评价、免疫治疗研究和临床前药物开发而言，内毒素污染可能放大炎症反应，让研究者误判药物或蛋白本身的活性；还可能引入额外毒性风险，导致安全性评价结果失真。
4）影响细胞治疗质控：细胞治疗产品通常会经历体外扩增、激活、诱导分化或功能改造等流程。在这些过程中，如果所使用的重组蛋白、细胞因子或培养体系中存在内毒素污染，可能影响细胞增殖、活化状态、分化方向和最终功能。
如何避免内毒素污染呢？
针对这一问题，义翘神州给出了全新的解决方案，推出超低内毒素重组蛋白。其位于德克萨斯州的生物工程中心（C4B）采用先进的技术工艺和设备生产 ProPure™ 超低内毒素蛋白，将其内毒素水平水平控制在 0.05 EU/mg 以下，部分产品甚至达到 0.01 EU/mg，比行业标准的低了 10 倍以上，为细胞培养提供更可靠的选择。
如何实现超低内毒素？
义翘神州在蛋白生产过程中通过以下工艺升级，确保蛋白的超低内毒素水平：
源头预防：传统方法使用普通质粒和容器，内毒素从实验第一步就开始引入。义翘从质粒构建到缓冲液配制，采用严格的质量控制体系，使用无内毒素质粒和缓冲液、低内毒素吸附塑料容器，并遵循常规在位清洗（CIP）原则。
环境隔离：核心环节，义翘从「底盘细胞」层面切断污染源，美国生物工程中心（C4B）在设计之初就确立了「零大肠杆菌」的原则，不使用大肠杆菌表达系统，且不引入任何大肠杆菌或内毒素，从物理空间上彻底切断污染路径。
双重检测：我们采用 LAL（鲎试剂法）和 rFc（重组 C 因子法）方法检测内毒素浓度，严格监控内毒素水平，确保每一批次数据可追溯、可信赖。
基于这套严密的「预防-隔离-检测」三重控制体系，义翘神州能够将内毒素风险降至检测限值，为高敏感细胞实验、免疫功能研究、药物开发和临床前研究提供定制化的超低内毒素蛋白产品和服务，满足严苛的质量要求。
如何获得超低内毒素重组蛋白？
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义翘神州 ProPure™ 超低内毒素蛋白，内毒素水平降至行业标准（USP <85>：0.5 EU/mg）的十分之一。在美国 C4B 工程中心稳定生产，已面向国内开放订购。新品上市期间，全线 7 折，不玩满减套路，直接降价。
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关于义翘神州（SinoBiological）
义翘神州为全球生命科学基础研究与创新药物研发提供高质量产品与专业化服务，以重组蛋白、抗体、细胞培养基、酶及 CRO 服务为核心，构建覆盖多领域、多应用的产品服务矩阵。义翘神州建立了严谨的全流程质量管理体系，已通过 ISO 9001、ISO 13485、GMP、CNAS 及 CMA 等多项权威认证，确保从研发到交付的每一个环节质量可控、结果可溯，致力于成为全球科研机构与生物医药企业长期可信赖的合作伙伴。
北京义翘神州科技股份有限公司总部位于北京，于 2021 年 8 月在深交所创业板上市（股票代码：301047）。公司已在加拿大、美国、德国、日韩等国家和地区设立分/子公司，产品与服务覆盖全球 90 多个国家，累计引用文献超 20,000 篇。未来，义翘神州将坚持以高质量的产品和专业的技术服务，为生命科学探索与药物创新提供坚实支撑。
内容策划：王丹琦
内容审核：周育红
题图来源：图虫创意
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